魏官 辛雁瑞 沈潇

摘要 目的： 探讨短暂性脑缺血发作（TIA）病人血清髓过氧化物酶（MPO）、肿瘤坏死因子受体相关因子6（TRAF6）水平及其对脑梗死（CI）发生的预测价值。 方法： 选取2020年3月—2022年3月大同市某三级甲等医院收治的147例TIA病人为TIA组，同期年龄相匹配的147名健康体检者为健康组。采用酶联免疫吸附法检测血清MPO、TRAF6水平。根据ABCD2评分将TIA病人分为高危组44例（ABCD2评分6～7分）、中危组52例（ABCD2评分4～5分）、低危组51例（ABCD2评分≤3分）；比较不同严重程度TIA病人血清MPO、TRAF6水平。根据TIA病人是否发生CI分为CI组（57例）和非CI组（90例），比较CI组、非CI组临床资料及血清MPO、TRAF6水平差异。分析TIA病人发生CI的可能相关因素。 结果： 与健康组比较，TIA组血清MPO、TRAF6水平升高，差异均有统计学意义（ P ＜0.001）。不同严重程度TIA病人血清MPO、TRAF6水平比较，差异均有统计学意义（ P ＜0.001）。与低危组比较，中危组、高危组血清MPO、TRAF6水平均升高（ P ＜0.05）；与中危组比较，高危组血清MPO、TRAF6水平均升高（ P ＜0.05）。与非CI组比较，CI组高脂血症占比、血清MPO、TRAF6水平较高，每个月发作次数增多，症状持续时间、发作至就诊时间延长，差异均有统计学意义（ P ＜0.05）。高脂血症、症状持续时间、每个月发作次数、发作至就诊时间、 MPO、TRAF6是TIA病人发生CI的因素（ P ＜ 0.001）。受试者工作特征（ROC）曲线分析显示，血清MPO、TRAF6预测TIA病人发 生CI的ROC曲线下面积（AUC）分别为0.870，0.862； MPO、TRAF6联合预测TIA病人发生CI的AUC为0.945，表明MPO、TRAF6联合可提高TIA病人发生CI的临床预测价值。 结论： TIA病人血清MPO、TRAF6水平升高，可能与TIA疾病严重程度及CI发生相关，且MPO、TRAF6联合预测TIA病人发生CI的临床价值较高。

关键词  短暂性脑缺血发作；脑梗死；肿瘤坏死因子受体相关因子6；髓过氧化物酶

doi：  10.12102/j.issn.1672.1349.2024.10.032

短暂性脑缺血发作（transient ischemic attack，TIA）是一种脑血管痉挛疾病，其发生率逐年升高，且趋于年轻化，可反复发作，易引发脑梗死（cerebral infarction，CI），CI是我国成年人致残、致死的重要原因  ［1.2］ ，因此，寻找可预测TIA病人发生CI的方法尤其重要。相关研究显示，TIA病人发生CI可能与炎症反应、凝血功能异常、动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）、氧化应激等相关  ［3.4］ 。髓过氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）是一种血色素蛋白，可影响AS，其在急性脑梗死（acute cerebral infarction，ACI）中呈高水平，MPO具有诊断ACI的潜在价值  ［5］ 。肿瘤坏死因子受体相关因子6（tumor necrosis factor receptor associated factor 6，TRAF6）参与炎症反应，影响免疫调节，其在CI中水平升高，与CI严重程度相关，TRAF6可辅助诊断CI  ［6］ 。本研究通过检测TIA病人血清MPO、TRAF6表达水平，分析二者对CI的预测价值，以期为临床预防TIA病人发生CI提供参考。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选取2020年3月—2022年3月大同市某三级甲等医院收治的147例TIA病人为TIA组，其中男103例，女44例，年龄50～72（60.94±7.25）岁。根据 ABCD2评分  ［7］ 将TIA病人分为高危组44例（ABCD2  评分6～7分）、中危组52例（ABCD2评分4～5分）、低危组51例（ABCD2评分≤3分）。另纳入同期健康体检者147名为健康组，其中男92名，女55名，年龄50～72（59.51±7.08）岁。TIA组和健康组性别、年龄比较，差异均无统计学意义（ P ＞0.05）。本研究符合《赫尔辛基宣言》，且经医院伦理委员会批准。

纳入标准：TIA病人符合《急性缺血性脑血管病中西医诊疗指南》  ［8］ 中TIA诊断标准；所有病人均为初次TIA，发病后24 h内入院；临床资料完整，且病人或家属对本研究知情同意。排除标准：伴有偏头痛、癫痫或其他神经系统疾病；伴有颅内出血、颅内感染、脑代谢性疾病、脑肿瘤、脑血管畸形；有颅脑外伤史、手术史；伴有免疫、凝血系统疾病或遗传代谢疾病等。

1.2 方法

1.2.1 资料收集

收集所有研究对象年龄、性别、高血压、高脂血症、糖尿病、吸烟、主要临床表现、发作次数、发作至就诊时间、症状持续时间等。

1.2.2 血清MPO、TRAF6水平检测

收集所有TIA病人入院次日和健康体检者体检当天空腹外周血，静置40 min后，以4 500 r/min离心7 min，分离血清，采用人MPO酶联免疫吸附法（enzyme  linked immunosorbent assay，ELISA）试剂盒（QY.SZ0647， 购自上海乔羽生物科技有限公司）、人TRAF6 ELISA试剂盒（DLR.TRAF6.Hu，购自无锡市东林科技发展有限责任公司）、酶标仪（ELX800，购自美国BIOTEK公司）测定血清MPO、TRAF6水平。

1.3 CI评估及分组方法

发生CI的TIA病人符合《中国急性缺血性脑卒中诊治指南2014》  ［9］ 中CI诊断标准，颅脑CT检查提示存在明显低密度影，同时伴有嗜睡、意识障碍、昏睡、昏迷及肢体障碍等临床表现。所有TIA病人入院后均进行3个月随访，随访方式为门诊复查或电话，随访终点事件为发生CI或随访时间结束。将发生C I的TIA病人作为CI组（57例），未发生CI的TIA病人作为非CI组（90例）。

1.4 统计学处理

采用SPSS 22.0统计软件进行数据分析。符合正态分布的定量资料以均数±标准差（ x  ± s ）表示，两组间比较采用  t 检验，多组间比较采用单因素方差分析；定性资料以例数、百分比（%）表示，采用 χ  2检验。采用Logistic回归法分析TIA病人发生CI的影响因素；受试者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线评估血清MPO、TRAF6预测TIA病人发生CI的临床价值。以 P ＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 TIA组、健康组临床资料比较

与健康组比较，TIA组血清MPO、TRAF6水平升高，差异均有统计学意义（ P ＜0.001）。详见表1。

2.2 不同严重程度TIA病人血清MPO、TRAF6水平比较

不同严重程度TIA病人血清MPO、TRAF6水平比较，差异均有统计学意义（ P ＜0.001）。与低危组比 较，中危组、高危组血清MPO、TRAF6水平均升高 （ P ＜0.05）；与中危组比较，高危组血清MPO、TRAF6水平均升高（ P ＜0.05）。详见表2。

2.3 CI组和非CI组临床资料比较

与非CI组比较，CI组高脂血症占比、血清MPO、TRAF6水平较高，发作次数增多，症状持续时间、发作至就诊时间延长，差异均有统计学意义（ P ＜0.05）。详见表3。

2.4 多因素Logistic回归分析TIA病人发生CI的影响因素

以TIA病人是否发生CI为因变量（发生＝1，不发生＝0），高脂血症（有＝1，无＝0）、症状持续时间（实测值）、每个月发作次数（实测值）、发作至就诊时间（实测值）、MPO（实测值）、TRAF6（实测值）为自变量，进行Logistic回归分析。结果显示，高脂血症、症状持续时间、每个月发作次数、发作至就诊时间、MPO、TRAF6是TIA病人发生CI的因素（ P ＜0.001）。详见表4。

2.5 血清MPO、TRAF6水平预测TIA病人发生CI的临床价值

ROC曲线显示，血清MPO预测TIA病人发生CI的ROC曲线下面积（area under curve，AUC）为0.870［95%CI（0.807，0.933）， P ＜0.001］，截断值为416.03 U/mL，约登指数为0.674，敏感度为80.7%，特异度为86.7%；TRAF6预测TIA病人发生CI的AUC为0.862 ［95%CI（0.793，0.932）， P ＜0.001］，截断值为6.06 μg/mL， 约登指数为0.678，敏感度为78.9%，特异度为89.9%；两者联合预测TIA 病人发生CI的AUC为0.945［95%CI （0.906，0.983）， P ＜0.001］，约登指数为0.803，敏感度为94.7%，特异度为85.6%。详见图1。

3 讨 论

TIA是一种常见的缺血性脑血管疾病，多发生于中老年人群，若不及时治疗，可能发展为CI，严重影响病人生存质量  ［10.11］ 。因此，寻找可预测TIA病人发生CI的方法，尽早预防、及时干预，对降低CI发生率有积极的临床意义。

MPO是由中性粒细胞分泌的一种蛋白，可促进活性氧产生，介导氧化应激反应，引起血管损伤，还可促进炎症反应，影响巨噬细胞吸收及泡沫细胞形成，加速AS，与缺血再灌注损伤、CI等疾病有关  ［12.13］ 。既往研究显示，MPO在发生脑疝的CI病人中呈高水平，MPO对CI病人预后有较好的预测价值  ［14］ 。Chen等  ［15］ 研究显示，MPO可促进氧化应激和神经炎症反应，引起脑缺血再灌注损伤，MPO可能是治疗ACI的潜在靶点。本研究中TIA病人血清MPO水平高于健康体检者，说明MPO可能参与TIA发病过程。TIA病人病情越严重，血清MPO水平越高，提示MPO可能与TIA病情严重程度相关。进一步本研究结果显示，发生CI的TIA病人血清MPO水平高于未发生CI的TIA病人，提示MPO可能与TIA病人发生CI密切相关，推测MPO可能通过调节活性氧产生，促进氧化应激反应，造成脑血管损伤，促使TIA病人发生CI；MPO可促进泡沫细胞形成，影响炎症反应，加速AS，从而促进TIA病人发生CI。本研究回归分析显示，MPO升高是TIA病人发生CI的独立危险因素，说明MPO水平增加，动脉硬化风险增加，促进CI发生。通过ROC曲线分析发 现，血清MPO预测TIA病人发生CI的AUC为0.870， 表明MPO对TIA病人发生CI有一定预测价值，检测血清MPO水平可能有利于判定TIA病人是否发生CI，为临床预防CI提供依据。

TRAF6是一种多功能信号转导分子，可影响血栓及淋巴结形成，参与细胞凋亡，介导免疫反应，通过激活核因子.κB等分子调节炎症反应，与脑缺血再灌注损伤病人有关  ［16.17］ 。相关研究显示，TRAF6在CI病人中表达上调，经唐古特白刺治疗后，TRAF6表达下调，其可能通过影响脑缺血再灌注损伤进而影响CI病理变化  ［18］ ；TRAF6在急性缺血损伤中呈高表达  ［19］ 。本研究结果显示，TIA病人血清TRAF6水平较高，且血清TRAF6水平随着TIA疾病加重呈升高趋势，提示TRAF6可能与TIA病情变化有关，辅助评估TIA病人病情；发生CI的TIA病人血清TRAF6水平高于未发生CI的TIA病人，与杜秀民等  ［6］ 研究结果一致，且TRAF6是TIA病人发生CI的独立因素，说明检测TRAF6水平变化可预测CI发生。本研究 ROC分析显示，血清TRAF6预测TIA病人发生CI的AUC为0.862， 提示TRAF6可能参与TIA病人发生CI的过程，且TRAF6可能是判定TIA病人是否发生CI的潜在指标，推测TRAF6可能通过影响核因子.κB等分子激活，进而促进炎症反应，在TIA病人发生CI的过程中发挥促进作用。同时本研究结果还显示，MPO、TRAF6联合预测TIA病人发生CI的AUC为0.945，高于二者单独预测，敏感度为94.7%，特异度为85.6%，表明MPO、TRAF6联合可提高对TIA病人发生CI的预测价值，可能是采用并联方式将两个指标联合预测CI，其中一个指标检测结果为阳性即可以判定为阳性，降低单一指标预测存在的漏诊现象，提高了敏感度。

本研究Logistic回归分析结果显示，患有高脂血症、TIA症状持续时间及发作至就诊时间越长、每个月发作次数越多是TIA病人发生CI的影响因素，与王海霞等  ［20］ 研究结果一致。曹晖等  ［10］ 研究显示，发作次数、发作至就诊时间、持续时间是TIA后发生CI的独立影响因素。发作持续时间越长、发作次数多可能提示脑组织损害严重，预后较差，且随着就诊时间延长，缺血半暗带损伤逐渐加重，导致更多的神经元损害  ［11］ 。

综上所述，MPO、TRAF6在TIA病人血清中水平较高，可能与TIA严重程度及其发生CI有关，二者均可作为预测TIA病人发生CI的血清标志物，且MPO、TRAF6联合可提高TIA病人发生CI的临床预测价值，作为临床预测TIA病人发生CI的潜在方法。本研究样本量有限，可能导致结果存在偏差，后期应扩大样本量，深入分析MPO、TRAF6在TIA并发CI中的具体机制，以期为临床防治CI提供依据。

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（收稿日期：2023.03.01）

（本文编辑 薛妮）