一组关于限制酶试题的解题方法

赵春梅

(江苏省如皋市长江高级中学，江苏如皋 226532)

一组关于限制酶试题的解题方法

赵春梅

(江苏省如皋市长江高级中学，江苏如皋 226532)

限制酶主要存在于微生物中.一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子.它作用的部位是两个核苷酸之间的磷酸二酯键.

高中生物；限制酶

限制酶所识别的序列，无论是6个碱基还是4个碱基，都可以找到一条中心轴线，中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的(如右图).DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式——黏性末端和平末端(如下图).尽管微生物中含有某种限制酶，但它不会使自身的DNA被切断，并且可以防止外源DNA的入侵.

例1 基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选.已知限制酶I的识别序列和切点是-G↓GATCC-，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-.根据图示判断下列操作正确的是( ).

A．质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割

B．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割

C．目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割

D．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割

分析要想正确解答此题，首先要弄清两个问题：1.两个标记基因中至少要有一个保持完整性，因为重组质粒要具有标记基因，便于进行筛选；2.限制酶II也能识别限制酶I的识别序列.搞懂上述两个问题后，下面我们请看：质粒应用限制酶Ⅰ切割，而不能用限制酶Ⅱ切割，因为限制酶Ⅱ将破坏两个标记基因；目的基因要用限制酶Ⅱ切割，却不能用限制酶Ⅰ切割，这是由于限制酶Ⅱ能将目的基因完整地切割下来，而限制酶I只能将目的基因的左边切断.所以，正确的答案应选A.

例2 限制酶是一种核酸切割酶，可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸序列.下图为四种限制酶BamHI，EcoRI，HindⅢ以及BgⅢ的辨识序列.箭头表示每一种限制酶的特定切割部位，其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合?其正确的末端互补序列为何?( ).

A．BamHI和EcoRI；末端互补序列-AATT-

B．BamHI和HindⅢ；末端互补序列-GATC-

C．EcoRI和HindⅢ；末端互补序列-AATT-

D．BamHI和BgⅢ；末端互补序列-GATC-

分析要使两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合，必须使这两个DNA片段产生相同的黏性末端.从图中四种限制酶的识别序列和切点位置可判断出正确答案为D.

[1]黄献勇.高中生物课课堂教学有效性的探讨[J]. 高中生学习(师者),2014(11).

[责任编辑：季春阳]

G632

1008-0333(2017)25-0098-01

2017-07-01

赵春梅，江苏省如皋市长江高级中学，高中生物，中学一级教师，从事高中生物教学研究.