范兴兴，李新建，李改英，郭吉利，韩雪蕾，吕 刚，任广志
(河南农业大学牧医工程学院，郑州 450002)
猪Fosl2基因克隆、结构预测及其mRNA发育性表达变化
范兴兴，李新建，李改英，郭吉利，韩雪蕾，吕 刚，任广志*
(河南农业大学牧医工程学院，郑州 450002)
本试验旨在克隆猪Fosl2基因CDS序列并对其进行分析，研究该基因在猪的不同阶段各种组织(心、肝、脾、肺、肾、背最长肌、背部脂肪)中的发育性表达规律。以豫南黑猪为材料，利用RT-PCR技术克隆猪Fosl2基因CDS区域，利用生物信息学方法预测蛋白结构，应用qRT-PCR检测豫南黑猪7～180日龄上述组织中Fosl2基因的发育性表达。结果表明，猪Fosl2基因的CDS区为984 bp，编码327个氨基酸，跨膜序列为17～33位氨基酸，该肽链没有信号肽，为跨膜非分泌型蛋白，在122～187位氨基酸的位置存在亮氨酸拉链结构域，核苷酸和氨基酸序列同其他种属间的保守性很高。Fosl2基因拥有广泛的组织表达谱，在心、肝、脾、肾、肺、背最长肌和背部脂肪的不同发育阶段均有不同程度的表达，而其在肺中的表达量均高于同时期其他组织内的表达量，推测猪Fosl2基因可能与肺部组织的发育有关；其在背部脂肪不同发育阶段的变化趋势表明其可能参与调控猪脂肪的生成进而影响瘦肉率。本研究结果将为进一步研究猪Fosl2结构及其多功能奠定基础。
猪；Fosl2；克隆；序列分析；发育性表达
Fos基因家族包含4个基因：Fos、FosB、Fosl以及Fosl2(Fos-like antigen 2)，这些基因编码形成的亮氨酸链可以与Jun基因家族(包含C-Jun、Junb和Jund)编码的蛋白二聚合成活化因子蛋白1(Activator protein-1,AP1)[1]，而AP1与细胞增殖、分化和转化调控，细胞凋亡的发生，胚胎发育及器官发生以及体内免疫系统的调控功能相关[2]。近年来，随着AP1研究的日趋深入，人们发现Fos基因家族在细胞的增殖分化，动物体的新陈代谢、生长性状、免疫系统应答等生理活动中起着重要的调节作用[3]。V.Foletta等[4]1994年首次克隆出小鼠Fosl2基因的cDNA序列，并指出其在卵巢、胃、大肠、小肠、肺、心等内脏器官中呈现高表达状态，随后的研究更显示出该基因与人和动物的脂肪代谢[2]、骨骼发育[5-7]以及疾病和癌症的发生相关[8-10]，因此该基因也引起了动物育种界以及医学界的广泛关注。然而目前关于Fosl2的相关研究都集中在国外，且多数以人、牛、小鼠为主，猪上关于该基因的研究未见报导。本试验旨在揭示猪Fosl2的结构与功能，为进一步研究猪Fosl2的生物学功能提供参考。
1 材料与方法
1.1 试验材料与试剂
1.1.1 试验材料 选取同等饲养条件下喂养的7、30、60、180日龄豫南黑猪各3头，屠宰后立即取心、肝、脾、肺、肾、背最长肌、背部脂肪7种组织样品，迅速放入液氮中，-80 ℃保存，用于组织表达特性分析；同时，选取产仔母猪新鲜胎衣样品组织，放入液氮，-80 ℃保存，用于Fosl2基因CDS的克隆。
1.1.2 主要试剂 DL2000 Marker、TaqDNA聚合酶均购自北京康为试剂公司；凝胶回收试剂盒(TIANgel Midi)购自天根生化科技(北京)有限公司；X-gal、IPTG购自北京鼎国昌盛生物技术有限公司；Amp购自Sigma公司；RNAiso Plus Trizol、DEPC、大肠杆菌DH5α、反转录PCR试剂盒PrimeScript RT reagent Kit With gDNA Eraser、荧光定量PCR试剂盒购自TaKaRa公司，pTA2 Vector载体购自东洋纺(上海)生物科技有限公司。1.1.3 引物的设计与合成 通过比对GenBank上人Fosl2基因(BC022791.1)、牛(NM_001192950.1)、猕猴(NM_001260911.1)序列的保守区域后，利用Primer5.0设计克隆猪Fosl2基因CDS区的PCR引物，同时设计该基因以及内参基因GAPDH(AF017079.1)的荧光定量PCR引物，由生工生物工程(上海)股份有限公司合成，引物序列信息见表1。1.2 猪Fosl2基因CDS区扩增及产物的克隆与测序
提取样品组织总RNA，1%琼脂糖凝胶电泳检测总RNA的质量。使用PrimeScript RT reagent Kit With gDNA Eraser试剂盒及特异性引物对豫南黑猪总RNA进行去除基因组DNA以及反转录反应，利用RT-PCR方法扩增目的片段，反应结束后取PCR反应液5 μL进行琼脂糖凝胶电泳检测。将产物进行凝胶回收后，将PCR产物与pTA2载体连接，然后转化大肠杆菌DH5α感受态细胞，37 ℃恒温培养12～16 h后，Amp+平板挑取阳性菌落后提取质粒并进行PCR鉴定，选取阳性重组子送宝生物(大连)工程有限公司测序。
表1Fosl2基因及内参基因的引物信息
Table 1 The information of primers used in the study
基因名称Genename引物序列(5'-3')Primersequence产物长度/bpLengthofproduct用途PurposeFosl2F1-GAGGGCGGGGGAAGAAAAACAR1-GGTGAAACCAAAAGGCACTGAGCATT1427CDS克隆Fosl2F2-AGCAGAAATTCCGGGTAGATATGGR2-AGCGAGGGTATGGGTTGGACC138组织表达特性分析GAPDHF-GGTCACCAGGGCTGCTTTTR-CATTTGATGTTGGCGGGAT210组织表达特性分析
1.3 多物种种间Fosl2进化分析
应用DNAStar软件对8个不同物种间Fosl2 CDS区域的核苷酸及氨基酸序列进行同源性比较，构建Fosl2基因序列的进化关系树，Fosl2核苷酸及氨基酸序列信息来源于GenBank，具体信息为牛(NM_001192950.1)、人(BC022791.1)、猕猴(NM_001260911.1)、大猩猩(XM_004029036.1)、星鼻鼹鼠(XM_004686333.1)、树鼩(XM_006162129.1)、绵羊(XM_004005786.1)、虎鲸(XM_004268168.1)。
1.4 猪Fosl2蛋白结构和功能预测
用ExPASy-ProtParam Tool工具对猪Fosl2蛋白基本理化性质进行包括氨基酸组成、元素组成、等电点、分子量等的预测，应用ProtScale的在线版本对猪Fosl2蛋白质进行疏水区域预测，应用TM-PRED在线软件分析猪Fosl2蛋白的跨膜区，应用Signa1P4.0在线软件进行猪Fosl2的信号肽分析，应用PHD在线软件对猪Fosl2的二级结构进行预测，应用InterProScan在线软件对猪Fosl2蛋白结构域进行预测。
1.5 猪Fosl2基因组织表达特性分析
1.5.1 cDNA合成 取4个不同时期(7、30、60、180日龄)豫南黑猪的心、肝、脾、肺、肾、背最长肌以及背部脂肪分别进行总RNA提取，测得总RNA的OD260 nm/OD280 nm比值在1.8～2.0即为符合要求，根据PrimeScript RT reagent Kit With gDNA Eraser试剂盒进行去除基因组DNA反应以及反转录，基因组DNA的去除反应体系10 μL：5×gDNA Eraser Buffer 2.0 μL，gDNA Eraser 1.0 μL，RNase Free dH2O 5.0 μL，总RNA 2.0 μL。混匀后短暂离心，42 ℃ 2 min，该产物命名为A。反转录体系为20 μL ：A 10 μL，5×PrimeScript BufferⅡ 4.0 μL，PrimeScript RT Enzyme Mix1 1.0 μL，RT Primer Mix 1.0 μL，RNase Free dH2O 4.0 μL。37 ℃ 15 min，85 ℃ 5 S，该反应产物命名为B，即为cDNA产物。1.5.2 荧光定量PCR反应 根据试剂盒说明，在罗氏荧光定量PCR Lightcycler 480仪上进行，荧光定量PCR反应体系为25 μL：SYBR GREEN 12.5 μL，Fosl2-F1(10 μmol·L-1)1 μL，Fosl2-R1(10 μmol·L-1)1 μL，B反应液 1.5 μL，加灭菌ddH2O至终体积为25 μL。反应条件：94 ℃预变性30 s ；94 ℃变性30 s，59 ℃退火30 s，72 ℃延伸1.5 min，45个循环。系统将自动采集荧光强度增长指数，并进行分析绘制每一感应管的扩增动力学曲线。在PCR反应过程中，设定无cDNA 样品的空白管作为阴性对照。
1.5.3 荧光定量结果分析及数据处理 定量中以180日龄肺的Ct值为对照进行计算，以GAPDH为参照进行相对定量数值分析，结果用Ct法(2-△△Ct)进行统计计算，最终数据用Graphpad Prism 5.0软件进行图形制作以及单因素方差分析(One way ANOVA)和多重比较分析，所有结果均以“平均值±标准误差(Mean±SE)”表示。P>0.05表示差异不显着，P<0.05表示差异显着。
2 结 果
2.1 猪Fosl2基因的克隆
猪胎衣中的总RNA提取后，经测定OD值符合要求。反转录后进行PCR，产物经凝胶电泳显示获得长度为1 427 bp的片段(图1)，将产物回收与载体连接后，选取阳性质粒进行测序。结果表明，所得片段长度为1 427 bp，其中包括猪Fosl2基因CDS区984 bp(图2)，将序列提交NCBI，获得登录号KM191330。通过BLAST在线比对，与GenBank牛的Fosl2基因同源性为91%，所得片段即为猪的Fosl2基因。
图1 猪胎衣组织目的片段RT-PCR结果Fig.1 The RT-PCR results of Fosl2 of the pig afterbirth
2.2 多物种间Fosl2的同源性比较以及进化分析
利用DNAStar软件，对猪与牛、人、猕猴、大猩猩、鼹鼠、树鼩、绵羊以及虎鲸的Fosl2 基因的CDS区域核苷酸及氨基酸序列进行比对，结果如表2所示：猪与牛、人、猕猴、大猩猩、星鼻鼹鼠、树鼩、绵羊，虎鲸的核苷酸序列同源性分别为 91%、92%、92%、100%、91%、92%、94%、94%；猪与牛、人、猕猴、大猩猩、星鼻鼹鼠、树鼩、绵羊、虎鲸的氨基酸序列同源性分别为 95%、97%、96%、100%、95%、96%、95%、96%。利用GenBank 公布的核苷酸序列，采用DNAman软件建立了系统进化树(图3)。该进化树显示，猪Fosl2与大猩猩Fosl2在一个小分枝上，2个物种的分子进化地位最近，同时与其他哺乳动物在一个大分枝上。
上行表示猪Fosl2核苷酸序列，下行表示推测的猪Fosl2氨基酸序列；起始密码子ATG用下划线标出，“﹡”代表终止密码子TAAThe upper line show the nucleotide sequences and the lower line show the deduced amino acid sequences；The initial code ATG is underlined，﹡indicate the terminal code TAA图2 猪Fosl2 核苷酸序列及推测氨基酸序列Fig.2 Nucleotide sequences and deduced amino acid sequences of pig Fosl2
表2 猪Fosl2与其他动物的核苷酸和氨基酸序列一致性比较
Table2 Comparison of nucleotide and amino acid of Fosl2 between pig and other animals
物种Species核苷酸一致性/%Nucleotideidentity氨基酸一致性/%Aminoacidsidentity牛Bostaurus9195人Homosapiens9297猕猴MacacaMulatta9296大猩猩Gorilla100100星鼻鼹鼠Condyluracristata9195树鼩Tupaiachinensis9296绵羊Ovisaries9495虎鲸Orcinusorca9496
所引用的序列均来自GenBank数据库。登录号如下：牛(NM_001192950.1)、人(BC022791.1)、猕猴(NM_001260911.1)、大猩猩(XM_004029036.1)、星鼻鼹鼠(XM_004686333.1)、树鼩(XM_006162129.1)、绵羊(XM_004005786.1)、虎鲸(XM_004268168.1)All sequences come from the GenBank database.Bos Taurus(NM_001192950.1)，Homo sapiens(BC022791.1)，Macaca Mulatta(NM_001260911.1)，Gorilla(XM_004029036.1)，Condylura cristata(XM_004686333.1)，Tupaia chinensis(XM_006162129.1)，Ovis aries(XM_004005786.1)，Orcinus orca(XM_004268168.1)图3 猪Fosl2 与其他动物之间系统进化树的构建Fig.3 Phylogenetic tree of Fosl2 between pig and other animals
2.3 猪Fosl2蛋白理化性质分析以及结构与功能的预测
利用在线软件分析可知，猪Fosl2蛋白由327
个氨基酸组成，分子质量为35.33 ku，理论等电点为6.42，分子式为C1512H2447N449O504S11，原子总数为4 923，N端为蛋氨酸，估计半衰期为30 h，蛋白质的不稳定指数为89.94，表明此蛋白的性质不稳定，脂溶系数为66.51。虽为亲水性蛋白，但在42、44～54、64～72、85～95、98～100、102～107、181～192、205、213、215～224、246～254、264～272、277～286、321～323等位点具有疏水性，最大疏水区位于第218位氨基酸，最大疏水值为2.167，最大亲水区位于第124位氨基酸，最大亲水值为-3.256，其亲水性平均值为-0.669；Fosl2包括α-螺旋63个，百分比为19.27%，多集中在序列的中间区域，β-折叠共2个，位于第58和59位氨基酸，占0.61%，延伸主链占7.34%，无规则卷曲238个，占72.78%；Fosl2蛋白存在36个磷酸化位点，其中丝氨酸29个，苏氨酸5个，络氨酸2个；Fosl2的跨膜序列为17～33位氨基酸，序列为SGSPAHAESYSSGGGGQ，该蛋白为跨膜蛋白，Signa1P4.0信号肽预测工具分析发现存在信号肽的概率为0，说明该蛋白不存在信号肽，为非分泌型蛋白(图4)。Fosl2蛋白在122～187位氨基酸的位置含有亮氨酸拉链域。
A.猪Fosl2氨基酸序列理化性质；B.猪Fosl2氨基酸二级结构预测图。A图中上行字母表示推测的猪Fosl2氨基酸序列；下行中的下划线表示延伸主链，波浪线表示无规则卷曲，双划线表示α-螺旋，加重加粗下划线表示β-折叠；上行中字母加粗斜体表示该位点为酪氨酸磷酸化位点，字母外加方框表示丝氨酸磷酸化位点，字母本身只加粗表示苏氨酸磷酸化位点。B图中R表示无规则卷曲，B表示β-折叠，A表示α-螺旋，E表示延伸主链A.The physicochemical properties of Fosl2 amino acid sequence in pig；B.The prediction graph of Fosl2 amino acid sequence in pig.The upper line showed deduced amino acid sequences；The lower line extended strand was underlined，random coil was marked by wavy lines，alpha helix was double underlined，beta turn was bold underlined；The bold italic letter indicated Tyr phosphorylation sites，the blocked letter showed Ser phosphorylation sites，the only bold letter indicated Thy phosphorylation sites.In Fig.B，R showed random coil，beta turn was showed by B，alpha helix was showed by A，the extended strand was showed by E.图4 猪Fosl2氨基酸序列理化性质分析及二级结构预测Fig.4 Physical and chemical properties analysis and secondary structure prediction of pig Fosl2 amino acids sequence
2.4 猪Fosl2 mRNA组织表达特性
Fosl2基因在不同时期猪心、肝、脾、肺、肾、背最长肌、背部脂肪中的发育性表达量见表3。结果表明，Fosl2基因在上述7种组织的4个不同时期(7、30、60和180日龄)都有不同程度的表达：肺不同时期的表达量均不同程度的高于同时期的其他组织表达量，其中7日龄为表达量最高值，且显着高于其他日龄(P<0.05)，随后30日龄表达量骤然下降(P<0.05)并达到最低值，随后开始逐渐上升。其余组织在7日龄为表达量最大值的还有肝、脾和肾，肝在7日龄后表达量逐渐下降，且到60日龄时为最低值，180日龄时又有回升；脾则表现出先降低后升高，随后再降低的曲折线表达模式；肾则是从7日龄后，表达量一直呈下降的趋势。心和背部脂肪在4个不同发育时期呈现出一致的变化规律，均为30日龄时表达量降低，随后逐渐增加，直到180日龄时表达含量达到最高值。背最长肌内的表达量在30日龄时达到最大值，随后又逐渐降低直至180日龄时达到最低值。
表3 猪Fosl2基因的组织表达量
Table 3 The expression of pigFosl2 in different tissues
组织Tissue7日龄7d30日龄30d60日龄60d180日龄180d心Heart0.018±0.0010ab0.0071±0.0013a0.019±0.0044ab0.026±0.0039b肝Liver0.076±0.021b0.037±0.0036a0.011±0.0056a0.036±0.0041a脾Spleen0.22±0.042b0.064±0.013a0.21±0.065b0.12±0.012ab肺Lung1.4±0.17c0.21±0.023a0.55±0.12ab0.87±0.059b肾Kidney0.095±0.01b0.063±0.036ab0.058±0.0051ab0.022±0.0021a背最长肌Longissimusmuscle0.0071±0.00021b0.015±0.00051c0.0041±0.0011a0.0037±0.00095a背部脂肪Backfat0.021±0.0048a0.088±0.0043b0.041±0.0015a0.14±0.012c
同行数据后所标数字相同表示差异不显着(P>0.05)，所标字母不同表示差异显着(P<0.05)
In the same tissue,values with the same letter show no significant difference(P>0.05)；value with the different letter show significant difference(P<0.05)
3 讨 论
本试验通过RT-PCR技术获得猪Fosl2基因的CDS区，其包含984个碱基，编码327个氨基酸。人Fosl2全长25.17 kb，cDNA为981 bp，编码由326个氨基酸残基组成的蛋白[11]。小鼠的Fosl2全长22.05 kb，编码由326个氨基酸残基组成的蛋白[12]。研究预测猪Fosl2基因编码蛋白质的理论分子量为35.33 ku，为跨膜非分泌型蛋白，具有14个疏水区，但其属于亲水性蛋白，由此可推测，Fosl2可能存在膜结合形式，并作为机体某些调控机制的载体通道。通过不同脊椎动物种间Fosl2基因的同源性比较，发现Fosl2基因物种间的同源性很高，尤其与大猩猩核苷酸序列的同源性高达100%，与虎鲸的同源性也高达94%，这表明该基因的进化保守性非常高。同时发现，Fosl2蛋白在122～187位氨基酸含有亮氨酸拉链结构域，正是通过该区域，Fosl2蛋白与Jun基因家族编码的蛋白聚合成AP1，进而发挥其作用。
本试验利用实时荧光定量PCR技术对7、30、60和180日龄豫南黑猪的心、肝、脾、肺、肾、背最长肌以及背部脂肪中Fosl2基因的表达规律进行了研究，结果显示，Fosl2基因拥有广泛的表达谱，在上述组织的不同发育阶段均有不同程度的表达，7日龄肺内的表达量明显高于其他组织，因此推测该基因与胚胎肺部组织的早期发育相关。一些病理的研究发现，Fosl2基因的不同表达量与肺部组织的阶段性发育调节或病变相关，R.Eferl等[13]发现，Fosl2基因参与调控肺纤维化病变过程中的细胞外基质生成，并认为该基因是引起肺纤维化的一种致病因子，Fosl2转基因小鼠较正常小鼠更易患上严重的非特异间质性肺炎等肺病，本试验中，肺Fosl2基因的表达量在30日龄下降、后又上升的规律，反映出该基因可能在猪肺的发育过程中有某些特殊意义，其在病理研究中的发现提示该基因可能参与猪肺部疾病的发生，这还需要更深入的试验佐证。
C.Wrann等[2]证实，哺乳动物类细胞Fosl2基因的敲除会导致瘦素基因(Leptin，LEP)表达量的降低，Fosl2的过量表达会促进小鼠脂肪细胞内LEP基因表达量的增加，而瘦素与哺乳动物的能量代谢、脂肪生成息息相关。C.Wrann[14]发现Fosl2基因对离体培养的细胞以及小鼠体内LEP基因的表达发挥重要的调控作用。本试验中，背部脂肪内Fosl2基因在30日龄时的表达量较7日龄显着升高，60日龄时又有显着下降，180日龄的表达量显着上升，结合猪的整个生长阶段分析其原因：30日龄是仔猪的哺育阶段，体内脂肪或者细胞分裂有较快且明显的增加，因而Fosl2表达量升高；随后60日龄保育阶段，仔猪的饲料结构、生长环境发生变化，导致仔猪掉膘，其体内脂肪的蓄积略有降低，因而Fosl2表达量降低；180日龄时Fosl2基因的表达量骤然上升，这可能是由于育肥猪此阶段生长迅速、营养充足、体内脂肪快速蓄积[15]；综合该基因的变化趋势与猪脂肪的生长规律，推测该基因可能通过与LEP基因的相互协调作用影响猪的脂肪生成，同时参与调控育肥期猪的瘦肉率，进而影响其生长速度，这种推测如果得到证实，将对猪育种工作发挥一定的作用。
N.Reich等发现，Fosl2转基因小鼠从12周开始，皮肤发生纤维化病变，成肌纤维细胞的分化增强[16]，另外，Fosl2基因的沉默表达促进了肌肉肌酸激酶和肌球蛋白重链表达含量的升高[17]。猪肉品质的评判指标中，嫩度是肉的主要食用品质之一，而嫩度是由肌肉中各种蛋白质的结构决定的。同时肌肉系水力是一项重要的肉质性状，它不仅影响肉的色香味、营养成分、多汁性、嫩度等食用品质，而且有着重要的经济价值，而系水力大部分是由肌肉的纤维结构和毛细血管张力而定。本试验中，肌肉内Fosl2基因的表达量在30日龄达到最大值，而此时正是肌肉细胞的快速分裂增长期[15]，60和180日龄该基因的表达量较30日龄有显着降低，原因可能是肌肉的生长速度降低，因此推测Fosl2基因可能参与猪肌肉生成的调控过程，进而对猪肉的品质产生一定的影响。
Fosl2基因在脾、肾、肝、心等组织中也有适量表达。但4种内脏中Fosl2的表达规律却不尽相同：脾呈现30日龄稍有下降、60日龄小幅上升、180日龄再降低的曲折线表达规律；7日龄的肾表达量最高，随后其表达量缓慢降低；肝是自7日龄后开始降低，60日龄为最低表达量，随后的180日龄又有所回升；心内30日龄为最低表达量，后又有所回升，直到180日龄时其表达量达到最大值。Fosl2基因在不同内脏组织中表达规律的差异性也预示着该基因可能参与多种内脏的发育过程，这需要更深入的试验验证。
4 结 论
本试验成功克隆猪Fosl2基因CDS区，分析其种间高度保守性，该基因编码肽链无信号肽，为跨膜非分泌型蛋白，第122～187位氨基酸位点存在亮氨酸链结构域。猪Fosl2基因在肺组织内的表达量均高于同时期在心、肝、肾、脾、背最长肌和背部脂肪内的表达量，推测该基因可能参与肺组织的生长发育过程；另外该基因在脂肪组织内的表达变化规律与猪发育阶段的脂肪生长规律一致，预测该基因可能参与猪的脂肪生长调控进而影响瘦肉率；该基因在猪的心、肝、脾、肾、背最长肌中的功能作用，还需要进一步的研究证实。
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(编辑 郭云雁)
Gene Cloning，Bioinformatics Analysis and Developmental Expression ofFosl2 Gene in Pig
FAN Xing-xing，LI Xin-jian，LI Gai-ying，GUO Ji-li，HAN Xue-lei，LÜ Gang，REN Guang-zhi*
(CollegeofAnimalScienceandVeterinaryMedicine，HenanAgriculturalUniversity，Zhengzhou450002，China)
The study was conducted to clone and analyze CDS sequence of pigFosl2 gene，and to investigate the developmental expression ofFosl2 in pig various tissues(heart，liver，spleen，lung，kidney，the longissimus muscle and backfat) at different stages.In this study，Yunan Black pig was used as experimental animal to clone the CDS region ofFosl2 gene by RT-PCR，the protein structure were predicted by bioinformatics，meanwhile，qRT-PCR was used to analyze developmental expression ofFosl2 gene in pig from 7- to 180-day-old.The results showed that the CDS of pigFosl2 gene was 984 bp，encoding 327 amino acids.It had no signal peptide in peptide chain，but had a transmembrane domain and a basic-domain leucine-zipper，which were from 17 to 33 amino acids and from 122 to 187 amino acids,respectively.The protein of pig Fosl2 had high conservatism among mammal，and it was transmembrane and non-secretory protein.TheFosl2 was widely expressed in tissues，the expression ofFosl2 in lung was higher than other tissues at the same stage，it was deduced that pigFosl2 might be related to the process of lung development；the variation trend in backfat showed thatFosl2 might had the function enhancing adipogenesis and then regulate lean meat percentage.Therefore，the results of this study may lay foundation for further research on the structure and the role ofFosl2 gene in physiogenesis in pig.
pig;Fosl2；cloning；sequence analysis；developmental expression
10.11843/j.issn.0366-6964.2015.02.006
2014-05-26
河南省生猪产业技术体系创新团队(S2012)
范兴兴(1988-)，女，河南三门峡人，硕士生，主要从事猪遗传育种与繁殖研究，E-mail:13643806298@163.com
*通信作者：任广志，教授，主要从事猪遗传育种与繁殖研究，E-mail: rgzhxt@163.com
S828.2
A
0366-6964(2015)02-0211-08
