陆文英，吴 健，刘连庚，秦 劼△
(1.江苏省盐城市亭湖区人民医院检验科 224000；2.江苏省盐城市第一人民医院 224006；3.江苏省盐城市中医院检验科 224001)
·临床研究·
2012～2014年盐城地区新生儿遗传代谢病的筛查研究*
陆文英1，吴 健2，刘连庚3，秦 劼2△
(1.江苏省盐城市亭湖区人民医院检验科 224000；2.江苏省盐城市第一人民医院 224006；3.江苏省盐城市中医院检验科 224001)
目的 探讨盐城市新生儿遗传代谢病的筛查状况及确诊病例的随访情况。通过串联质谱技术在盐城地区筛查新生儿遗传代谢病的发生率及确诊病例的随访情况。方法 回顾性分析2012年1月至2014年6月在盐城市第一人民医院、亭湖区人民医院及盐城市中医院新生儿科进行新生儿遗传代谢病筛查的18 988例新生儿的筛查结果；利用串联质谱(MS/MS)、血液氨基酸谱和酯酰肉谱分析对筛查阳性患儿进行实验室检测并分析不同遗传代谢病的临床症状。结果 诊断出苯丙酮尿症(PKU)5例、中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症(MCAD)7例，丙酸血症(PA)6例，枫糖尿症(MSUD)4例。结论 新生儿遗传代谢病的筛查有利于遗传代谢病患儿得到早期、准确的诊断及治疗。
串联质谱技术； 遗传代谢病； 新生儿筛查
我国于1981年开始启动新生儿遗传代谢病筛查，并随着1994年10月《中华人民共和国母婴保健法》的颁布纳入了法制轨道，但由于经济文化、管理水平和地理环境存在很大的差异，我国新生儿遗传代谢病筛查模式不一，各地进展不平衡[1]。该类疾病临床少见，个体差异性大，且大多数缺乏特异性症状和体征，诊断较困难。随着串联质谱(MS/MS)技术的发展及项目的开展，越来越多的新生儿遗传代谢病能得到早期的明确诊断[2-4]。盐城市从2004年开始启动新生儿遗传代谢病筛查，起步较晚。2012年1月至2014年6月盐城市第一人民医院、亭湖区人民医院及盐城市中医院实验室对18 988例新生儿进行了遗传代谢病筛查，确诊了22例阳性患儿[5-6]。本研究通过分析筛查结果并观察阳性患儿的临床诊断及治疗情况，探讨盐城市新生儿遗传代谢病的筛查状况。现将研究结果报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选择2012年1月至2014年6月于盐城市第一人民医院、亭湖区人民医院及盐城市中医院进行新生儿遗传代谢病筛查的新生儿18 988例，其中2012年1～12月参加新生儿遗传代谢病筛查5 500例，占同期这3所医院出生新生儿总数的29.0%(5 500/18 965)；2013年1～12月参加新生儿遗传代谢病筛查7 808例，占同期这3所医院出生新生儿总数的48.0%(7 808/16 266)；2014年1～6月参加新生儿遗传代谢病筛查5 680例，占同期这3所医院出生新生儿总数的79.0%(5 680/7 190)。
1.2 方法 对遗传代谢病确诊患儿进行一系列常规检查。由南京金域研究所提供设备及MS/MS技术支持，采用API 2000型和API 4000型串联质谱仪(美国生物应用系统公司)分析检测新生儿出生24～48 h或48～72 h的干血滤纸片(DBS)标本。从DBS标本打孔取下血斑标本置于96孔板中，加入同位素内标，以甲醇液萃取，盐酸正丁醇衍生化后进行MS/MS分析。
1.3 统计学处理 采用Excel进行数据处理，计数资料以千分率表示。
2 结 果
2.1 新生儿遗传代谢病筛查情况 18 988例新生儿中确诊遗传代谢病患儿22例，阳性率为1.16‰；其中男12例、女10例；年龄14 d至3岁；病程2～16 d；3例患儿有家族遗传史；苯丙酮尿症(PKU)5例，约占所有筛查患儿的0.26‰，中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症(MCAD)7例，约占0.37‰，丙酸血症(PA)6例，约占0.32‰，枫糖尿症(MSUD)4例，约占0.21‰。
2.2 遗传代谢病患儿的临床表现 5例PKU患儿年龄14 d至2岁，男4例、女1例，病程3～7 d；7例MCAD患儿年龄10个月至3岁，男3例、女4例，病程2 d；6例PA患儿年龄2个月至2岁，男2例、女4例，病程16 d；4例MSUD患儿年龄1个月至1岁，男3例、女1例，病程3 d。所有患儿均出现发育落后、呕吐、意识障碍、呼吸异常、肌张力低下等临床表现；除MCAD和MSUD患儿，均出现惊厥。
2.3 遗传代谢病患儿的实验室辅助检查情况 实验室辅助检查结果显示，本研究4种遗传代谢病患儿均呈现尿酮阴性，血氨升高，血气分析均显示代谢性酸中毒；血常规检查显示PA患儿的血红蛋白(Hb)降低，其余3种遗传代谢病患儿血常规均正常；血生化检查显示PKU及MCAD患儿出现异常，PA及MSUD患儿均正常。
2.4 遗传代谢病患儿的MS/MS检测情况 对PKU患儿杂合子苯丙氨酸(Phe)的浓度及Phe/酪氨酸(Tyr)比值均升高；MCAD患儿辛酰肉碱(C8)浓度增高；PA患儿丙酰肉碱(C3)浓度升高；MSUD患儿血亮氨酸(Leu)、缬氨酸(Val)浓度增高，Leu/Phe比值明显增高。
2.5 遗传代谢病患儿的临床疗效 经过综合性治疗及处理，11例患儿病情好转后出院，10例患儿经过基础处理后转到南京儿童医院，1例MSUD患儿死亡。
3 讨 论
儿童遗传代谢病种类达百余种，临床表现复杂，可出现持续性呕吐、腹泻、黄疸消退延迟、喂养困难、发育落后、智力低下、电解质紊乱、呼吸困难、惊厥、血小板和中性粒细胞减少等症状。该类疾病危害大，诊断较为困难，需通过相应的特殊生化分析进行确诊。近年来，利用MS/MS技术对遗传代谢病进行的研究使不断完善对该类疾病的认识成为可能[7]。
PKU、MCAD、PA及MUSD均为常染色体隐性遗传疾病[8-10]。PKU主要造成苯丙氨酸代谢异常，患儿主要表现为智力低下、癫痫发作、尿臭等症状。本研究筛查的PKU患儿是由苯丙氨酸羟化酶辅酶缺乏引起的血苯丙氨酸的升高，称为四氢生物蝶呤缺乏症(BH4D)；以MS/MS技术测定DBS中PKU杂合子Phe的浓度和Phe/Tyr值均高于正常值。MCAD患者的主要症状表现为呕吐、嗜睡、昏迷、血氨增高、肝功能异常、发育落后及语言障碍；急性期患者肝脏有大量脂肪淤积，积聚的酰基化合物碳链愈长患者越快发生脑昏迷。本研究筛查的PKU患儿经MS/MS技术检测提示其C8浓度升高。PA的缺陷酶主要为丙酰辅酶A羧化酶，可导致丙酸及其代谢产物前体异常蓄积。本研究筛查的PA患儿临床表现为呕吐、纳差、抽搐、呼吸困难、意识障碍、严重代谢性酸中毒，高氨血症，其MS/MS技术检测提示C3增高。MUSD的缺陷酶为支链酮酸脱羧酶。本研究筛查的MUSD患儿有纳差、呕吐、呼吸浅促、循环障碍、肌张力低下、意识障碍、高氨血症、低血糖及严重代谢性酸中毒等症状。MS/MS技术测定DBS中血Leu、Val浓度及Leu/Phe比值均明显增高。
虽然盐城市新生儿遗传代谢病筛查起步晚，但盐城地区出生人口总数位居江苏省第二。2012年1月至2014年6月3所医院两年半的筛查总量将近2万，筛查量从2012年的5 500例增至2014年的近12 000例，筛查率从2012年的29.0%上升至2014年的79.0%，但与实际需求相比仍有很大的差距。由于MS/MS技术在临床上得到越来越多的应用，使遗传代谢病患者的筛查和诊断更为方便，同时提高了临床医生对该类疾病的认识，更好地避免误诊或漏诊的出现。因此，应及时对疑似患儿进行血氨检测、血氨基酸分析及乳清酸等相关检查，以明确诊断。
综上所述，在临床工作中，需警惕出现无明确原因呕吐、意识障碍、呼吸异常、惊厥、代谢性酸中毒、呼吸性碱中毒、智力低下及高氨血症等症状的危重儿童，考虑遗传代谢病的可能性。此外，进一步宣传新生儿遗传代谢病筛查的必要性，以便在全市范围内推广，以确保遗传代谢病患儿能够得到早期、准确的诊断及治疗。
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江苏省盐城市科技项目(YK2013008)。△
，E-mail：piaoxue1982717@sina.com。
10.3969/j.issn.1672-9455.2015.05.036
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1672-9455(2015)05-0669-02
2014-07-21
2014-10-18)
