郭 楠，颜利求，郑 晔，曹绪芬

(河北省沧州市中心医院心内一科 061014)

冠心病不同冠脉病变程度患者外周血Treg细胞及全球急性冠状动脉事件注册评分的关系

郭 楠，颜利求，郑 晔，曹绪芬

(河北省沧州市中心医院心内一科 061014)

冠心病；外周血；Treg细胞；全球急性冠状动脉事件注册评分

冠心病患者心血管事件发生率明显增高，心脑血管事件的发生对社会和家庭造成严重的经济负担，控制冠心病患者心血管事件发生，是当前研究的重点课题[1-2]。冠状动脉病变程度是影响冠心病患者心血管事件的重要因素，早期明确并采取积极的应对措施，有助于减少不良事件发生。全球急性冠状动脉事件注册评分(GRACE)和其危险分层的评价是评价冠心病危险分级的重要量表之一，与冠心病临床预后密切相关[3-4]。免疫活化是冠脉病变的主要病理机制之一，血清中Treg细胞水平反映机体免疫活化的程度[5]。本研究探讨冠心病患者外周Treg细胞变化与冠脉病变程度及GRACE的关系，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2012年7月至2014年7月行冠状动脉造影确诊为冠心病的患者150例，其中男74例，女76例；年龄37～61岁，平均(52.4±4.5)岁；单支病变48例，双支病变78例，多支病变24例；轻度闭塞42例，中度闭塞42例，重度闭塞44例，完全闭塞22例。所有患者行冠状动脉造影检查，冠心病诊断标准参照2007年美国心脏病学会(ACC)和美国心脏协会(AHA) 指南[6]。入选标准：(1)符合冠心病的诊断标准；(2)所有患者均同意参加本研究；排除标准：(1)合并肾病等其他脏器严重并发症患者；(2)精神异常患者；(3)孕妇或哺乳期妇女。根据150例患者冠状动脉造影结果分为单支、双支、多支病变组。依据计算机密度测定法评估冠状动脉狭窄程度，分为轻度、中度、重度、完全闭塞组，其中50%～<75%为轻度，75%～<90%为中度，90%～<100%为重度，100%为完全闭塞[9]。记录入选患者的年龄、性别、吸烟史等情况。

1.2方法

1.2.1Treg细胞及Th17细胞水平监测 收集患者空腹外周静脉血，用Active motif公司的试剂盒按说明书提取外周血单个核细胞(PBMCs)，得到PBMCs后PBS重悬细胞，取20 μL细胞悬液，调节细胞浓度，按照流式细胞检测说明书加入流式细胞仪抗体后，按照说明书进行相关操作，流式细胞仪上检测Treg细胞和Th17细胞水平，Treg细胞采用Foxp3 Alexa Fluor488/CD25PE/CD4 PerCP，Th17细胞采用抗人IL-17Alexa Fluor647/CD3 FITC/CD4PE，两种抗体均购于上海百赛生物科技有限公司。

1.2.2GRACE 所有患者均进行GRACE，分值为2～283分，内容包括年龄、心律、收缩压、肌酐、Killip分级、是否发生心血管事件、心肌酶标志物、ST段变化，所有患者均在入院后评估以上临床资料，最后进行GRACE。

2 结 果

2.1不同冠脉病变患者一般临床资料比较 多支病变组患者高脂血症和糖尿病发病率明显高于双支病变组和单支病变组(均P<0.05)，见表1；轻度闭塞组患者高脂血症及糖尿病发病率均低于中、重度、完全闭塞组患者，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

2.2不同冠脉病变患者Treg细胞、Th17细胞及Grace比较 多支病变组患者Treg细胞、Treg/Th17比值、GRSCE分别为(1.42±0.25)%、(0.39±0.08)%、(165.3±28.9)分明显高于双支病变和单支病变组，而Th17细胞为(3.14±0.99)%明显低于双支病变和单支病变组(P<0.05)，见表3；完全闭塞组Treg细胞、Treg/Th17比值、GRACE分别为(1.45±0.31)%、(0.42±0.09)%、(168.4±25.7)分明显高于轻度、中度、重度狭窄组，而Th17细胞为3.01±1.03明显低于轻度、中度、重度狭窄组，组间差异有统计学意义(P<0.05)，见表4。

2.3冠脉病变与Treg细胞、Th17细胞及GRACE的关系 冠脉病变支数和闭塞程度均与Treg细胞、Treg/Th17比值及GRACE呈正相关(r值分别为0.435、0.543、0.632,和0.534、0.631、0.698，P<0.05)，与Th17水平均呈负相关(r值分别为-0.387、-0.427，P<0.05)，见表5。

表1 不同冠脉病变支数患者一般临床资料比较

a：P<0.05，与单支病变组比较；b：P<0.05，与双支病变组比较

表2 不同冠脉狭窄程度患者一般临床资料比较

a：P<0.05，与轻度闭塞比较

表3 不同冠脉病变支数患者Treg细胞及Th17细胞水平比较

a：P<0.05，与单支病变比较；b：P<0.05，与双支病变比较

表4 冠脉不同狭窄程度患者Treg细胞及Th17细胞水平比较

a：P<0.05与轻度闭塞组比较；b：P<0.05，与中度闭塞组比较；c：P<0.05，与重度闭塞组比较

表5 冠脉病变与Treg细胞、Th17细胞及 GRACE的关系

3 讨 论

冠状动脉病变的主要原因是动脉粥样硬化，动脉粥样硬化的主要病理机制之一是炎性反应，炎症细胞产生的各种炎症因子可能加重动脉粥样硬化[6-8]。本研究结果提示冠心病患者具有较高的高脂血症及糖尿病发生率，而且随着冠脉病变程度的加重，高脂血症及糖尿病的发病率也上升，组间差异有统计学意义(P<0.05)。

炎症和氧化应激是动脉粥样硬化的主要病因学说，Treg细胞具有负向调控免疫炎性反应的作用，有助于抑制免疫炎性反应的形成，而且Treg细胞可以抑制Th17细胞，而Th17细胞在动脉粥样硬化形成过程中有重要的临床意义，Th17可促进活性氧(ROS)形成，ROS形成过多导致氧化应激增强，促进动脉粥样硬化过程中泡沫细胞形成，促进内皮细胞损伤加速动脉血管损伤[9-11]。Th17细胞可分泌大量趋化因子活化核因子(NF)-κB信号通路，促进炎症因子活化形成，肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6等炎症因子可诱发微炎症状态促进动脉损伤[12]。这就意味着冠心病患者冠脉损伤可能与Treg细胞和Th17细胞水平密切相关。

因此本研究通过回顾性分析本院150例冠心病患者的临床资料，探讨血清中Treg及Th17细胞水平与冠心病冠脉病变程度及GRACE的关系。本研究结果提示，冠心病患者冠脉病变程度越严重，患者Treg细胞的含量越高，Th17细胞含量越低，而Treg/Th17比值也逐渐升高，表明冠心病患者冠脉病变程度与Treg和Th17细胞水平密切相关；进一步探讨冠脉病变程度与GRACE的关系，结果证实冠脉狭窄程度越高和冠脉病变支数越多GRACE越高，这也进一步证实了GRACE与冠心病患者病情的相关性，能较好地反映患者病情的严重程度。

研究提示Treg细胞抑制Th17细胞分化，抑制炎症因子形成从而抑制动脉粥样硬化的进程，而且Treg细胞还可以影响胆固醇代谢从而抑制泡沫细胞形成[13-14]，Treg细胞水平可能与冠状动脉粥样硬化程度相关的重要因素之一。相关性分析结果提示Treg细胞水平、GRACE与冠脉病变程度呈正相关，与Th17细胞水平呈负相关。

本研究采用GRACE对患者冠脉风险进行分层，将T细胞水平与GRACE进行相关性分析，结果提示GRACE与Treg细胞水平、Treg/Th17比值呈正相关、与Th17水平呈负相关，这就进一步提示Treg细胞水平与患者冠脉风险事件密切相关，积极监测Treg细胞水平有重要的临床意义。

本研究结果提示，血清中Treg细胞水平与冠心病患者动脉粥样硬化病变程度密切相关，而且与患者GRACE相关，Treg细胞水平越高患者冠脉病变程度越严重、GRCAE越高，Treg细胞水平越低患者冠状动脉风险事件发病率越高，检测患者外周血中Treg细胞有助于病情监测。

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目的探讨冠心病不同冠脉病变程度患者外周血Treg细胞及全球急性冠状动脉事件注册评分(GRACE)的关系。方法选择2012年7月至2014年7月行冠状动脉造影确诊为冠心病的患者150例作为研究对象，收集患者外周血，检测外周血中Treg细胞水平并进行GRACE。结果多支病变组患者Treg细胞水平及Treg/Th17比值明显高于双支病变组和单支病变组，而Th17细胞水平明显低于双支病变组和单支病变组(P<0.05)。完全闭塞组Treg细胞水平及Treg/Th17比值明显高于轻度、中度、重度狭窄组，而Th17细胞水平明显低于轻度、中度、重度狭窄者(P<0.05)。冠脉病变支数和闭塞程度均与Treg细胞水平、Treg/Th17比值及GRACE呈正相关(r值分别为0.435、0.543、0.632,和0.534、0.631、0.698，P<0.05)，与Th17细胞水平均呈负相关(r值分别为-0.387、-0.427，P<0.05)。结论冠心病患者外周血Treg细胞水平与冠脉病变程度及GRACE密切相关。

R541.4

B

1671-8348(2017)31-4413-03

10.3969/j.issn.1671-8348.2017.31.033

郭楠(1981-)，在读博士，副主任医师，主要从事冠心病方面的研究。

2017-05-18

2017-06-22)