重组人干扰素α—1b联合匹多莫德对反复呼吸道感染患儿免疫功能的影响

知猫 ⋅ 2024-01-19 19:39:57 ⋅ 阅读 ⋅ 医学论文范文

涂亚兰　曾辉

[摘要] 目的探讨重组人干扰素α-1b联合匹多莫德对反复呼吸道感染（RRTI）患儿免疫功能的影响。方法选择70例RRTI患儿为RRTI组，随机分为研究组和对照组，研究组给予重组人干扰素α-1b联合匹多莫德治疗，另选择30例健康儿童作为正常对照组，观察各组细胞免疫和体液免疫的变化。结果 RRTI组外周血CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞及CD4+/ CD8+比值、INF-γ、IL-4、INF-γ/ IL-4、IgA、IgM水平与对照组比较均有显著性差异（P<0.05）。研究组疗效优于对照组（P<0.05）。研究组治疗后2个月和停药后12个月外周血CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞及CD4+/ CD8+比值、INF-γ、IL-4、INF-γ/ IL-4、IgA、IgM水平与对照组均有显著性差异，停药12个月IgG水平显著高于对照组（P<0.05）。结论反复呼吸道感染患儿细胞免疫及体液免疫功能均存在失调，Th1/Th2平衡向Th2漂移，重组人干扰素α-1b联合匹多莫德对反复呼吸道感染患儿免疫功能有调节作用，改善免疫功能，纠正免疫动态平衡漂移，疗效显著。

[关键词] 重组人干扰素α-1b；匹多莫德；反复呼吸道感染；细胞免疫；体液免疫

[中图分类号] R725.6 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2014）08-0049-05

反复呼吸道感染（recurrent respiratory tract infections，RRTI）是儿童常见的感染性疾病，病情反复对患儿健康及身心发展产生严重不良影响。发病机制尚未明确，而发病相关因素众多，儿童免疫系统发育不全或功能紊乱是其中认可度最高和热门的研究方向，是临床治疗的切入点之一。以往有研究对RRTI患儿免疫功能紊乱状态存在争议，体液免疫和细胞免疫的平衡失调成为研究重点之一[1]。本研究由此作为观察切入点，对RRTI患儿免疫功能状态进行初步探讨，并对重组人干扰素α-1b和匹多莫德对免疫系统的调节作用在RRTI治疗中的应用价值进行分析，探讨RRTI临床治疗的方法。

1资料与方法

1.1临床资料

采用方便抽样法选择2012年1～7月我院儿科诊治的反复呼吸道感染患儿70例，临床诊断依据中华医学会儿科分会呼吸学组制定的反复呼吸道感染诊断标准[2]，排除肺及气道发育异常或畸形、先天性心脏病、恶性肿瘤、免疫缺陷疾病或长期使用免疫抑制药物。70例患儿，年龄1.5～7岁，中位年龄3.5岁，男32例，女38例，病程1～4年，平均（1.93±0.54）年，作为RRTI组，再随机分为研究组和对照组两个亚组，每组35例，两组年龄、性别、病程之间差异无统计学意义（P>0.05）。另选择同期在我院进行体检的健康儿童30例作为正常对照组，年龄1.5～7.5岁，中位年龄4岁，男13例，女17例，一般资料与RRTI组之间差异无统计学意义（P>0.05）。

1.2研究方法

RRTI组治疗前和治疗2个月、停药后12个月与正常对照组体检清晨抽取空腹静脉血4 mL，T细胞亚群采用流式细胞仪技术（FACSCalibur流式细胞仪，美国BD公司），检测外周血CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞比例，计算CD4+/ CD8+比值。细胞因子采用酶联免疫吸附法（imark酶标仪，美国Bio-Rad公司），检测外周血INF-γ、IL-4，计算INF-γ/IL-4比值。免疫球蛋白采用快速免疫透射比浊法（AU 2700大型全自动生化仪，日本奥林巴斯公司），检测外周血IgG、IgA、IgM水平。试剂均购自武汉博士德生物工程有限公司。

1.3 治疗方法

研究组和对照组均采取抗感染、止咳、解痉、化痰的常规急性期对症处理[2]，研究组在此基础上给予重组人干扰素α-1b（北京三元基因工程有限公司，国药准字S20010008）肌肉注射，3岁以下剂量为50万U/次，超过3岁剂量为100万U/次，每日1次，3～5 d为1个疗程；同时联合口服匹多莫得（唐山太阳石药业有限公司，国药准字H20010091），60 d为1个疗程。两组在治疗期间加强健康宣教和自我管理教育，缓解期避免感染、受凉，加强护理支持，电话随访或定期复诊随访，治疗2个月及停药后12个月观察免疫状态变化。

1.4疗效评价[3]

停药后12个月后进行疗效评价，显效：停药后12个月内未发生呼吸道感染或发生≤2次上呼吸道感染；有效：呼吸道感染次数明显减少，每次持续时间缩短，症状减轻，上呼吸道感染≤5次，下呼吸道感染≤1次；无效：呼吸道感染次数、持续时间及症状无明显改变甚至加重。

1.5统计学处理

采用SAS 9.0统计学软件进行统计学处理，计数资料采用χ2检验、秩和检验，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，采用t检验、F检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1 治疗前RRTI组患者外周血T细胞亚群、细胞因子、免疫球蛋白的变化

RRTI组外周血CD3+T细胞、CD4+T细胞及CD4+/CD8+比值均显著低于正常对照组（P<0.05），CD8+T细胞则升高（P<0.05），且CD4+/CD8+比值出现倒置，INF-γ水平显著低于正常对照组（P<0.05），而IL-4水平与正常对照组无显著差异，INF-γ/ IL-4比值则显著低于正常对照组（P<0.05），IgA、IgM水平显著低于正常对照组（P<0.05），见表1。

表1 治疗前RRTI组和正常对照组外周血T细胞亚群、细胞因子、免疫球蛋白比较（x±s）

2.2研究组和对照组疗效比较

见表2。两组随访时间13～17个月，两组疗效及有效率比较，差异有统计学意义（P<0.05）。

表2 研究组和对照组疗效比较[n（%）]

2.3研究组和对照组治疗前后外周血T细胞亚群变化的比较

研究组外周血CD3+T细胞、CD4+T细胞水平在治疗后2个月显著升高，停药后12个月仍保持较稳定水平，对照组则在治疗后2个月显著升高后至停药后12个月逐渐降低，研究组治疗后外周血CD3+T细胞、CD4+T细胞水平均显著高于对照组（P<0.05）。见表3。

研究组外周血CD8+T细胞水平在治疗后2个月显著降低，停药后12个月仍保持较稳定水平，对照组则在治疗后2个月、停药后12个月逐渐降升高，研究组治疗后外周血CD8+T细胞水平均显著低于对照组（P<0.05）。

研究组外周血CD4+/CD8+比值在治疗后2个月纠正倒置，停药后12个月仍保持较稳定，对照组则在治疗后2个月纠正倒置后逐渐降低，停药后12个月仍为比例倒置，研究组治疗后外周血CD4+/CD8+比值均显著高于对照组（P<0.05）。

表3 研究组和对照组治疗前后外周血T细胞亚群变化的比较（x±s，n=35）

2.4研究组和对照组细胞因子及Th极化变化的比较

研究组外周血INF-γ水平在治疗后2个月显著升高，停药后12个月仍保持较稳定水平，对照组则在治疗后均无显著变化，研究组治疗后外周血INF-γ水平均显著高于对照组（P<0.05）。见表5。

研究组外周血IL-4水平在治疗后2个月显著降低，停药后12个月仍保持较稳定水平，对照组则在治疗后均无显著变化，研究组治疗后外周血IL-4细胞水平均显著低于对照组（P<0.05）。

研究组外周血INF-γ/ IL-4比值在治疗后2个月显著升高，停药后12个月仍保持较稳定，对照组则在治疗后2个月显著升高，停药后12个月下降，研究组治疗后外周血INF-γ/ IL-4比值均显著高于对照组（P<0.05）。

2.5研究组和对照组治疗前后免疫球蛋白变化的比较

研究组外周血IgG水平在治疗后稍微上升，治疗后2个月与对照组比较差异无显著性（P>0.05），但治疗后12个月显著升高并高于对照组（P<0.05）。见表6。

研究组外周血IgA水平在治疗后2个月显著升高，停药后12个月仍保持较稳定水平，对照组则在治疗后均无显著变化，研究组治疗后外周血IgA水平均显著高于对照组（P<0.05）。

研究组外周血IgM水平在治疗后2个月、停药后12个月均呈升高趋势，对照组则在治疗后均无显著变化，研究组治疗后外周血IgM水平均显著高于对照组（P<0.05）。

3讨论

细胞免疫和体液免疫是人体抵御致病原侵袭的重要机制，在正常状态下各司其职保护人体健康，而免疫系统功能易受环境、心理、神经内分泌紊乱等因素影响，导致功能失调，儿童处于生长发育的重要阶段，免疫系统建立受遗传、宫内发育、喂养方式及居住环境等影响，所建立的免疫机能仍较为脆弱[4]。在致病原的刺激下可能发生功能紊乱，进而无法抵御侵袭诱发多种疾病，危及儿童生命健康。RRTI患儿反复出现呼吸道感染症状，呼吸道防御屏障和免疫应答机制是人体重要的防线，被认为与RRTI发生密切相关，但当免疫屏障功能失调时，则由定植或外源性致病菌感染导致发病，因此研究RRTI的免疫状态是临床治疗的重要切入点。T细胞亚群是细胞免疫的主要免疫应答细胞，初始CD4+T细胞通过不同的细胞因子诱导可分化为多种T细胞亚群，CD4+T细胞并对B细胞分化有调控作用，对细胞免疫和体液免疫都有调节作用，CD8+T细胞是主要的细胞毒性T细胞，对病毒感染及肿瘤细胞有杀灭作用，正常状态下与CD4+T细胞存在平衡，但在病理状态下，如HIV通过感染CD4+T细胞，而诱导CD8+T细胞对CD4+T细胞的清除，使得免疫系统出现严重抑制，CD4+/CD8+则显著出现倒置漂移现象，这种情况同样存在于多种免疫系统相关疾病中[5]。CD3在主要的T细胞表面表达，CD3+T细胞的数量可以了解T细胞的总量，从而对细胞免疫功能进行判断。免疫球蛋白呼吸道免疫屏障的重要组成，由B细胞分化的浆细胞和记忆细胞产生抗体形成免疫球蛋白，依赖免疫球蛋白的非特异性和特异性与病原体结合，诱导巨噬细胞吞噬病原体达到体液免疫的效果[6]。其中IgG、IgA和IgM是重要的临床检查指标，其水平降低都可考虑为体液免疫存在缺陷。细胞免疫和体液免疫也存在平衡，并可以由Th1/Th2表示，而INF-γ、IL-4分别为Th1细胞和Th2细胞分泌，两者比值可反映Th1/Th2的状态。

RRTI组在治疗前与正常对照组比较结果可见，CD3+T细胞、CD4+T细胞占比显著下降，而CD8+T细胞则升高，表明RRTI患儿细胞免疫的应答细胞减少，并出现CD4+/ CD8+的倒置，细胞免疫功能被抑制，而INF-γ/ IL-4的降低也反映了Th的极化作用使平衡向Th2漂移；IgG水平虽然下降并不显著，但IgA和IgM水平均显著降低，分泌型IgA是呼吸道主要免疫球蛋白，而IgM是感染急性期主要反应因子，两者的缺陷表明虽然Th1/Th2平衡偏向体液免疫，但体液免疫状态同样存在缺陷。这可能与CD4+T细胞减少影响B细胞形成和分化有关，由于细胞免疫功能降低进而影响到体液免疫功能完善，使RRTI患儿体内免疫系统功能存在全面缺陷[7]，而细胞免疫功能下降可能发挥了重要的作用。

重组人干扰素α-1b是干扰素α-1b的人工合成制剂，干扰素通过抑制病毒转录或抑制肿瘤细胞分裂发挥抗病毒和抗肿瘤的效应，同时具有免疫调节功能，可增加效应细胞激活和数量，对细胞免疫功能有促进作用，提高抗原提呈细胞活性，增强体液免疫功能，促使机体免疫功能激活，增加免疫应答活力[8]。在呼吸道病毒感染、手足口病等病毒性感染疾病中应用效果显著。匹多莫德是一种免疫刺激调节剂，对细胞免疫和体液免疫功能都有增量刺激作用，增加CD4+T细胞数量和活性，增强单核细胞、中性粒细胞、肿瘤杀伤细胞、巨噬细胞的趋化及活性，被用于多种病毒性、变应性疾病的预防或治疗[9]。治疗组联合两者治疗，有效率为88.57%，效果显著优于对照组。

通过外周血动态数据分析可见，对照组在常规治疗2个月后细胞免疫和体液免疫均有一定幅度的提高，但Th1/Th2漂移并未纠正，停药后12个月均有所回落，甚至恢复治疗前水平，说明患儿体内免疫系统并未被充分调动，症状出现反复，难以维持长期效果；治疗组患者在治疗后2个月CD3+T细胞、CD4+T细胞水平显著升高，幅度大于对照组，细胞免疫应答细胞在重组人干扰素α-1b和匹多莫德的协同作用下明显增加，并趋向CD4+T细胞分化，CD4+/CD8+倒置得到明显纠正，细胞免疫活性增强，Th1细胞分泌的INF-γ增加而Th2细胞分泌的IL-4减少，Th1/Th2漂移情况得到纠正，但并未对体液免疫造成抑制，体液免疫的免疫球蛋白水平升高，其中IgA和IgM水平在治疗2个月时均已明显增加，提示呼吸道免疫屏障作用恢复，IgA和IgM的免疫活性随之增加，保护呼吸道免受外来病原体侵袭，同时清除定植细菌，调整呼吸道内环境[10]，而此时IgG水平升高并不显著，IgG作为一种长期免疫效应因子，升高速度不及前两者，但在停药后12个月，IgG水平明显升高并高于对照组，提示研究组患儿机体免疫系统激活和增强作用得到了较长期的维持[11]，从而获得更好的疗效，重组人干扰素α-1b联合匹多莫德不仅在治疗初期起到抗病毒、调节免疫、促进免疫清除等作用，其对细胞免疫尤其是T细胞数量和活性的增量刺激使得患儿免疫系统得到较稳定的调节，在机体免疫系统紊乱得到纠正恢复免疫平衡状态后[12]，达到可持续的正常运作，长期保护患儿呼吸道健康，减少感染发作。

总之，RRTI患儿细胞免疫及体验免疫功能均存在失调，Th1/Th2平衡向Th2漂移，细胞免疫尤其CD4+T细胞数量的减少可能是免疫紊乱的关键。重组人干扰素α-1b联合匹多莫德对反复呼吸道感染患儿免疫功能有调节作用，改善细胞免疫和体液免疫功能，纠正免疫动态平衡漂移，有利于RRTI患儿内环境恢复正常，提高疗效。

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（收稿日期：2013-10-15）