重庆地区妇女人乳头瘤病毒感染的调查分析

夏吉荣，杨双双，祝佳丽，张小娇

（重庆医科大学附属第一医院检验科 400016）

宫颈癌是女性常见的妇科恶性肿瘤之一，其发病率仅次于乳腺癌，近年来，宫颈癌及宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）的发病率明显上升，世界范围内每年浸润性宫颈癌的新发病例数约50万，中国宫颈癌的患病率及病死率约占世界1／3，且具有年轻化趋势。近年来的研究资料表明，人乳头瘤病毒（human papilloma virus，HPV）与宫颈癌及其癌前病变的发生、发展密切相关。文献报道有99.7%的宫颈癌组织活检标本中可检测到HPV－DNA，HPV感染已被公认为宫颈癌发生的重要病因［1－3］。了解HPV在不同地区的流行病学情况，分析其与宫颈癌和其他妇科疾病的关系，为宫颈癌高危人群的早诊断、早防治提供重要信息。

1 资料与方法

1.1 一般资料 研究对象系2009年6月至2011年7月在本院就诊的妇女7 016例，年龄18～83岁。其中343例为明确诊断的宫颈病变患者，分别为：慢性宫颈炎及宫颈良性病变115例，CINⅠ93例，CINⅡ67例，CINⅢ42例，宫颈癌26例。上述疾病为临床细胞学最终诊断。

1.2 主要检测仪器及试剂 主要检测仪器：BIO公司S1000聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）扩增仪、Hybri－Max医用核酸分子快速杂交仪（潮州凯普公司）、高速低温离心机（美国Thermo公司）、快速核酸提取仪（北京博奥生物有限公司）等；主要试剂：细胞提取裂解试剂、HPV PCR试剂，杂交试剂均由潮州凯普生物化学有限公司提供。

1.3 标本采集 由临床医生以窥阴器暴露宫颈，将宫颈刷置于宫颈口，轻轻搓动宫颈刷使其顺时针旋转5圈，慢慢取出宫颈刷，将其放入标有患者信息的专用取样管中，拧紧瓶盖送检。

1.4 检测方法 将收集的宫颈细胞液进行浓缩，裂解细胞后提取DNA，然后将提取的DNA模板进行PCR扩增，将扩增产物解链后用核酸分子芯片快速杂交法检测HPV，结果判断按本方法提供的模板进行，上述所有过程和结果判断严格按试剂盒说明书进行。本法检测HPV共包含3个类别，21个亚型，涵盖了中国人群感染型的96%以上，分为高危型、低危型和其他型（中国人特有型）。高危型含13种亚型：16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68亚型；低危型含5种亚型：6、11、42、43、44亚型；其他型含3种亚型：53、66、CP8304亚型。

1.5 数据收集 对7 016例HPV检测结果进行感染率、型别分布以及感染率与年龄、感染型别与疾病的相关性等进行分析。

2 结 果

7 016 例标本中HPV检测阳性者2 357例，阳性率为33.6%；单一高危型阳性1 558例，占感染者的66.1%，以HPV 16、58、52、33、18、31、68亚型为主；高危型合并其他型阳性447例，占感染者的19.0%，以HPV 16、52、58亚型为主；低危型159例，占感染者的6.7%，以HPV 11、6亚型为主；低危型合并其他型阳性23例，占感染者的1.0%，以HPV 6、52亚型为主；其他型170例，占感染者的7.2%，以HPV CP8304和53亚型为主。结果见表1。不同宫颈病变HPV的感染率见表2。不同宫颈病变HPV感染的主要发生型别见表3。HPV感染的年龄分布：＞20～60岁HPV－DNA的检出率为99%，＞40～50岁HPV－DNA的检出率为35%，＞60岁HPV－DNA的检出率仅为1%，本组13例超过73岁的患者未检出HPVDNA，结果见图1。

表1 2 357例HPV阳性标本主要型别分布

表2 不同宫颈病变HPV感染率

表3 不同宫颈病变HPV感染主要发生型别

图1 HPV感染的年龄分布

3 讨 论

HPV是一种双链嗜上皮性DNA病毒，属于乳多空病毒科，在人和动物中分布广泛。目前发现HPV有200多个基因型，约40个型别涉及生殖道感染，近年来大量流行病学及分子生物学研究表明，HPV感染与女性宫颈癌及其癌前病变的发生、发展密切相关。有报道99.7%宫颈癌组织活检标本中可检测到HPV－DNA［1］，但不同地区和人群HPV的感染率和型别分布相差较大，感染率为20.7%～58.4%［4－9］。了解本地区HPV感染情况及型别分布可为本地区HPV诊断预测及预防提供指导信息。

3.1 HPV感染的地区差异 本调查中，7 016例患者HPV的总感染率为33.6%，明显低于国外报道的58.4%［8］和国内报道的43.9%［6］，但又明显比国内报告的20.8%高［5］，说明不同区域HPV感染存在明显差异，各地区应采取相应措施预防。

各个地区HPV感染的主要型别也有差异，世界范围常见的感染亚型为HPV 16亚型［10－16］。本调查结果显示，重庆地区HPV亚型检出率前6位的分别是 HPV 16、58、52、33、CP8304及18亚型，其感染率分别为29.1%、10.8%、9.4%、5.8%、4.0%及4.0%，其中以 HPV 16亚型最常见，提示重庆地区HPV感染高危型以16、58及52亚型为主，低危型以11、6亚型为主，其他型以CP8304亚型为主。不同检测方法所覆盖的HPV检出型别有差异，因此，这为疫苗的研究以及临床诊断与治疗提供了指导方向，也为实验室检测方法的选择及设计提供参考。

3.2 HPV感染与宫颈疾病的关系 近年来国内、外有关宫颈癌的病因研究表明，感染高危型HPV与宫颈癌的发生高度相关，是宫颈癌的首要病因，相关研究发现，HPV（特别是高危型）的持续感染是宫颈癌发生的重要病因［8－10］。本次调查的宫颈癌病例以HPV高危型感染为主（92.3%，表3），亚型以16、58、31、33及18亚型为主，其中有42.3%（11／26）的宫颈癌是HPV 16亚型；宫颈炎及其他良性宫颈病变以HPV低危型感染为主（59.3%，表3）。本调查还发现，HPV感染与宫颈病变程度呈正相关，宫颈病变程度越重，HPV的感染率也越高；CIN病变和宫颈癌高危型感染率明显高于宫颈其他病变（16.7%，表3），说明高危型HPV与宫颈癌以及癌前病变的发生、发展密切相关。而低危型及其混合感染在宫颈炎及宫颈良性病变中占59.3%，但随着病变级别的增加，比例逐渐减少，反映出HPV低危型感染一般只引起良性病变。

有研究显示，在妇女的一生中可重复感染HPV，也可同时感染多种不同型别的HPV［14］。本文调查HPV感染者中单一型感染1 887例（81.0%），多重感染470例（19.2%），随着宫颈病变级别增加，多重感染率也呈增加趋势，多重感染可能预示机体免疫机制对病毒的清除不全，但未发现宫颈癌与多重HPV感染有明显关系，其机制尚需进一步研究。

3.3 HPV感染与年龄的关系 HPV感染与年龄相关［5］。本研究结果显示，重庆地区HPV感染的年龄段主要在＞20～60岁，发生率为99%；其中，＞40～50岁为高发年龄，发生率为35%，因此应对这个年龄段妇女高度重视。

HPV感染与宫颈癌及其前期损害之间有密切的联系，从CIN发展为宫颈癌一般需要10～20年，而HPV反复和多重感染可能使该病变时间缩短。重庆地区处于HPV相对高发区，因此在妇女中进行宫颈HPV筛查是非常必要的，早期筛查、尽早诊断能有效降低宫颈癌的发病率和病死率。

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