何 媛，周小娟，蒋 钦
(九江学院附属医院检验科，江西 九江 332000)
系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus，SLE)是一种临床常见的自身免疫性疾病，可累及皮肤、心脏、大脑、肾脏等多器官系统[1]，常见的并发症有动静脉血栓，肾脏病变，溶血性贫血等。SLE可表达多种自身抗体，并在一定程度上可表达抗心磷脂抗体(anticardiolinpin antibody，ACA)、抗β2糖蛋白Ⅰ抗体(anti-β2glycoprotein Ⅰ antibody，β2-GP Ⅰ-Ab)[2]。关于SLE并发血栓的发病机制，尚无统一定论。本研究通过检测不同亚型ACA和β2-GP Ⅰ-Ab在SLE患者中的表达，分析其在SLE合并血栓患者中的临床意义。
1 资料与方法
1.1研究对象：选择2016年2月～2019年2月在我院风湿免疫科门诊和住院的SLE患者128例，均符合2009年美国风湿病学会修订的SLE分类标准准[3]，排除其它免疫系统疾病且就诊前3个月内未给予激素以及免疫抑制剂等药物治疗的患者。根据是否具有血栓并发症分成有血栓SLE组(n=56)和无血栓SLE组(n=72)。血栓由多普勒超声、造影、影像学或组织病理学等检查证实。排除标准：①就诊前3个月内给予激素以及免疫抑制剂等药物治疗；②合并其他免疫系统疾病；③合并糖尿病、高血脂症和(或)高血压等心血管疾病；④合并肝功能损害；⑤肿瘤患者；⑥因骨折等原因卧床患者。
健康对照组为我院体检中心体检者50例,经体检排除心、肾、肺、肝等器质性疾病和糖尿病、高血压病、各种肿瘤、炎性反应和自身免疫性疾病等。本次研究经过我院医学伦理委员会同意。各组年龄、性别等一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05),有可比性。详见表1。
表1 各组一般资料比较
1.2方法
1.2.1标本采集：所有待测者清晨空腹抽静脉血4 ml，血液凝固后以转速3 000 r/min，离心5 min，分离出血清。
1.2.2检测方法：采用酶联免疫吸附法检测免疫球蛋白A(IgA)-ACA、免疫球蛋白G(IgG)-ACA、免疫球蛋白(IgM)-ACA、β2-GP Ⅰ-Ab。均使用德国欧蒙公司生产的试剂，严格按照操作说明书操作，并绘制标准曲线，计算出浓度。其中IgA-ACA、IgG-ACA、IgM-ACA>12 RU/ml为阳性，β2-GP Ⅰ-Ab>20 RU/ml为阳性。
2 结果
2.1各组中IgA-ACA、IgG-ACA、IgM-ACA、β2-GP Ⅰ-Ab阳性表达：与健康对照组相比，有血栓SLE组和无血栓SLE组IgA-ACA、IgG-ACA、IgM-ACA、β2-GP Ⅰ-Ab四个指标阳性率均更高，差异有统计学意义(P<0.05)。而有血栓SLE组该四个检测指标阳性率则高于无血栓SLE组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。
表2 各组中IgA-ACA、IgG-ACA、IgM-ACA、β2-GP Ⅰ-Ab阳性率比较[例(%)]
2.2各组中IgA-ACA、IgG-ACA、IgM-ACA、β2-GP Ⅰ-Ab水平比较：IgA-ACA、IgG-ACA、IgM-ACA、β2-GP Ⅰ-Ab水平比较结果为有血栓SLE组>无血栓SLE组>健康对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)。见表3。
表3 各组中IgA-ACA、IgG-ACA、IgM-ACA、β2-GP Ⅰ-Ab水平比较
3 讨论
SLE是一种自身免疫性疾病，是“继发性抗磷脂综合征”的典型代表。抗磷脂综合征临床特点为抗磷脂抗体阳性引起动静脉血栓形成，血小板减少，习惯性流产等。抗磷脂抗体主要包括ACA、β2-GPⅠ-Ab、狼疮抗凝物，具有异质性。本研究通过对SLE并发血栓患者血清中ACA、β2-GPⅠ-Ab检测，观察其在SLE并发血栓疾病中的临床作用。
ACA是包括IgA、IgG、IgM或者该三型免疫球蛋白的混合物。ACA也是一种自身抗体，可见于SLE等其他自身免疫性疾病中，其主要靶抗原有β2-GPⅠ、凝血酶原、蛋白C、膜联蛋白V及高分子量激肽原等。既往多项研究表明ACA与血栓形成相关[4-5]。在本研究中根据有无血栓症状，分别检测了不同组别SLE患者和健康对照者IgA-ACA、IgG-ACA、IgM-ACA。和健康对照组相比，有血栓SLE组和无血栓SLE组IgA-ACA、IgG-ACA、IgM-ACA阳性率和含量水平均要高，差异有统计学意义(P<0.05)，而有血栓SLE组该三个指标则高于无血栓SLE组，差异有统计学意义(P<0.05)。说明ACA 是SLE患者发生动静脉血栓的危险因素。其发生机制可能为ACA一方面抑制分泌血液中抗组织纤溶酶原激活物，另一方面促进释放纤溶酶原抑制物，使血液中纤维蛋白增加，患者机体处于高凝状态，进而导致血栓形成。此外，本研究结果发现不管是在血栓组还在无血栓组SLE患者中，IgG-ACA的阳性率在三种亚型中均最大，分别为60.71%和22.22%，而IgA-ACA阳性率最小，与张文兰等研究报道相符[6]。其可能原因为IgG-ACA半衰期长，免疫调理作用强，发挥主要免疫应答作用，而IgA-ACA由于在巨噬细胞、淋巴细胞缺乏相应受体，其免疫应答作用受限。
β2-GPⅠ于1961年发现，是一种磷脂结合蛋白，目前被认为是抗磷脂抗体在临床上关系最密切的抗原靶点。它与相应的抗体——β2-GPⅠ-Ab相互结合，在抗磷脂综合征的发病机制中发挥着重要的作用[7]。关于β2-GPⅠ-Ab和血栓疾病的关系，一直是近年的研究热点，亦有很多研究证明两者之间存在关系[6,8-9]。其机制可能为β2-GPⅠ-Ab既能通过降低抗凝血酶Ⅲ活性抑制凝血反应；还可干扰抗凝系统，活化蛋白C抗凝作用；另外，可通过活化血管内皮细胞及单核细胞，表达各种促凝物质[10]。本研究中检测的是有无血栓SLE组和健康对照组总的β2-GPⅠ-Ab，发现β2-GPⅠ-Ab的阳性率和含量水平结果为有血栓SLE组>无血栓SLE组>健康对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。这和各组中各型ACA的阳性率与水平结果相似。Belen E研究活动期SLE 患者发现，ACA、β2-GPⅠ-Ab 阳性比ACA、β2-GPⅠ-Ab阴性患者的血栓发生率高，差异有统计学意义(P<0.05)[11]，与本研究相符。
关于ACA与β2-GPⅠ-Ab二者的关系，有研究表明β2-GPⅠ-Ab在 ACA 与抗原结合中发挥着重要作用，ACA 通过β2-GPⅠ-Ab与内皮细胞或血小板上带负电的磷脂、蛋白磷脂复合物或磷脂结合蛋白(如凝血酶原、蛋白 C、蛋白 S 等)结合，增强组织因子表达，促进血小板激活和聚集，导致高凝状态，形成血栓[12]。
本研究显示，有血栓SLE组和无血栓SLE组IgA-ACA、IgG-ACA、IgM-ACA、β2-GPⅠ-Ab的阳性率和水平均比健康对照组高，提示IgA-ACA、IgG-ACA、IgM-ACA、β2-GPⅠ-Ab参与了SLE疾病发病。同时，有血栓SLE组中以上四个检测指标不管阳性率还是含量均高于无血栓SLE组，进一步表明IgA-ACA、IgG-ACA、IgM-ACA、β2-GPⅠ-Ab与SLE并发血栓密切相关，与张文兰等研究报道相符[6]。秦韬等研究亦称ACA和β2-GPⅠ-Ab阳性患者出现SLE并发血栓的风险明显高于ACA和β2-GPⅠ-Ab阴性患者[13]。
综上所述， IgA、IgG、IgM型ACA与β2-GPⅠ-Ab可能参与SLE患者血栓形成过程，联合和定量检测抗心磷脂抗体和β2-GPⅠ-Ab有助于评估和预测SLE合并血栓状态。
