周萍，刘娜，焦瑞宝，章文

(铜陵市人民医院临床检验中心，安徽 铜陵 244009)

Sysmex XN-3000全自动血液分析流水线由XN-3000血液分析仪、SP 10血涂片制备仪和流水线轨道三部分组成，血液分析仪部分有三个通道可以分析血小板(PLT)数值。PLT-I通道是以电阻抗法检测PLT数值，PLT-O通道是以激光法对荧光染料染色后的网织红细胞和PLT进行检测，得到网织红细胞相关数值和PLT数值，新增的PLT-F通道也是激光法检测，但所用染料是特殊的核酸染料，单独对PLT进行核酸染色后检测。本文以PLT计数的参考方法——手工法为对比的参照方法，以PLT减低程度不同分组比较，结果报告如下。

1 资料与方法

1.1标本来源2015年12月至2016年5月铜陵市人民医院住院患者118例，其中男76例，女42例，年龄26～92岁。所有样本PLT值均≤60×109·L-1。

1.2标本采集真空静脉采血以EDTA-K2抗凝，抗凝剂与血液比例严格符合标准，避免标本有凝块和溶血的情况。

1.3仪器和试剂血液分析仪为Sysmex公司生产XN-3000型全自动血液分析流水线，全部检测试剂、校准品、质控品均为Sysmex公司产的仪器原装配套试剂。显微镜为Olympus CX31型，手工法稀释液按《全国临床检验操作规程》[1]配制。

1.4方法每天在日常工作之前以校准品校正仪器，先检测不同水平的定值质控物以保证仪器处于稳定的工作状态。样本按参考方法手工法PLT值结果的高低分为四组：PLT≤15×109·L-1组21例、15×109·L-1

表1 四组样本PLT值比较

注：4种方法的比较为单因素重复测量方差分析

2 结果

2.1四种方法结果比较四组样本分别以PLT-I法、PLT-O法、PLT-F法、手工法检测的PLT值之间的差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。

2.2PLT值相关性分析PLT-F法与手工法相关系数最高，r=0.995 7，P<0.05；较低的为PLT-I法，其与手工法相关系数：r=0.940 9，P<0.05；介于中间的为PLT-O法，其与手工法相关系数：r=0.962 3，P<0.05。

3 讨论

住院患者的PLT值的结果异常中减低的表现明显多见，有骨髓造血原因的增生减低和免疫性PLT减少的情况，也有治疗药物影响所造成的PLT破坏的情况等。由于PLT在止血和凝血方面的作用，低值PLT检测的准确性对判断有无出血倾向很重要，准确的结果对临床用药控制和补充PLT的输注疗法有重要价值。参考方法手工法虽然较为可靠，但操作相对繁琐，不适合临床多样本和大规模体检的需要，仪器检测更为普遍和适合实际。Sysmex XN-3000全自动血液分析仪PLT-I法是根据PLT体积大小分析的电阻抗法，PLT-O法是荧光染料针对PLT α-颗粒染色后再以激光法检测荧光强度，可以排除和PLT相同体积的小红细胞和红细胞碎片的检测干扰，PLT-F法是以特殊的核酸染料针对PLT内的含核酸丰富的线粒体和粗面内质网进行标记，对PLT体积的大小无选择性，特别是在小体积PLT存在时标记相对更为精确。我们以三种检测方法在对低值PLT样本的结果分组比较后发现，仪器三种方法的结果与手工法比较，差异无统计学意义，这可能因为在绝大多数的临床样本中，有小红细胞和红细胞碎片干扰的现象是少见的，低值PLT样本中绝大多数病例的PLT的体积是正常的。

焦瑞宝等[2]研究中以Sysmex XT-2000i型血液分析仪为检测仪器，将PLT值按照PLT-I法和PLT-O法结果误差以10%为划分线分群，再按高、中、低、极低值分组比较PLT-I法、PLT-O法、手工法结果的差异，发现在误差<10%群中，各组病例的三种方法检测结果差异无统计学意义，这与我们的结果一致，而在误差≥10%群中，极低值组和低值组的PLT-I法结果明显低于PLT-O法和手工法，中值组和高值组的PLT-I法结果明显高于PLT-O法和手工法。更多研究对其它型号血液分析仪与手工法PLT计数比较中也报道[3-4]：在低值PLT组，PLT-O检测结果与显微镜计数法结果更接近，这与我们的研究结果一致。我们考虑在仪器上的两种方法误差明显时可能因为低值组存在PLT聚集引起假性减低的情况和高值组可能存在将小红细胞或红细胞碎片当成PLT的假性增高的情况，PLT-I法无法防止这些误差的发生。我们在实践中的经验证实，手工计数方法在确保检验质量的前提下，有着仪器法无法比拟的直观性，这与一些研究报道[5]相差显微镜手工计数法准确性、特异性、稳定性较好的情况相符。另有研究[6]以红细胞平均体积(MCV)大小分组观察后不同范围PLT值后发现MCV低于正常组存在小红细胞干扰PLT-I法检测引起的PLT假性增高的情况。

我们总结：在日常的工作中较为简便有效的检测模式是初始选择以PLT-I法为常规模式进行大批量样本的检测，如有PLT减低的病例，可以先观察PLT体积分布的直方图上有无分布曲线尾部抬高的情况，如有则说明可能存在小红细胞、红细胞碎片或

PLT聚集的干扰，在发现有PLT发布曲线异常的情况下，再结合PLT相关参数的观察中如发现有PLT平均体积(MPV)低于或高于正常参考范围或仪器未检测出MPV值时，可以再用PLT-F法进行复检，以提高检测的准确度。在相关性分析中可以发现，PLT-F法与手工法的相关性更高，这与方法的染色特性有关，也与PLT-F法使用的单独通道中，样本用量提高至5倍计数，颗粒计数更为精确有关。

综上所述，XN-3000 全自动血液分析仪的PLT-F法检测的准确性相比电阻抗法和PLT-O法更高，在低值PLT样本中，在有小红细胞或碎片的干扰情况和PLT体积异常减小的情况下，使用PLT-F法进行复检尤为必要。