张雄燕，黄一鑫，程 鹏
(1.浙江省台州市肿瘤医院内分泌科 317500； 2.浙江省台州市中心医院内分泌科 317700)
·循证医学·
单核细胞趋化蛋白-1-2518G/A位点基因多态性与糖尿病肾病易感性的Meta分析
张雄燕1，黄一鑫2，程 鹏1
(1.浙江省台州市肿瘤医院内分泌科 317500； 2.浙江省台州市中心医院内分泌科 317700)
目的评估单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)-2518G/A基因多态性与糖尿病肾病(DN)发病风险的关系。方法系统检索PubMed、Web of Science、EMbase、Cochrane Library、中国知网(CNKI)、万方和维普数据库中截至2016年10月收录的所有有关MCP-1 -2518G/A基因多态性与DN发病风险的文献。提取相关数据，应用STATA11.0统计软件计算合成数据的比值比(OR)和95%可信区间(CI)，同时评估研究的异质性、发表偏倚。结果共纳入的9项研究涉及2 767例独立样本，其中病例组为1 096例，对照组为1 671例。对于总体人群，在4个基因模型中均未发现MCP-1-2518G/A多态性与DN发病风险有关(显性模型：OR=1.01,95%CI:0.67～1.54；隐性模型：OR=0.93,95%CI:0.60～1.44；纯合子模型：OR=0.93,95%CI:0.70～1.23；杂合子模型:OR=0.89,95%CI:0.61～1.31)。亚组分析结果显示，在印度人群中，MCP-1-2518G/A基因多态性会显着增加DN的发病风险(显性模型：OR=1.56,95%CI:1.19～2.06)，但在中国人、土耳其人及韩国人中均未发现MCP-1-2518G/A基因多态性与DN的发病风险有关。结论总体人群中，MCP-1-2518G/A位点基因多态性与DN发病风险无关，但MCP-1-2518G/A位点多态性会增加印度人群DN发病风险，而不增加中国人群、韩国人群、土耳其人群中DN的发病风险。
单核细胞趋化蛋白-1；MCP-1-2518G/A；基因；多态现象,遗传；糖尿病肾病；Meta分析
糖尿病是目前我国主要的非感染性疾病之一，据统计，21世纪前10年我国成年人糖尿病患病率约为6.19%，仅次于心血管疾病和肿瘤，居于第3位[1]。微血管病变是糖尿病较为特异的病变之一，病理学上主要表现在视网膜、肾、心肌、神经组织及足趾的损害。其中糖尿病患者合并肾病的概率约为39.7%，糖尿病肾病(diabetic nephropathy，DN)也被认为是造成慢性肾衰竭的常见原因之一[2]。目前认为DN与糖代谢紊乱、血流动力学异常、氧化应激、免疫异常、炎性反应激活及基因遗传等多种因素有关，其中炎性反应是DN发病过程中的一个重要环节[3]。
单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1) 是趋化因子家族的重要成员之一，它可以激活单核细胞和巨噬细胞，并促使单核细胞或巨噬细胞向损伤的组织聚集，从而参与调节炎性反应的过程[4]。最近研究证实，DN患者外周血中MCP-1水平明显升高，提示MCP-1是DN发病的重要因素之一[5]。MCP-1-2518G/A基因多态性位点位于该基因5′端调控区，研究证实这一位点突变可以增加炎性反应刺激后MCP-1的表达水平。因此有学者推测MCP-1-2518G/A基因多态性有可能会增加DN发病风险[6]。
然而，目前关于MCP-1-2518G/A基因多态性与DN发病风险的研究结论不一，存在较大的争议。本研究拟通过收集已发表的病例对照研究数据，通过Meta分析的方法评估MCP-1-2518G/A因多态性与DN发病风险。
1 资料与方法
1.1文献检索策略 计算机检索PubMed、Web of Science、EMbase、Cochrane Library、中国知网(CNKI)、万方和维普数据库中截至2016年10月所收录的所有文献。检索的英文关键词包括：“diabetic nephropathy”“genetic polymorphism”“genetic variants”“monocyte chemotactic protein 1”“MCP-1”“monoctye chemotactic and activating factor”。检索的中文关键词包括：“MCP1-2518A>G”“单核细胞趋化蛋白-1”“单核细胞趋化和激活因子”“糖尿病肾病”“基因多态性”“基因突变”。同时辅助以手工检索。两个研究者通过阅读题目、摘要，必要时阅读文献全文后，严格依据所规定的文献纳入和排除标准对文献进行独立的评价，如两人意见不一致时，所有研究者共同参与评估是否纳入该篇文献。
1.2文献纳入和排除标准 纳入标准：(1)是评估MCP-1基因多态性与DN发病风险之间关系的研究；(2)病例对照或队列研究；(3)提供有病例组和对照组基因型的分布频数或从文献中可以计算出基因型的分布频数。排除标准：(1)重复报道的研究；(2)细胞和动物的研究；(3)缺少对照组的研究；(4)文献类型为综述、病例报告及Meta分析的研究。
1.3资料提取 两个研究人员通过阅读文献全文后将每一篇文献的作者信息、出版年、研究人群的种族、国家，以及病例组和对照组的样本数、基因型数目依次填写到提前制订好的标准表格中。如两人意见不一致时，第3名研究者参与确定所提取资料的准确性。
1.4纳入文献质量评价 所纳入研究的文献依据文献质量评价量表(NOS)标准进行评分，NOS评分大于等于7分认定为高质量的研究。具体评分标准参考文献[7]。
1.5统计学处理 所有统计学分析均采用STATA11.0软件，采用χ2拟合优度检验检查每个研究对照组基因型的分布情况是否符合哈迪-温伯格遗传平衡(Hardy-Weinberg equilibrium，HWE)。应用比值比(OR)及95%CI来评估在显性模型(GG+AGvs.AA)、隐性模型(GGvs.AA+AG)、纯合子模型(GGvs.AA)和杂合子模型(GGvs.AG)等4个不同基因遗传模型中MCP1-2518A>G多态性与DN发病风险关系。应Cochran′sQ检验评估各研究之间的异质性，当P<0.10或I2>50% 时认为具有异质性，应用随机效应模型计算OR及95%CI；反之则采取固定效应模型计算OR及95%CI。应用敏感性分析的方法评估所合成结果的稳定性。应用Begg′s检验所纳入的文献是否存在有发表偏倚，以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结 果
2.1文献检索结果及最终纳入研究的基本情况 如图1所示，通过系统检索共获得76篇文献，通过阅读题目和摘要排除51篇文献(包括30篇非DN研究，11篇重复检索文献，7篇综述类文章，3篇Meta分析)，所剩余25篇文章通过进一步阅读全文后再次排除不相关文献16篇(10篇实验动物，细胞研究和6篇非MCP-1-2518G/A位点的研究)，最终纳入密切相关的9篇文献。其中包括7篇亚洲人群的研究(2篇韩国[8-9]，3篇中国[10-12]，2篇印度[13-14])及2篇欧洲人群的研究(均为土耳其)[15-16]。纳入的9项研究共涉及2 767例独立样本，其中病例组为1 096例，对照组为1 671例。所有对照组人群均符合H-W遗传平衡，所有纳入研究的文献NOS评分均大于等于7分，见表1。
2.2Meta分析结果 总体人群数据汇总后，在4个基因模型中均未发现MCP-1-2518G/A多态性与DN发病风险有关(显性模型：OR=1.01,95%CI:0.67～1.54；隐性模型：OR=0.93,95%CI:0.60～1.44； 纯合子模型：OR=0.93,95%CI：0.70～1.23；杂合子模型：OR=0.89,95%CI：0.61～1.31)。同时，汇总的数据结果呈现出较大的异质性。本研究进一步应用亚组分析的方法来探索异质性的来源。如图2所示，亚组分析结果发现，当按国家进行亚组分析后，各个不同亚组的异质性显着下降，在印度人的显性模型研究中，MCP-1-2518G/A多态性会显着增加DN的发病风险(显性模型：OR=1.56,95%CI：1.19～2.06)，但在中国人、土耳其人及韩国人的研究中均未发现MCP-1-2518G/A多态性与DN的发病风险有关，见表2。
图1 文献筛选过程
纳入文献发表年限种族国家病例组(n)AAAGGG对照组(n)AAAGGGH-W平衡NOS评分(分)Joo等[8]2007亚洲人韩国267365237868是7Jeon等[9]2013亚洲人韩国28163*50349*是8王芸等[10]2013亚洲人中国103121555835是7唐焕文等[11]2009亚洲人中国42391874023是7程洁等[12]2007亚洲人中国244426558746是7Raina等[13]2015亚洲人印度597214113848是7Ahluwalia等[14]2009亚洲人印度94130161229736是8Karadeniz等[15]2010欧洲人土耳其2419026170是8Bagci等[16]2015欧洲人土耳其262936711017是8
*：AG+GG的总数目
表2 各种遗传模型的Meta分析结果
-:此项无数据
图2 MCP-1-2518G/A多态性与DN的发病风险在
纵坐标1～9分别代表纳入的文献8～16
图3敏感分析图
图4 Begg′s检验发表偏倚漏斗图
2.3敏感性分析及发表偏倚结果 如图3所示，将9项研究逐一排除后对于其他剩余的8项研究的数据Meta结果并没有导致显着的改变，表明该Meta分析的结果是稳定的。如图4所示，Begg′s检验未发现本研究存在有发表偏倚(Begg′s test:P=0.675)。
3 讨 论
尽管DN的发病机制是多因素的，但是炎性反应一直被认为是DN发病的重要环节。目前认为糖尿病导致的糖代谢紊乱可以导致肾脏局部炎性反应的发生，而这些炎性反应最终将导致肾脏的纤维化和结构重塑[17]。近来的动物研究发现早期炎症阶段的标志因子MCP-1参与了DN的发病过程[18]，MCP-1也被认为是预测DN发病的重要生物学标志[19]。-2518G/A位点是MCP-1基因研究得最为深入的一个突变位点，该位点突变可以增加MCP-1基因产物的表达量。目前发现MCP-1-2518G/A位点多态性与糖尿病[20]、恶性肿瘤[21]、冠心病[22]的发生密切相关。
最近关于MCP-1-2518G/A位点多态性与DN的研究屡有报道，但是结果不一致，存在较大的争议。本次Meta分析的结果显示，无论是对于总体人群而言，MCP-1-2518G/A位点多态性与DN发病风险并无关系。但是，本研究这一汇总结果存在有明显的异质性。通过进一步的亚组分析发现异质性可能来自于不同国家、种族，这可能是由于MCP-1基因型的分布频率在不同人群分布差异较大导致的[12]。本文对于不同国家人群的Meta结果发现，在印度人群中，MCP-1-2518G/A位点多态性增加DN发病风险，这与之前2篇印度人的研究[13-14]是一致的。对于中国人群，本文并未发现MCP-1-2518G/A位点多态性会增加DN发病风险，这与的程洁等[12]的研究一致。对于韩国人群和土耳其人群Meta的结果跟中国人群相似，也未发现该基因多态性与DN发病存在联系。
本研究也存在一些不足之处：(1)本研究总共只纳入了2 767例样本，总体样本量相对较小，研究结论论证的强度不够强，尚需要多中心、大样本的病例对照研究来验证。(2)本文分析所纳入的研究大部分是在亚洲人群中进行的，在欧洲人群的研究较少并且缺少非洲人群的研究，因此本结论尚需在更多的欧洲人群和非洲人群中验证。(3)影响DN发展的因素还包括年龄、高血压等因素，本研究所计算的OR值没有经过年龄、高血压等因素的调整，所以结论的可靠性要进一步论证。
综上所述，在总体人群中，MCP-1-2518G/A位点多态性与DN发病风险无关，但MCP-1-2518G/A位点多态性会增加印度人群DN发病风险，而在中国人群、韩国人群、土耳其人群中并未发现其会增加DN的发病风险，本研究的结论有待多中心、大样本的病例对照研究来验证。
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MetaanalysisonMCP-1-2518G/Agenepolymorphismandsusceptibilityofdiabeticnephropathy
ZhangXiongyan1,HuangYixin2,ChengPeng1
(1.Departmentofendocrinology,TaizhouMunicipalTumorHospital,Taizhou,Zhejiang317500,China;2.DepartmentofEndocrinology,TaizhouMunicipalCentralHospital,Taizhou,Zhejiang317700,China)
ObjectiveTo evaluate the relation between MCP-1-2518G/A gene polymorphism and the onset risk of diabetic nephropathy(DN) by the data of collected and publishedcase control studies and using the meta analysis method.MethodsAll literatures on moncyte chemoattractant protein-1(MCP-1)-2518G/A gene polymorphism and the onset risk of DN included in the databases of PubMed,Web of Science,EMbase,Cochrane Library,CNKI,Wanfang and VIP until October 2016 were systametically retrieved.Then the related data were extracted.The Stata11.0 statistical software was used to calculate the odds ratio(OR) of synthetic data and 95% confidence interval (CI),meanwhile the heterogeneity and publication bias of the studies were evaluated.ResultsA total of 9 studies were included involving 2767 independent samples,the number of cases was 1096,the control number was 1671.For the general population,the relationship between MCP-1 gene -2518G/A polymorphism and the onset risk of DN was not found in 4 gene models (dominant model:OR=1.01,95%CI:0.67-1.54;recessive model:OR=0.93,95%CI:0.60-1.44;homozygous model:OR=0.93,95%CI:0.70-1.23;heterozygous model:OR=0.89,95%CI:0.61-1.31).The subgroup analysis results showed that in India population,MCP-1-2518G/A gene polymorphism might significantly increase the onset risk of DN (dominant model:OR=1.56,95%CI:1.19-2.06),but in Chinese,Turks or South Koreans,the MCP-1-2518G/A gene polymorphism had no relation with the onset risk of DN.ConclusionIn the general population,MCP-1-2518G/A gene polymorphism has no relation with the onset risk of DN.But the MCP-1 gene -2518G/A polymorphism can increase the onset risk of DN in India population,while does not increase the onset risk of DN in Chinese population,Korean population and Turkey population.
] monocyte chemotaxis protein-1;MCP-1-2518G/A;gene;polymorphism,genetic;diabetic nephropathy;Meta analysis
张雄燕(1980-)，主治医师，本科，主要从事内分泌学研究。
2016年度重庆市出版专项资金资助项目
10.3969/j.issn.1671-8348.2017.36.032
R587.2;R692.9
A
1671-8348(2017)36-5137-04
2017-07-26
2017-09-04)
