汤自洁，李 丽，丛 辉，鞠少卿

（南通大学附属医院检验科，江苏南通226001）

肺癌是我国最常见恶性肿瘤之一。随着现代工业的发展，大气环境的不断恶化以及吸烟人数的激增，近年来其发病率迅速上升，病死率已居各恶性肿瘤之首。而非小细胞肺癌（nonsmall－cell carcinoma，NSCLC）约占肺癌总数的85%以上，由于NSCLC的早期诊断率低，仅约15%，且临床初诊时大部分患者已发生远处转移［1－2］。因此，对NSCLC患者早期发现、早期诊断以及早期治疗，已成为提高NSCLC疗效、降低死亡率以及延长患者术后生存期的关键。血清肿瘤标志物检测是一种非侵袭性的检查方法，为肿瘤早期诊断提供可能，然而单一的肿瘤标志物检测很难满足临床对NSCLC早期诊断灵敏度和特异度要求。本研究检测了NSCLC患者血清细胞角蛋白19片段（Cyfra21－1）、癌胚抗原（CEA）、血清铁蛋白（SF）水平，探讨3者联合检测对于NSCLC诊断的临床应用价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 本院2011年1月至2014年7月住院及门诊72例NSCLC患者，54例良性肺部疾病患者以及53例健康体检合格者。NSCLC组共72例，均经临床、实验室、病理学确诊，其中男44例、女28例，年龄44～88岁，中位年龄64岁。按照第七版国际抗癌联盟的NSCLC诊断标准进行分级分期，TNM分期：Ⅰ＋Ⅱ31例，Ⅲ＋Ⅳ41例。良性肺疾病组共54例，包括肺炎39例，慢性支气管炎7例，慢性阻塞性肺疾病5例，肺结核3例；其中男28例、女26例，年龄15～96岁，中位年龄55岁。对照组53例，经检查均排除肺部良、恶性疾患；其中男32例、女21例，年龄15～65岁，中位年龄40岁。所有受试者均知情同意，符合本院伦理委员会标准。

表1 各组血清Cyfra21－1、CEA及SF浓度比较［M（P25，P75）］

表2 NSCLC患者血清Cyfra21－1、CEA及SF浓度与病理参数之间的关系［M（P25，P75）］

1.2 方法 采集待检者清晨空腹静脉血4mL，静置20min，3 000r/min离心10min，析出血清，－80℃保存待检。血清Cyfra21－1浓度采用Roche Cobas e411全自动电化学发光免疫分析仪（瑞士罗氏公司）进行定量检测；血清CEA及SF水平采用ARCHITECT i2000SR全自动化学发光免疫分析系统（美国雅培公司）分别定量检测。所用试剂均为仪器配套试剂，每日质控，仪器定期维护保养，上机操作均严格按照标准操作程序进行。

1.3 统计学处理 应用SPSS18.0软件对数据进行统计分析，非正态分布计数资料采用中位数（Median）及四分位数（P25，P75）表示，两组间的比较采用非参数 Mann－Whitney检验；多组之间比较采用非参数Kruskal－Wallis检验。正态分布计数资料用率表示，采用χ2检验。采用受试者工作特征曲线（ROC曲线）评价血清Cyfra21－1、CEA及SF对 NSCLC的临床诊断价值。Kaplan－Meier生存曲线分析以及Cox比例风险模型分析血清Cyfra21－1、CEA及SF与NSCLC患者术后生存与预后的关系，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 各组血清Cyfra21－1、CEA及SF浓度比较 NSCLC组患者血清Cyfra21－1、CEA及SF浓度显着高于良性肺疾病组以及对照组（P＜0.05）；而良性肺疾病组患者的血清Cyfra21－1、CEA及SF浓度也明显高于对照组（P＜0.05），见表1。

2.2 NSCLC患者血清Cyfra21－1、CEA及SF浓度与病理参数之间的关系 NSCLC组患者血清Cyfra21－1、CEA与TNM分期、病理类型以及有无淋巴结转移有关（P＜0.05）；其中血清Cyfra21－1在鳞癌中明显增高，而血清CEA在腺癌中明显增高；而血清SF与NSCLC患者临床病理参数之间无相关性（P＞0.05），见表2。

图1 各指标用于诊断NSCLC的ROC曲线图

2.3 ROC曲线评价血清 Cyfra21－1、CEA及SF检测对NSCLC的诊断价值 根据ROC曲线，以诊断NSCLC的灵敏度与特异性之和的最高值确定临界值（Cut－off值），见图1、表3。其中血清Cyfra21－1、CEA及SF 3指标联合检测的曲线下面积（AUC）最大，为0.948；标准误（SE）最低，为0.018；95%CI为0.913～0.984；Cut－off值为0.33。提示3指标联合检测用于NSCLC的诊断价值优于3指标单独检测以及CEA＋SF二指标联合检测。

2.4 血清Cyfra21－1、CEA及SF检测对NSCLC诊断的临床效能评价 血清Cyfra21－1、CEA及SF 3指标联合检测用于NSCLC诊断的灵敏度为91.67%，特异性为88.79%，阳性预测值为84.62%，阴性预测值为94.06%，诊断总有效率为89.94%；其临床效能评价优于Cyfra21－1、CEA及SF单独检测以及CEA＋SF二指标联合检测，见表4。

表3 ROC曲线所得各指标性能参数

表4 各指标检测对NSCLC诊断的临床效能评价［%（n/n）］

2.5 血清Cyfra21－1、CEA及SF联合检测与NSCLC患者术后生存的关系 对72例NSCLC患者中的45例进行了术后随访；手术后有24例血清Cyfra21－1、CEA及SF指标均阳性，有21例为血清Cyfra21－1、CEA及SF单项检测阳性或二指标阳性。Kaplan－Meier生存曲线显示，手术后血清3指标均阳性的NSCLC患者，其生存时间明显短于单指标阳性和双指标阳性的NSCLC患者（P＝0.011），见图2；Cox比例风险模型分析显示血清3指标均阳性时可用于判断NSCLC患者的不良预后，其相对风险度为3.950，95%CI为1.639～9.519（P＝0.002）。

图2 血清Cyfra21－1、CEA及SF联合检测与NSCLC患者术后生存的关系

3 讨 论

当前，肺癌5年生存率并没有发生根本性的改变，仅15%左右。由于缺乏有效早期诊断方法，外科手术后又易复发、转移以及化疗药物耐药等问题，患者往往预后不良。因此，如能找到早期诊断以及判断预后的指标和方法，对于提高肺癌患者的术后生存有着极其重要的意义。外周血中肿瘤标志物的异常往往早于临床相关症状以及影像学的异常，故任何一项标志物的异常都提示可能具有临床意义。

Cyfra21－1是细胞角蛋白19的一段可溶性多肽片段，在正常肺上皮组织中其浓度极低，当上皮细胞恶性转化时，通过肿瘤细胞坏死、溶解后释放入血，其浓度会有不同程度的增高。研究表明，血清中高水平Cyfra21－1的NSCLC患者常提示预后不良；而其浓度显着降低或恢复到正常水平时，可提示患者已取得较好治疗效果，因此血清Cyfra21－1水平对监测NSCLC预后及临床疗效有重要意义［3－5］＋＋。本研究显示，NSCLC患者血清Cyfra21－1浓度显着高于良性肺疾病组以及对照组（P＜0.05）；NSCLC患者血清 Cyfra21－1与TNM 分期、病理类型（鳞癌）以及有无淋巴结转移有关（P＜0.05）；血清Cyfra21－1诊断 NSCLC的 AUC为0.914，灵敏度为88.89%，特异性为84.11%，总有效率为86.03%；其临床效能评价及诊断价值均优于CEA及SF单项检测。因此，Cyfra21－1对于NSCLC诊断的临床价值更为显着。

CEA是一种具有人类胚胎抗原特异性决定簇的酸性糖蛋白，是较早用于检测NSCLC的肿瘤标志物之一；虽然CEA是一种非器官特异性肿瘤相关抗原，但研究表明，CEA可作为NSCLC患者一项独立预后影响因素［6－8］。 本研究显示，NSCLC患者血清CEA浓度显着高于良性肺疾病组以及对照组（P＜0.05），NSCLC患者血清CEA与TNM分期、病理类型（腺癌）以及有无淋巴结转移有关（P＜0.05）；血清CEA临床效能评价及诊断价值介于Cyfra21－1及SF二者之间，提示CEA可以作为NSCLC诊断以及健康人群的一个筛查指标。

SF是一种以无机铁化合物为辅基的大分子糖蛋白，是人体中除血红蛋白以外含铁量最为丰富的蛋白质。在肿瘤患者体内SF合成异常活跃，浓度急剧增加，故可作为肿瘤的血清学标志物［9］。本研究显示，NSCLC患者血清SF浓度显着高于良性肺疾病组以及对照组（P＜0.05），血清SF与NSCLC患者临床病理参数之间无明显相关性（P＞0.05）；其临床效能评价及诊断价值低于Cyfra21－1及CEA单项检测，提示SF虽不是NSCLC特异性诊断指标，但仍可作为临床NSCLC的一个辅助诊断指标。

本研究还探讨了Cyfra21－1、CEA及SF 3者联合检测对于NSCLC诊断的临床价值，结果显示，3指标联合检测的AUC最大，为0.948；标准误（SE）最低，为0.018；95%CI为0.913～0.984；3指标联合检测用于NSCLC诊断的灵敏度为91.67%，特异性为88.79%，阳性预测值为84.62%，阴性预测值为94.06%，诊断总有效率为89.94%。提示3指标联合检测用于NSCLC的诊断价值及临床效能评价均优于3指标单独检测以及CEA＋SF二指标联合检测，本研究认为，3指标联合检测对于NSCLC诊断更具临床价值。另外，生存曲线分析显示，手术后血清Cyfra21－1、CEA及SF 3指标均阳性的NSCLC患者，其生存时间明显短于单指标阳性和双指标阳性的NSCLC患者（P＝0.011）；Cox比例风险模型分析显示血清3指标均阳性时可用于判断NSCLC患者的不良预后，其相对风险度为3.950，95%CI为1.639～9.519，P＝0.002。提示3指标联合检测可用于NSCLC患者的预后评估。

综上所述，血清Cyfra21－1、CEA及SF 3者联合检测对于缺少典型临床症状以及影像学异常改变的NSCLC早期诊断具有重大的临床意义；对于早期发现、早期干预以及提高NSCLC患者的生存期具有一定的临床指导性价值。

［1］Tufman A，Huber RM.Biological markers in lung cancer：A clinician′s perspective［J］.Cancer Biomark，2010，6（3/4）：123－135.

［2］Brega E，Brandao G.Non－Small Cell Lung Carcinoma Biomarker Testing：The Pathologist′s Perspective［J］.Front Oncol，2014，4：182.

［3］Wang J，Yi Y，Li B，et al.CYFRA21－1can predict the sensitivity to chemoradiotherapy of non－small－cell lung carcinoma［J］.Biomarkers，2010，15（7）：594－601.

［4］Tomita M，Shimizu T，Ayabe T，et al.Prognostic significance of tumour marker index based on preoperative CEA and CYFRA 21－1in non－small cell lung cancer［J］.Anticancer Res，2010，30（7）：3099－3102.

［5］Blankenburg F，Hatz R，Nagel D，et al.Preoperative CY FRA 21－1and CEA as prognostic factors in patients with stage I non－small cell lung cancer：external validation of a prognostic score［J］.Tumour Biol，2008，29（4）：272－277.

［6］Grunnet M，Sorensen JB.Carcinoembryonic antigen（CEA）as tumor marker in lung cancer［J］.Lung Cancer，2012，76（2）：138－143.

［7］Fiala O，Pesek M，Finek J，et al.Predictive role of CEA and CYFRA 21－1in patients with advanced－stage NSCLC treated with erlotinib［J］.Anticancer Res，2014，34（6）：3205－3210.

［8］Lin XF，Wang XD，Sun DQ，et al.High Serum CEA and CYFRA21－1Levels after a Two－Cycle Adjuvant Chemotherapy for NSCLC：Possible Poor Prognostic Factors［J］.Cancer Biol Med，2012，9（4）：270－273.

［9］Milman N，Pedersen LM.The serum ferritin concentration is a significant prognostic indicator of survival in primary lung cancer［J］.Oncol Rep，2002，9（1）：193－198.