周 蕾 杜晓敏 张宗芳 王坤坤
系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）是一种以多系统、多器官受累为特征的自身免疫性疾病，其病因及确切的发病机制尚未完全明了，已有的研究证实细胞因子参与SLE的病理过程[1]。骨桥蛋白（osteopontin，OPN）是近年来发现的一种促炎症细胞因子，广泛分布于细胞外液、炎症部位和矿化组织的细胞外基质中，通过调控炎症基因表达，调节T/B淋巴细胞的分化和功能，参与免疫炎症反应，在多种自身免疫性疾病的发生、发展中起着关键性作用[2]。本研究通过检测SLE患者血清OPN水平，并分析其与SLE病情活动、重要脏器受累的相关情况，初步探讨SLE患者检测血清OPN的临床意义。
1 对象与方法
1.1 研究对象 选取2008年11月—2009年12月于我院就诊的SLE患者63例（SLE组），女57例，男6例，年龄14~63岁，平均（35±12）岁，病程7 d~20年，均符合1997年美国风湿病学会修订的SLE分类诊断标准，且近6个月未使用糖皮质激素及免疫抑制剂。依据SLE疾病活动指数(SLEDAI)将患者分为缓解组（0~8分）31例和活动组（≥9分）32例；根据肾功能、尿液分析及肾活检结果分为肾脏损害组32例和无肾脏损害组31例；参照2000年美国胸科协会/欧洲呼吸协会（ATS/ERS）的肺间质纤维化诊断标准将入选患者分为合并肺间质病变（interstitial lung disease，ILD）组22例和未合并ILD组41例；根据心电图、心脏彩色多普勒超声检查及心肌酶检查，分为心脏损害组25例和无心脏损害组38例；根据SLE患者的血常规检查结果将其分为合并血液系统损害组45例和无血液系统损害组18例。同期选取本院健康体检者（对照组）20例，女15例，男5例，平均年龄（36±10）岁，无自身免疫性疾病病史，无心、肺、肾和血液系统疾病史。SLE组与对照组年龄（t=0.87）、性别构成（χ2=1.24）比较差异无统计学意义（P>0.05）。所有研究对象均知情同意。
1.2 方法 所有入选者均空腹静脉采血3 mL，分离血清，-80℃保存待测。血清OPN水平的测定采用酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）法，试剂盒为美国R&D System公司生产，操作按试剂盒说明进行。
1.3 统计学处理 采用SPSS 15.0统计软件进行统计学分析。正态分布的计量资料以x ±s表示，组间比较采用t检验；非正态分布资料采用M（P25，P75）表示，组间比较采用两独立样本的秩和检验；相关分析采用Pearson或Spearman秩相关，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 SLE患者与对照组血清OPN水平的比较 SLE组血清OPN水平高于对照组，差异有统计学意义（P<0.01)；SLE各亚组间（活动组与缓解组、有无肾损害、有无血液系统损害、有无ILD及有无心脏损害）血清OPN水平差异均有统计学意义（P<0.05或P<0.01)，见表1。
2.2 SLE组OPN水平与临床实验室指标之间的相关性分析 SLE患者的血清OPN水平与24 h尿蛋白、抗ds-DNA定量、SLEDAI评分呈正相关（P<0.05），与血小板、补体C3呈负相关（P<0.05），与免疫球蛋白IgG无相关性（P>0.05），见表2。
3 讨论
OPN也称为早期T淋巴细胞激活因子，是一种强大的单核/巨噬细胞趋化和黏附因子，可以吸引巨噬细胞、树突状细胞（dendritic cells，DCs）向炎症部位聚集，参与炎症反应和免疫损伤[3]，并促进Th1细胞因子的表达和巨噬细胞分泌干扰素IFN-γ、IL-12等，从而促进B细胞增殖和抗体的产生[4]。同时OPN能抑制NF-κB的活化，进而抑制包括前B细胞、T细胞在内的多种免疫细胞的凋亡[5]。因此，OPN通过影响多种细胞的功能参与免疫应答和炎症反应，与多种自身免疫性疾病的发生和疾病活动相关。
表1 SLE组与对照组及SLE各亚分组血清OPN水平的比较 （μg/L，x ±s）
表 2 SLE组OPN水平与实验室指标之间的相关性分析
SLE是一种病因未明由免疫机制介导的自身免疫性疾病，T/B淋巴细胞的活化失调，特别是Th1占优势在SLE的发生及其脏器损害中起重要作用。本研究结果显示SLE患者血清OPN水平高于正常对照组，且SLE疾病活动组OPN水平高于缓解组，提示OPN参与了SLE患者的免疫损伤和炎症形成机制。OPN在SLE中的作用机制尚不明确。已有的研究表明，OPN可以与T细胞表面的整合素CD44和αvβ3相互作用，诱导T淋巴细胞的激活及迁移[6]，增强Th1细胞因子的表达；而且OPN可以促进DCs的激活、迁移，并且诱导其向Th1的极化成熟，而DCs表达的细胞内OPN同样具有调节促炎细胞因子表达作用，并且能够影响Th1细胞系的分化[7]，在SLE的发病过程中起着极其重要的作用。OPN在体液免疫中同样发挥了重要的调节作用。Lizuka等[8]研究显示OPN转基因小鼠腹腔中的B淋巴细胞数量及血浆中的免疫球蛋白滴度均较野生小鼠有显着升高。本研究结果显示SLE患者的血清OPN水平与抗ds-DNA滴度成正相关，抗ds-DNA是由活化的B淋巴细胞直接产生的，表明血清中高水平的OPN使B淋巴细胞高度活化从而产生大量自身抗体，提示OPN参与了SLE的异常体液免疫反应。
SLE可累及多个系统和器官，其中肾脏是最为常见的受累器官之一。本研究显示SLE合并肾脏损害组血清OPN水平明显高于无肾脏损害组，且血清OPN水平与24 h尿蛋白定量成正相关。已经证实狼疮肾炎患者的肾小管OPN mRNA和蛋白表达明显升高[9]，用抗OPN抗体治疗实验性模型鼠新月体肾炎，可减少巨噬细胞和T淋巴细胞的浸润，减少尿蛋白，部分逆转肾功能[10]，提示OPN在SLE肾损害形成中起重要作用，并且与肾脏损伤的严重程度相关，血清OPN水平对SLE合并肾脏损害的诊断和肾损害程度的监测有一定的价值。
SLE合并ILD常起病隐匿，病变早期容易被忽视，随病情进展，晚期进展为肺间质纤维化、肺动脉高压，严重者可因呼吸衰竭而死亡。本研究结果显示SLE合并ILD患者血清OPN明显升高，与类风湿关节炎合并ILD的研究结果一致[11]。OPN作为一种促纤维化细胞因子在肺泡炎阶段开始表达，其水平持续升高，在纤维化阶段达高峰。在急性肺损伤阶段，OPN直接由活化的巨噬细胞产生的氧化亚氮诱导产生；而在肺纤维化阶段，活化的肺成纤维细胞是OPN的主要来源[12]。
此外，本研究结果显示，SLE合并有心脏损害组血清OPN水平明显高于无心脏损害组，有血液系统损害组的血清OPN水平明显高于无血液系统损害组，提示OPN可能参与了SLE患者RBC破坏的病理过程，其中的机制尚不清楚，有待深入研究。
综上所述，OPN作为体内重要的细胞因子和趋化因子，可能在SLE疾病发生和系统损害形成中起重要作用。对OPN的深入研究有利于对SLE发病机制的认识，并且OPN将有可能成为一个新的评价SLE疾病状态的生物学标志物。
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