杨军辉 张 静 周小青

（湖南中医药大学，长沙410007）

益气活血、通阳化痰法对实验性动脉粥样硬化家兔血清对氧磷酶1活性的影响

杨军辉 张 静 周小青

（湖南中医药大学，长沙410007）

目的观察益气活血、通阳化痰法对实验性动脉粥样硬化（AS）家兔血清对氧磷酶1（PON-1）活性的影响。方法将54只家兔随机分为6组，每组9只。分为空白对照组、模型对照组、辛伐他汀组、中药大、中、小剂量组。除空白对照组外其余各组给予高脂饲料喂养4周后开始灌胃给药，1次／d，连续4周后处死动物，测定血清PON-1活性。结果模型组的PON-1活性较空白对照组明显降低（P＜0.01）。中药各剂量组可以有效地升高血清PON-1活性，其中5g／kg剂量组和模型组比较差异十分明显（P＜0.01），2.5g／kg剂量组和模型组比较差异也有统计学意义（P＜0.05）。结论益气活血、通阳化痰法可通过升高血清PON-1活性来防治AS。

益气活血；通阳化痰；动脉粥样硬化；对氧磷酶1

动脉粥样硬化（Atherosclerosis，AS）是引起冠心病等心脑血管疾病的主要病理基础［1-3］。因于年老久病，脏腑功能虚损，正气亏虚，气虚血瘀，痹阻胸中。胸阳不振，痰浊内生，痰瘀痹阻心脉而发生AS［4］。益气活血、通阳化痰法切中AS之病机［5］，可作为其基本治法。本文旨在通过运用益气活血、通阳化痰法对实验性AS家兔血清PON-1活性的影响，以探讨其对AS形成的影响。

1 材料与方法

1.1药品、试剂和仪器辛伐他汀（成都华宇制药有限公司生产，批号：H19990002）；中药方（以补阳还五汤合瓜蒌薤白半夏汤进行化裁，组成：黄芪20g，赤芍15g，川芎15g，桃仁12g，红花12g，薤白12g，瓜蒌15g，半夏12g）均购自湖南中医药大学第一附属医院中药房；高脂饲料（北京科澳协力饲料有限公司生产）；乙酸苯脂（PA）（由北京百灵威化学技术有限公司提供，批号：A0220142）；338453型紫外可见分光光度计（美国Agilent公司）。

1.2实验动物日本大耳白家兔54只，雄性，体重2.0～2.5kg，由湖南中医药大学动物实验中心提供，动物许可证号：SYXK（湘）2009-0001。

1.3分组给药及模型的建立将日本大耳白兔54只随机分为6组。①空白对照组：普通饲料，生理盐水灌胃，10ml／d；②模型对照组：按文献指导方法［6］，实验前4周以79.5%基础饲料加15%蛋黄粉、0.5%胆固醇和5%猪油喂食，后4周将胆固醇去掉，给予80%基础饲料加15%蛋黄粉和5%猪油喂食，生理盐水灌胃，10ml／d；③辛伐他汀组：模型组＋辛伐他汀2mg／kg；④中药方大剂量组：模型组＋中药方5g／kg；⑤中药方中剂量组：模型组＋痰瘀同治方2.5g／kg；⑥中药方小剂量组：模型组＋痰瘀同治方1.25g／kg。各给药组把药物溶于10ml蒸馏水中，在4周时开始分别灌胃给药持续4周，均1次／d，于末次给药后第2日晨空腹颈总动脉取血，冻存。

1.4 PON-1的测定采用338453型紫外可见分光光度计进行测定。测定原理是：PON-1可将乙酸苯脂（PA）水解为乙酸和苯酚（Phenol），苯酚在270nm波长处有强吸收峰，在一定浓度内，其浓度与吸光度呈线性关系，单位时间内生成的苯酚量可反应PON-1的活性。

1.5统计学方法实验结果均采用均数±标准差±s）表示，采用SPSS16.0统计软件处理。资料的统计学分析用单因素方差分析，方差齐性用Student-New-man-Keuls检验，方差不齐用Tamhane's T2检验。P＜0.05为有统计学意义。

2 结果

益气活血、通阳化痰法对家兔血清PON-1活性的影响。见表1。

表1 益气活血、通阳化痰法对家兔血清PON-1活性的影响±s，U／ml）

表1 益气活血、通阳化痰法对家兔血清PON-1活性的影响±s，U／ml）

注：与正常对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与模型组比较，＃P＜0.05，＃＃P＜0.01

组别剂量（kg）n PON-1 activit y空白对照组—9 244.90±18.79＃＃模型对照组—9 128．01±25．43**辛伐他汀组2mg 9 175．59±50．71*中药方大剂量组5g 9 218．80±40．84＃＃中药方中剂量组2．5g 9 180．68±48．34＃中药方小剂量组1．25g 9 167．16±62．68**

由表1可知，实验结束时，模型组的PON-1活性较正常对照组明显降低（P＜0.01）。中药方各剂量组可以有效地升高血清PON-1活性，其中5g／kg剂量组和模型组比较差异十分明显（P＜0.01），2.5g／kg剂量组和模型组比较差异也有统计学意义（P＜0.05）。

3 讨论

动脉粥样硬化（AS）的发病过程十分复杂，其确切的病因尚未完全阐明，一般认为由多个遗传和环境因素相互作用所致。大量流行病学调查揭示不少遗传或环境因素与AS的发生存在明显的相关性，但未必一定具有直接的因果关系。由于这些因素尚不能作为确切的病因，习惯上被称为动脉粥样硬化的危险因素［7］。

对氧磷酶l（PON-1）是高密度脂蛋白（HDL）颗粒中的一种抗氧化酶。氧化修饰低密度脂蛋白（ox-LDL）是AS发生发展的始动因素，PON-1可水解特异性胆固醇脂和磷脂等脂质过氧化物，保护LDL和HDL免受氧化修饰。PON-1通过促进已被氧化的LDL上特定的脂质分解、抑制巨噬细胞对胆固醇摄取、抑制巨噬细胞胆固醇的生物合成以及促进由HDL介导的胆固醇从巨噬细胞中流出等方面的作用从而达到抑制巨噬细胞形成，防止动脉硬化。研究发现［8］：PON-1基因被敲除的鼠巨噬细胞与提纯的人类PON-1共同培养，在巨噬细胞胆固醇合成方面呈现出剂量依赖性抑制效应高达80%，这些作用与PON-1处理后巨噬细胞溶血磷脂酸胆碱形成有关。PON-1可能还通过降低脂质过氧化物在血管壁的沉积，影响冠状动脉粥样硬化的进程。近年来研究发现［9，10］：PON-1具有抗低密度脂蛋白氧化作用，在抑制慢性心血管疾病尤其冠心病的发生发展中发挥重要作用。Mackness等［11］在动物模型体内，发现消融的PON-1基因具有抗炎、抗AS的活性，而在人类过表达的PON-1具有抗炎、抗AS的活性。杨丽霞等［12］通过测定300例冠心病患者血清中的PON-1水平，表明PON-1水平与冠心病及其严重程度密切相关，其参与了AS的发生发展。

动脉粥样硬化可归属中医“痰浊”、“胸痹”等病症的范畴。其发病系因脏腑功能失调，气血津液运行不畅，产生痰浊、瘀血、气滞等病邪，其病性为本虚标实。脂质代谢异常是动脉粥样硬化发病的最重要危险因素，而痰瘀互结是脂质异常的主要病理基础［13］。痰来自津，瘀本于血，生理上属“津血同源”，病理上为“痰瘀同病”。津液亏虚，生瘀生痰；津运障碍，因痰致瘀；血运失调，因瘀致痰，均可形成痰瘀互结为病［14，15］。正如《明医杂着》曰：“若血浊气滞则凝聚为痰，气虚死血痰饮为言。”明确提出了痰瘀相关。益气活血、通阳化痰法切中AS之病机，是治疗AS的基本方法。方中黄芪益气，意在气旺血行，瘀去络通；赤芍、川芎、桃仁、红花活血化瘀，与黄芪相配，有益气活血、祛瘀通络之功；薤白通阳化痰，瓜蒌涤痰散结，半夏燥湿化痰，三者相伍，有通阳化痰散结之效。诸药合用，共奏益气活血、通阳化痰之功。李磊等［16］经实验表明，给予痰瘀同治方的家兔，其PON-1活性较模型组明显升高，从而起到抗AS的作用。本研究结果显示，益气活血、通阳化痰法可升高血清PON-1的活性，而PON-1可保护LDL免受氧化，防止AS的形成，为益气活血、通阳化痰法进一步用于冠心病的临床治疗提供了实验依据。

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Effect on the Enzyme Activity of Paraoxonase 1（PON-1）in the Experimental Atheroscler osis Rabbits Serum by Method of the Qi-Replenishing，Blood-Activating，Yang-Invigorating and Phlegm-resolving

Yang Junhui Zhang Jing Zhou Xiaoqing
（Hunan university of traditional Chinese medicine,Changsha,410007,China）

ObjectiveTo observe the effect of qi-replenishing，blood－activating，yang－invigorating and phlegm－resolving method on serum paraoxonase 1（PON-1）activity of rabbits with experimental arteriosclerosis（AS）．Methods54 rabbits were randomized equally into 6 groups，including blank control group，modeling group，therapy group with Simvastatin，and other 3 therapy groups with high，medium，low dosage of Chinese medicinal respectively．Rabbits from all groups，except blank control group，were fed with high fat diet for 4 weeks，and received intragastric administration of medication afterwards，once daily for 4 consecutive weeks．Then all groups of rabbits were killed and tested for serum PON-1 activity．ResultsSerum PON-1 activity of modeling group were significantly decreased（P＜0.01），compared with blank control group．All therapy groups with different dosage of Chinese medicinal can effectively rise serum PON－1 activity，thereamong，highly significant difference（P＜0.01）was found between 5g／kg dosage group and modeling group，whereas there was also significant difference（P＜0.05）between 2．5g／kg dosage group and modeling group．Conclusionqi-replenishing，blood-activating，yang-invigorating and phlegm-resolving method can control AS via its elevation of serum PON-1 activity．

Qi-replenishing and blood-activating；Yang-invigorating and phlegm-resolving；Arteriosclerosis；Paraoxonase 1

10.3969／j.issn.1672-2779.2014.06.094

：1672-2779（2014）-06-0148-02

苏 玲 本文校对：苏 玲

2013-12-28）