白藜芦醇对H2O2及TGF-β2诱导人小梁网细胞的影响及机制探讨

齐艳，赵秀娟，徐琳琪，吴旭东△，汪建涛

细胞与分子生物学

白藜芦醇对H2O2及TGF-β2诱导人小梁网细胞的影响及机制探讨

齐艳1，2，赵秀娟2，徐琳琪1，2，吴旭东2△，汪建涛1△

目的 观察过氧化氢（H2O2）及转化生长因子（TGF）-β2诱导人小梁网细胞（HTMCs）后对纤维连接蛋白（FN）、胶原蛋白1型（COL1）、核因子（NF）-κB P65蛋白和白细胞介素（IL）-1β基因表达的影响及白藜芦醇（RSV）的干预作用。方法 （1）选取汇合度70%～80%的HTMCs分为5组。实验组于无血清培养基中分别加入浓度为150、300、450、800 μmol/L的H2O2处理，对照组的培养基中不加H2O2。Western blot法检测各组FN、COL1、NF-κB P65、NF-κB P65磷酸化（P-NF-κB P65）蛋白的表达，实时定量PCR法检测IL-1β基因的表达。（2）HTMCs细胞分为3组。对照组以不含H2O2及RSV的无血清培基处理，H2O2组以300 μmol/L的H2O2处理，H2O2+RSV组同时加入300 μmol/L的H2O2及25 μmol/L的RSV处理。检测各组上述蛋白和基因的表达情况。免疫荧光检测各组NF-κB P65 在HTMCs中的定位。（3）HTMCs细胞分为3组。对照组以不含TGF-β2及RSV的无血清培基处理，TGF-β2组以5 μg/L的TGF-β2处理，TGF-β2+RSV组为同时加入5 μg/L的TGF-β2及25 μmol/L的RSV处理。检测各组上述蛋白和基因的表达情况。结果 （1）与对照组比较，150、300、450、800 μmol/L组FN和P-NF-κB P65蛋白表达水平均增高，300、450、800 μmol/L组COL1蛋白和IL-1β基因表达水平增高（P＜0.05），其他指标比较差异均无统计学意义。（2）H2O2组较对照组FN、COL1、P-NF-κB P65蛋白和IL-1β基因表达水平均增高，而H2O2+RSV组较H2O2组上述指标均降低，H2O2+RSV组较对照组仅IL-1β降低（P＜0.05）。对照组仅细胞质表达NF-κB P65，H2O2组细胞胞质及核中均有NF-κB P65表达，且核中表达较多；H2O2+RSV组细胞胞质中表达NF-κB P65较核中多。（3）TGF-β2组较对照组FN、COL1、P-NF-κB P65的蛋白和IL-1β基因水平表达均增高（P＜0.05），TGF-β2+RSV组较TGF-β2组上述指标均降低（P＜0.05）。结论 H2O2和TGF-β2能上调HTMCs的FN、COL1、P-NF-κB P65蛋白及IL-1β基因的表达，可能参与青光眼的发生发展过程。RSV能抑制H2O2和TGF-β2对HTMCs的影响，对青光眼发挥一定的保护作用。

青光眼；小梁网；过氧化氢；转化生长因子β2；细胞外基质；核因子-κB；白细胞介素1β；纤维连接蛋白；胶原蛋白1型；白藜芦醇

青光眼在全球致盲眼病中居第2位，严重威胁患者的视觉质量［1］。小梁网细胞（trabecular meshwork cells，TMCs）细胞外基质（extracellular matrix，ECM）的异常沉积可使房水流出阻力增加，引起眼压升高，这是开角型青光眼（open angle glaucoma，OAG）的主要发病机制之一［2］。氧化应激、转化生长因子（transforming growth factor，TGF）-β2等可引起TMCs的ECM异常沉积［3-5］。其中，氧化应激还可通过激活核因子（nuclear factor，NF）-κB，使多种炎性因子表达升高［6］。研究表明，OAG患者小梁网组织中炎性因子白细胞介素（IL）-1β表达升高［7］。因此，青光眼的发生发展也可能与炎症的发生有关。白藜芦醇（resveratrol，RSV）是非黄酮类多酚化合物，具有较强的抗氧化能力［8］。研究表明，RSV可抑制TMCs中活性氧的生成［9］及多种炎性因子的表达［10］，但RSV能否抑制TMCs的ECM异常增多尚少见相关报道。本研究通过观察RSV对H2O2及TGF-β2刺激下TMCs的ECM、NF-κB P65 及IL-1β的影响，探讨RSV对青光眼的保护作用及可能机制。

1 材料与方法

1.1 材料 人小梁网细胞株（human trabecular meshwork cells，HTMCs）购自美国ScienCell实验室；过氧化氢（H2O2）购自中国aladdin公司；TGF-β2购自美国Peprotech公司；RSV购自美国Sigma公司；DMEM细胞培养液、胎牛血清、L-谷氨酰胺、丙酮酸钠、非必需氨基酸、青霉素/链霉素均购自美国Gibco公司。纤维连接蛋白（Fibronectin，FN）抗体、胶原纤维1型（Collagen 1，COL1）抗体均购自英国Abcam公司，NF-κB P65磷酸化（P-NF-κB P65）抗体、NF-κB P65抗体均购自美国CST公司，β-actin抗体购自南京诺唯赞生物科技公司；Western blot用羊抗鼠二抗及羊抗兔二抗购自美国KPL公司，免疫荧光用罗丹明标记山羊抗兔二抗购自北京中杉金桥公司；DAPI购自北京索莱宝公司，Trizol试剂及逆转录试剂盒购自美国Thermo公司；PVDF转印膜购自瑞士Roche公司，Bradford蛋白定量试剂购自美国BIO-RAD公司；ECL试剂盒购自美国PerkinElmer公司。

1.2 细胞培养 HTMCs培养基为含10%胎牛血清、20 mmol/L L-谷氨酰胺、1 mmol/L丙酮酸钠、100 μmol/L非必需氨基酸、100 U/mL青霉素、100 mg/L链霉素的DMEM高糖培养基，置于37℃含5%CO2的细胞培养箱培养。细胞生长状态良好，待汇合度达70%～80%后用于后续实验。

1.3 不同浓度H2O2对HTMCs的处理 选取汇合度70%～80%的HTMCs，在无血清培养基中分别加入浓度为150、300、450、800 μmol/L的H2O2处理2 h，另设不加H2O2处理HTMCs培养2 h为对照组。

1.3.1 Western blot法检测FN蛋白、COL1蛋白、NF-κB P65蛋白、P-NF-κB P65蛋白的表达水平 不同浓度H2O2处理HTMCs 2 h后，收集细胞，用含蛋白酶抑制剂（PMSF）的RIPA裂解液（25 mmol/L Tris-HCl pH=7.6，5 mol/L NaCl，1%TritonX-100，1% Na-deoxycholate，0.1%SDS，1 mmol/L EDTA）裂解HTMCs，冰上操作提取蛋白。用Bradford试剂进行蛋白定量后，取20～40 μg总蛋白进行SDS-PAGE电泳。分离胶总丙烯酰胺百分浓度选为8%（W∶V）。电泳结束后，采用湿转（4℃，300 mA，2 h）将蛋白转至PVDF膜上，室温封闭1 h，一抗4℃孵育过夜（FN抗体1∶8 000，COL1抗体1∶5 000，NF-κB P65抗体1∶3 000，P-NF-κB P65抗体1∶1 000，β-actin抗体1∶2 000）。次日，经TBST漂洗3次后，室温孵育二抗1 h（羊抗兔、羊抗鼠抗体1∶1 000）。TBST漂洗3次后，在PVDF膜上滴加ECL发光试剂，放入凝胶成像仪自动成像系统曝光。以β-actin为内参，Western blot法检测FN蛋白、COL1蛋白、NF-κB P65蛋白、P-NF-κB P65蛋白的表达。

1.3.2 实时定量PCR法检测IL-1β基因的表达 不同浓度H2O2处理HTMCs 2 h后，收集细胞，按照试剂盒说明书用Trizol试剂提取细胞总RNA，取吸光度比值（A260/280）在1.8～2.0之间的总RNA（1 μg）进行实验。先使用DNase I去除可能的DNA污染后进行逆转录合成cDNA。以cDNA为模板在7500实时荧光定量PCR仪上进行qPCR扩增。引物序列（5′→3′）GAPDH：上游GCACCGTCAAGGCTGAGAAC；下游TGGTGAAGACGCCAGTGGA；IL-1β：上游AACCTCTTCGAG GCACAAGG；下游GGCGAGCTCAGGTACTTCTG；GAPDH和IL-1β扩增长度分别为138和107 bp。反应体系：模板cDNA 1 μL，10 μmol/L上、下游引物各 0.1 μL，2×SYBR GREEN Master Mix 5 μL，无RNA酶水补足反应体系至10 μL。反应条件：95℃预变性5 min；95℃变性15 s，60℃退火和延伸40 s，40个循环。选取GAPDH作为内参基因。2-ΔΔCt法比较相对表达量，ΔΔCt=样本ΔCt-对照ΔCt。各指标重复3次取均值。

1.4 RSV对H2O2诱导的FN蛋白、COL1蛋白、NF-κB P65蛋白、P-NF-κB P65蛋白及IL-1β基因表达的影响 选取汇合度70%～80%的HTMCs，分为3组。对照组以不含H2O2及RSV的无血清培养基处理，H2O2组以300 μmol/L的H2O2处理，H2O2+RSV组同时加入300 μmol/L的H2O2及25 μmol/L 的RSV处理，以上各组均培养2 h。Western blot法检测各组FN蛋白、COL1蛋白、NF-κB P65蛋白、P-NF-κB P65蛋白的表达，方法同1.3.1。实时定量PCR法检测各组细胞IL-1β基因的表达，方法同1.3.2。

1.5 免疫荧光检测RSV对H2O2诱导的NF-κB P65核移位的影响 分组同1.4。4%多聚甲醛固定细胞10 min后，用含0.5%Triton X-100的PBS溶液透化处理5 min，PBS洗3次后，用5 g/L BSA室温封闭1 h。4℃过夜孵育一抗（NF-κB P65-抗体1∶400），PBST洗2次后，荧光二抗室温避光孵育1 h，PBST洗2次后，1 mg/L DAPI室温孵育5 min，PBS洗3次后，荧光显微镜下观察。

1.6 RSV对TGF-β2诱导的FN蛋白、COL1蛋白、NF-κB P65蛋白、P-NF-κB P65蛋白及IL-1β基因表达的影响 选取汇合度70%～80%的HTMCs，分为3组。对照组以不含TGF-β2及RSV的无血清培养基处理，TGF-β2组以5 μg/L的TGF-β2处理HTMCs，TGF-β2+RSV组为同时加入5 μg/L的TGF-β2及25 μmol/L的RSV处理，以上各组均培养12 h。Western blot法检测各组细胞FN蛋白、COL1蛋白、NF-κB P65蛋白、P-NF-κB P65蛋白的表达，方法同1.3.1。实时定量PCR法检测各组细胞IL-1β基因的表达，方法同1.3.2。

1.7 统计学方法 采用SPSS 20.0统计学软件进行数据处理。符合正态分布的计量资料用±s表示。多组间比较采用单因素方差分析（ANOVA），多样本组间两两比较先进行方差齐性检验，方差齐采用LSD-t法，方差不齐采用Dunnett T3法。P＜0.05为差异有统计学意义。

Tab.1 Comparison of related protein and gene expressions between H2O2-treated groups表1H2O2不同浓度组相关蛋白和基因表达水平比较 （±s）

Tab.1 Comparison of related protein and gene expressions between H2O2-treated groups表1H2O2不同浓度组相关蛋白和基因表达水平比较 （±s）

＊P＜0.05，＊＊P＜0.01；a与对照组比较，b与150 μmol/L组比较，P＜0.05

组别对照组150 μmol/L组300 μmol/L组450 μmol/L组800 μmol/L组F n 3 3 3 3 3蛋白表达FN 1.140±0.122 2.621±0.067a2.312±0.198ab2.187±0.157ab1.782±0.143ab47.198＊＊COL1 1.053±0.161 1.709±0.402 2.521±0.511a2.250±0.708a2.480±0.592a4.459＊P-NF-κB P65 0.988±0.018 1.155±0.046a1.813±0.115ab2.067±0.026ab1.815±0.059ab165.067＊＊NF-κB P65 0.939±0.053 0.985±0.075 1.049±0.087 1.056±0.072 0.934±0.025 2.339基因表达IL-1β 1.052±0.072 1.703±0.737 2.192±0.520a3.982±0.162a9.939±1.752a66.712＊＊

2 结果

2.1 H2O2不同浓度组相关蛋白和基因表达水平比较 与对照组比较，150、300、450、800 μmol/L组FN 和P-NF-κB P65蛋白表达水平均增高，300、450、800 μmol/L组COL1蛋白和IL-1β基因表达水平增高（P＜0.05），其他指标比较差异均无统计学意义。与150 μmol/L组比较，300、450、800 μmol/L组PNF-κB P65蛋白表达水平增高，FN蛋白表达水平下降，但仍高于对照组（P＜0.05）。不同浓度组NF-κB P65蛋白表达差异无统计学意义，见表1、图1。

2.2 RSV干预对H2O2诱导的HTMCs中相关指标的影响 各组NF-κB P65蛋白表达水平差异无统计学意义。H2O2组较对照组FN蛋白、COL1蛋白、PNF-κB P65蛋白及IL-1β基因表达水平均增高，而H2O2+RSV组较H2O2组上述指标均降低（P＜0.05）。H2O2+RSV组较对照组仅IL-1β降低（P＜0.05），其他指标差异均无统计学意义，见图2、表2。

2.3 RSV干预对TGF-β2诱导的HTMCs中相关指标的影响 各组NF-κB P65蛋白表达水平差异无统计学意义。TGF-β2组较对照组FN蛋白、COL1蛋白、P-NF-κB P65蛋白和IL-1β基因水平表达均增高（P＜0.05），TGF-β2+RSV组较TGF-β2组上述指标均降低（P＜0.05），见图3、表3。

Fig.1 Comparison of related protein expressions between H2O2-treated groups图1 H2O2干预下各组相关蛋白表达水平比较

Fig.2 Comparison of H2O2-induced related protein expressions under RSV treatment图2 RSV对H2O2干预下各组相关蛋白表达水平比较

Fig.3 Comparison of TGF-β2-induced related protein expressions under RSV treatment图3 RSV对TGF-β2干预下各组相关蛋白表达水平比较

Tab.2 Comparison of H2O2-induced related protein and gene expressions under RSV treatment表2 RSV对H2O2干预下各组相关蛋白和基因表达水平比较 （±s）

Tab.2 Comparison of H2O2-induced related protein and gene expressions under RSV treatment表2 RSV对H2O2干预下各组相关蛋白和基因表达水平比较 （±s）

＊＊P＜0.01；a与对照组比较，b与H2O组比较，P＜0.05

组别对照组H2O2组H2O2+RSV组F n 3 3 3蛋白表达FN 1.254±0.313 2.238±0.229a1.540±0.157b13.126＊＊COL1 1.093±0.104 1.826±0.027a0.997±0.046b136.362＊＊P-NF-κB P65 1.163±0.147 1.738±0.035a1.218±0.074b32.282＊＊NF-κB P65 1.049±0.050 1.101±0.107 0.890±0.082 2.339基因表达IL-1β 1.020±0.447 1.832±0.203a0.345±0.093ab159.856＊＊

2.4 RSV干预对H2O2诱导的NF-κB p65蛋白核移位的影响 对照组NF-κB P65只在细胞胞质中表达；H2O2组细胞的胞质及核中均有NF-κB P65表达，且部分细胞中细胞核表达NF-κB P65较细胞质中多；H2O2+RSV组的大部分细胞的细胞质中表达NF-κB P65较细胞核中多，见图4。

3 讨论

Tab.3 Comparison of TGF-β2-induced related protein and gene expressions under RSV treatment表3 RSV对TGF-β2干预下各组相关蛋白和基因表达水平比较 （±s）

Tab.3 Comparison of TGF-β2-induced related protein and gene expressions under RSV treatment表3 RSV对TGF-β2干预下各组相关蛋白和基因表达水平比较 （±s）

＊＊P＜0.01；a与对照组比较，b与TGF-β2组比较，P＜0.05

组别对照组TGF-β2组TGF-β2+RSV组F n 3 3 3蛋白表达FN 0.985±0.054 1.438±0.069a0.850±0.059b75.449＊＊COL1 0.918±0.076 1.561±0.065a1.231±0.102b47.124＊＊P-NF-κB P65 0.932±0.075 1.551±0.038a0.975±0.072b88.084＊＊NF-κB P65 1.179±0.156 1.133±0.082 1.093±0.044 0.507基因表达IL-1β 1.029±0.078 3.082±0.692a0.995±0.684b13.495＊＊

研究显示，青光眼眼压升高与TMCs的ECM异常沉积有关［2］。氧化应激是造成ECM异常积聚的重要机制之一［3］。Shen等［11］用300 μmol/L的H2O2处理HTMCs 2 h构建氧化应激损伤模型，发现ECM成分FN、COL1等表达水平升高。Li等［6］用200 μmol/L的H2O2处理猪TMCs造成慢性氧化应激后，发现NF-κB活性及炎性因子IL-1表达均升高。因此，氧化应激损伤不仅上调ECM相关蛋白表达，而且可以激活NF-κB信号通路，引发炎症反应的参与。本研究结果显示，与对照组比较，150、300、450、800 μmol/L组FN和P-NF-κB P65蛋白表达水平均增高，300、450、800 μmol/L组COL1蛋白和IL-1β基因表达水平增高，表明300 μmol/L H2O2处理HTMCs即可建立氧化应激损伤模型，从而激活NF-κB，上调炎性因子表达，造成ECM成分异常积聚。Yun等［12］用1 μmol/L的H2O2处理间充质干细胞，分别在处理15、30、60、90 min时检测发现NF-κB蛋白表达水平无明显变化，但其磷酸化水平均升高；在处理12 h 时 FN表达下降，基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）-12表达升高，表明H2O2可通过激活NF-κB来上调MMP相关蛋白的表达，使FN蛋白降解。本研究结果显示，与对照组比较，150、300、450、800 μmol/L组NF-κB P65蛋白表达水平无明显变化，与150 μmol/L组比较，300、450、800 μmol/L组P-NF-κB P65蛋白表达水平增高，FN蛋白表达水平下降，与上述研究结果相近。因此，结合相关研究，笔者认为，FN蛋白在低浓度的H2O2处理下升高明显，在高浓度的H2O2处理下表达下降，可能与相关MMP蛋白表达升高，进而导致FN蛋白发生降解有关。

RSV为多酚化合物，具有抗炎、抗氧化等多种生物活性［8］。研究表明，RSV可有效抑制氧化应激状态下活性氧的增多及炎性因子的表达［9-10］。另外，RSV可通过上调去乙酰化酶（sirtuin type 1，SIRT1）表达活性，从而延缓TMCs衰老［13］。以上研究均表明RSV对TMCs的氧化应激损伤具有一定保护作用，然而有关RSV对TMCs的ECM成分的影响如何均未明确。本研究结果显示，与H2O2组相比，H2O2+RSV组FN、COL1、P-NF-κB P65的蛋白和IL-1β基因表达水平均降低，NF-κB P65核移位现象也被有效抑制，提示RSV可有效抑制H2O2诱导的NF-κB信号通路激活以及ECM相关蛋白的上调，从而发挥对TMCs的保护作用。但是，本研究还发现，H2O2+RSV组FN、COL1、P-NF-κB P65蛋白表达与对照组无明显差异，因此，RSV在一定程度上可体现出对HTMCs的保护作用，但仍需结合其他手段对青光眼进行综合治疗。

TGF-β2是存在于人眼房水中的多功能多肽，其在原发性OAG患者房水中的浓度明显高于正常人［14］。研究表明，TGF-β2可诱导TMCs的ECM成分表达增加［15-16］。TGF-β可通过激活NF-κB P65的核移位来促进FN的表达，从而影响肺纤维化过程［17］。NF-κB P65作为转录因子还可以调控FN的转录水平，从而参与上皮间质转化过程［18］。ECM成分FN、COL1异常沉积加快了心肌的纤维化，NF-κB抑制剂PDTC可通过抑制NF-κB活性，从而阻止FN、COL1的异常积聚［19］。因此，TGF-β2与NF-κB均能调控FN、COL1的表达。本研究结果显示，与对照组相比，TGF-β2组FN、COL1、P-NF-κB P65蛋白和IL-1β基因表达水平均增高，提示在HTMCs中，TGF-β2诱导FN、COL1表达增加可能与NF-κB的激活密切相关。有关肾纤维化的相关研究表明，RSV可通过上调SIRT1来抑制TGF-β信号通路，降低COL1、FN的表达［20-21］。本研究结果显示，与TGF-β2组相比，TGF-β2+RSV组FN、COL1、P-NF-κB P65蛋白和IL-1β基因表达水平均降低，证实了RSV能有效抑制TGF-β2诱导的FN、COL1表达增加及NF-κB的激活。然而，TGF-β2+RSV组NF-κB P65与TGF-β2组差异无统计学意义，表明RSV并不能完全抑制ECM的异常积聚。

综上所述，青光眼的发生、发展与氧化应激损伤、TGF-β2及NF-κB信号通路密切相关。RSV可通过抑制NF-κB的激活、降低HTMCs炎性因子及ECM蛋白的表达，从而对青光眼TMCs的应激损伤产生一定的保护作用。RSV有望成为治疗青光眼的一种潜在药物。

（图4见插页）

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（2016-03-11收稿 2016-04-29修回）

（本文编辑 陆荣展）

The role and mechanism of resveratrol on trabecular meshwork cells induced by H2O2and TGF-β2

QI Yan1，2，ZHAO Xiujuan2，XU Linqi1，2，WU Xudong2△，WANG Jiantao1△
1 Tianjin Medical University Eye Hospital，School of Optometry and Ophthalmology，Eye Institute，Tianjin 300384，China；2 Deparment of Cell Biology，College of Basic Medicine，Tianjin Medical University△

Objective To investigate hydrogen peroxide（H2O2）and transforming growth factor-β2（TGF-β2）induced fibronectin（FN），collagen 1（COL1），nuclear factor（NF）-κB P65 proteins and interlukin（IL）-1β gene expression in human trabecular meshwork cells（HTMCs），and the interventional mechanism of resveratrol（RSV）.Methods （1）HTMCs with 70 to 80%confluency were divided into 5 groups.The experimental groups were treated with serum-free medium and with H2O2at concentrations of 150，300，450 and 800 μmol/L.The control group was treated with 0 μmol/L H2O2.The protein levels of FN，COL1，NF-κB P65 and NF-κB P65 phosphorylation（P-NF-κB P65）were measured by Western blot assay.The expression of IL-1β gene was measured by qPCR.（2）HTMCs were divided into 3 groups.The control group was treated withserum-free medium and without H2O2and RSV.The H2O2group was treated with 300 μmol/L H2O2.The H2O2+RSV group was treated with 300 μmol/L H2O2and 25 μmol/L resveratrol（RSV）.The expressions of proteins and genes mentioned above were detected in three groups.NF-κB P65 nuclear translocation was assessed by immunofluorescence technique.（3）HTMCs were divided into 3 groups.The control group was treated with serum-free medium and without TGF-β2and RSV.The TGF-β2group was treated with 5 μg/L TGF-β2.The TGF-β2+RSV group was treated with 5 μg/L TGF-β2and 25 μmol/L RSV. The expressions of proteins and genes mentioned above were detected in three groups.Results （1）Compared with control group，the protein levels of FN and P-NF-κB P65 were significantly increased in 150，300，450 and 800 μmol/L groups，the expression levels of COL1 protein and IL-1β gene were significantly increased in 300，450 and 800 μmol/L groups（P＜0.05）.There were no statistical significances between other indicators.（2）The expression levels of FN，COL1，P-NF-κB P65 proteins and IL-1β gene were significantly higher in H2O2group than those in control group，and which were significantly lower in H2O2+RSV group than those in H2O2group.Compared with control group，only the expression of IL-1β gene was decreased in H2O2+RSV group（P＜0.05）.NF-κB P65 was only expressed in cytoplasm in control group，while it was expressed in both cytoplasm and nucleus in H2O2group.Compared with H2O2group，NF-κB P65 was mainly expressed in cytoplasm.（3）Compared with control group，the expressions of FN，COL1，P-NF-κB P65 proteins and IL-1β gene were significantly increased in TGF-β2group（P＜0.05）.Compared with TGF-β2group，the indicators mentioned above were significantly decreased in TGF-β2+RSV group（P＜0.05）.Conclusion H2O2and TGF-β2can upregulate the expression of FN，COL1，P-NF-κB P65 proteins and IL-1β gene in HTMCs，which may be involved in the development and progression of glaucoma.RSV can inhibit the influence of H2O2and TGF-β2in HTMCs and exert a protective effect on glaucoma.

glaucoma；trabecular meshwork；hydrogen peroxide；transforming growth factor beta2；extracellular matrix；NF-kappa B；interleukin-1beta；protein fiber connection；collagen 1；Resveratrol

R775.2

A

10.11958/20160149

国家自然科学基金（81270994，31570774，81500170）；天津市科技计划项目（10ZCKFSY08400）；天津市教育委员会基金（093-201301）

1天津医科大学眼科医院，天津医科大学眼科研究所，天津医科大学眼视光学院（邮编300384）；2天津医科大学基础医学院细胞生物学系

齐艳（1990），女，硕士在读，主要从事眼视光学、青光眼研究

△通讯作者 吴旭东E-mail：wuxudong@tijmu.edu.cn；汪建涛E-mail：wangjiantao65@126.com