施长友
慢性乙型肝炎(CHB)严重威胁着人类的生命健康。全球慢性HBV感染者约(3.5～4.0)亿人，我国属于乙型肝炎高发区域。HBV感染机体后出现急性自限性感染、迁延不愈形成慢性感染、以及发展为肝硬化、肝癌而夺取人的生命。现阶段抗病毒治疗慢性乙型肝炎是最常用也是最有效的治疗手段之一，然而抗病毒治疗疗效存在明显的个体差异，其中基线的HBV-DNA载量与抗病毒应答有直接关系，病毒载量越低抗病毒应答率越高［1］。CHB的发病与治疗时机选择均与患者免疫相关，本文就患者的T淋巴细胞与血清HBV-DNA载量相关性进行讨论，报告如下。
对象与方法
1.对象:选取2009年3月～2010年5月间在杭州市第六人民医院住院的乙型肝炎患者153例临床诊断均符合2010年我国新制定的《慢性乙型肝炎防治指南》诊断标准［2］排除其他型肝炎的感染以及引起肝损伤的疾病，其中男性80例，女性73例，年龄15～60岁，平均年龄42.5岁。
2.方法:血清HBV-DNA载量检测采用实时荧光定量PCR法，采用试剂为上海之江生物科技有限公司生产，检测仪器为美国应用生物系统公司生产AB7900-384荧光定量核酸检测仪。T淋巴细胞亚群检测采用流式细胞技术，所用试剂购自英国Proimmune公司，检测仪器为EpicsXL-MCL型流式细胞仪(美国Beckman Coulter公司)。所有检测项目均严格按照试剂盒说明书进行。
3.统计学方法:采用SPSS 13.0统计分析软件，两组间均数的比较采用t检验，多组间均数采用单因素方差分析，P＜0.05为差异有统计学意义。
结 果
153例CHB患者根据血清HBV-DNA载量分为HBV-DNA阴性组(病毒载量＜1×103IU/ml)75例，HBV-DNA阳性组(病毒载量≥1×103IU/ml)78例，阴性组非特异性T淋巴细胞平均值为45.27%±8.25%，非特异性T淋巴细胞平均值为20.25% ±5.18%。阳性组特异性T淋巴细胞平均值为25.58%±7.36%，非特异性T淋巴细胞平均值为33.17% ±6.42%，两组比较差别有统计学意义P＜0.05，数据统计见表1。
表1 不同HBV-DNA载量患者T淋巴细胞表达
讨 论
慢性乙型肝炎严重威胁人类的生命健康，已知当乙肝病毒HBV进入体内时其本身并不破坏被感染的肝细胞，其肝脏损伤机制主要由机体免疫系统介导，主要依靠细胞毒效应与非细胞毒效应两种免疫机制清除病毒，但在诱导机体免疫反应清除病毒同时也间接的损伤了肝细胞［3］。T淋巴细胞主要分为特异性T淋巴细胞和非特异性T淋巴细胞，特异性T淋巴细胞只清除靶细胞内的病毒，而对靶细胞本身并无损伤，清除方式为非溶细胞模式，而非特异性T淋巴细胞则表现的不同，在清除病毒的同时常损伤肝细胞。
笔者的研究发现，CHB患者血清HBV-DNA病毒载量的水平与外周血T淋巴细胞相关，在HBVDNA载量＜1×103IU/ml时，特异性T淋巴细胞水平较HBV-DNA≥1×103IU/ml时要高，这恰恰证实了高病毒载量患者特异性T淋巴细胞减少无法及时清除病毒，而特异性T淋巴细胞主要表达的是CD3+、CD4+等，Chang等［4］报道高病毒复制的乙肝患者其体内CD4+T淋巴细胞表现为下降的，这与笔者的高病毒载量患者特异性T淋巴细胞下降一致，邱洁等［5］实验证明乙型肝炎肝衰竭患者CD3+细胞数量明显减少，此时肝衰竭的主要原应为病毒持续复制。相反在两组患者外周血中非特异性T淋巴细胞则表现的不同，当病毒载量较高时非特异性T淋巴细胞表现的较为活跃，而非特异性T淋巴细胞在清除病毒时不具有选择性会连同肝细胞一同损坏，这也就是临床上常看到高病毒载量肝功能持续异常存在的可能原因。顾锡炳等［6］也认为慢性乙型肝炎病毒载量的高低与特异性T淋巴细胞呈负相关，与非特异性T淋巴细胞呈正相关，胡学玲［7］的实验也表明当病毒在105～107拷贝/毫升时T淋巴细胞CD3+、CD4+显着下降，当病毒＞108拷贝/毫升时CD8+T淋巴细胞显着升高。
通过笔者的实验研究可以看出，CHB患者血清HBV-DNA载量与患者外周血T淋巴细胞相关，在对CHB治疗的同时如能对T淋巴细胞进行检测这对了解CHB患者机体免疫状态以及选择抗病毒治疗均具有重要意义。
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2 中华医学会肝病学分会、感染病学分会.慢性乙型肝炎防治指南(2010年版)［J］. 中华临床感染病杂志，2011，4(1):1-13
3 Rushbrook SM，Hoare M，Alexaader GJ.T—regulatory lymphoeytes and chronic vival hepatitis［J］.Exper orlin Biol Vrher，2007，7(11):1689-1703
4 Chang JJ，Thompson AJ，Visvanathan K，et al.The phenotyre of hepatitis B viruv—specific T cells diffef in the liver and blood in Chronic hepatitis virvs infection［J］.Hepatolgy，2007，46(5):1332-1340
5 邱洁，龙启强，冯艳红，等.慢性乙型肝炎患者外周血NK细胞和T淋巴细胞计数变化及其临床意义［J］.实用肝脏病杂志，2010，13(3):178-179
6 顾锡炳，杨小娟，王栋，等.慢性乙型肝炎患者HBV DNA水平与细胞毒性T淋巴细胞及肝功能的关系［J］.中华传染病杂志，2010，25(8):497-499
7 胡学玲，陈天宝，范公忍，等.慢性乙型肝炎外周血T淋巴细胞亚群变化及其临床意义［J］.细胞与分子免疫学杂志，2010，26(9):912-913
