理气药治疗肝纤维化作用的研究进展*

蒋云霞，罗伟生

广西中医药大学，广西 南宁，530000

中医学经过几千年的不断地医疗实践，累积了很多治疗肝纤维化的经验和文献，众学者通过对这些经验及文献进行整理和研究发现，在治疗肝纤维化的过程中，肝气的条达通畅能深刻地影响疾病的发生发展，而疏肝理气与化瘀理气在肝纤维化的发展中具有十分重要的作用，许多具备此类功效的理气类药物具有治疗肝纤维化的作用。现将近年来理气类药物治疗肝纤维化的研究进展作一简要的总结论述。

1 疏肝理气类药物

1.1 香附韩廷廷［1］认为，中药香附的提取物竹节香附素A 呈剂量相关性地消除纤溶酶原激活物抑制剂1 对尿激酶型纤溶酶原激活剂活性的抑制作用，从而促进纤溶过程，预防血栓的形成，在体内条件下能够对肝纤维化有较好的治疗作用。现代医学研究证实，香附提取物香附多糖在一定程度上具备抗氧化、抑制炎症反应的效用。尚双艳等［2］通过注射牛血清白蛋白建立肝纤维化病鼠模型，予香附多糖灌胃给药，其实验发现各个剂量香附多糖处理组的大鼠肝纤维化病变程度均得到显着改善。这种抗纤维化的作用可能与提高了血清基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinase-2，MMP-2）的水平和降低了具有抑制MMP-2活性的血清基质金属蛋白酶组织抑制因子-2（tissue inhibitor of metalloproteinase-2，TIMP-2）与转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）水平有关。而MMP 具有促进细胞外基质（extracellular matrix，ECM）降解的效应，可减少肝脏组织中的纤维增生从而达到减轻肝组织纤维化的目的。

1.2 荔枝核黄莎等［3］通过高通量筛选技术观察23 种中药提取物对大鼠肝星状细胞T6 细胞株（hepatic stellate cell-T6，HSC-T6）的抑制作用发现，荔枝核乙醇提取物的石油醚萃部位、水饱和正丁醇部位、水萃取部位均可有效抑制HSC-T6的增殖，其中荔枝核石油醚萃部位抑制效果最为显着。荔枝核提取物荔枝核总黄酮（total flavonoids of litchi seed，TFL）在治疗肝纤维化疾病方面发挥重要的作用，因此众多学者对TFL抗肝纤维化的作用机制及分子传导通路进行了大量实验研究。罗伟生等［4］认为，TFL可降低肝纤维化病鼠的血清丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase，ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase，AST）及肝组织丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量，提高超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）蛋白含量，并且下调了肝组织核转录因子NF-κB（nuclear factor kappa-B，NF-κB）的表达，这表明TFL 具备减少肝细胞破坏和逆转肝纤维化病程的作用。曹杰［5］认为，TFL抑制肝纤维化的作用机制在于其可通过降低Toll 样受体4 和NF-κB 在人肝星状细胞LX2 细胞株（hepatic stellate cell-LX2）内的表达，并加速TGF-β1诱导的细胞凋亡，从而也表明Toll 样受体-白介素-1 受体（toll-like receptor-interleukin-1 receptor，TLR-IL-1R）炎症通路与肝纤维化的发生发展过程密切相关，在之后的研究中可考虑通过抑制TLR-IL-1R 炎症通路发挥逆转肝纤维化病程的作用。张扬武等［6］认为，TFL在体外亦可通过提高HSC-T6 的过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxisome proliferator activated receptorγ，PPAR-γ）活性与下调TGF-β1的水平从而减缓HSC-T6 的细胞增生繁殖速度，改善肝纤维化病变程度。欧士钰等［7］认为，TFL 可抑制MMP-2基因表达，MMP-2 可减少细胞外基质的分泌，从而减少纤维组织的形成。黄旭平等［8］认为，TFL可通过下调TGFβ-Ⅰ/Ⅱ型受体（TβRⅠ/Ⅱ）和Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原表达，从而改善二甲基亚硝胺法建模病鼠的肝纤维化病理改变，并减少HSC 的增殖及肝组织胶原纤维蛋白的生成。何志国等［9］发现，TFL呈剂量相关性减少病鼠在肝组织中的Toll样受体2、Toll 样受体4 蛋白含量，从而发挥抑制炎症反应，延缓胆管阻塞型肝纤维化病程的作用。亦有研究认为，TFL 与水飞蓟宾同样具有良好的抗肝纤维化的作用，此机制可能是通过下调血小板衍生生长因子（platelet derived growth factor，PDGF）及肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor，TNF）的mRNA表达以实现的［10］。

1.3 小茴香甘子明等［11］采用四氯化碳（carbon tetrachloride，CCl4）复合因素法造模，其实验发现肝纤维化模型大鼠采用小茴香预防性用药后，其肝功能较前改善，血清MDA 明显降低，羟脯氨酸（hydroxyproline，HYP）明显升高，肝组织病理结果显示炎症程度较前明显缓解，证明小茴香可起到改善肝纤维化病变程度的作用。其机制可能与小茴香抑制肝脏脂质过氧化反应及多种细胞因子的合成与分泌，并使MMPs 的活性增强从而减少胶原纤维的产生有关。吴小川等［12-13］发现，小茴香可使病鼠肝组织中的胶原纤维含量及TGF-β1水平明显下降，从而治疗肝纤维化及逆转肝纤维化的发展进程。刘玉平等［14-15］认为，小茴香呈剂量依赖性地减少TNF-α 和结缔组织生长因子（connective tissue growth factor，CTGF）的表达量而减少纤维组织的生成，发挥改善炎症及纤维化的作用。范强等［16］发现，不同剂量的小茴香均可使病鼠血清总蛋白、白蛋白含量及SOD活性提高，血清ALT、AST、HYP与MDA含量下降，从而改善肝脏组织炎症与肝纤维化。张泽高等［17］认为，小茴香提取物治疗肝纤维化的效用机制是由于其抑制TGF-β信号通路及下游的关键转录因子SMAD（drosophila mothers against decapentaplegic protein，SMAD）而减少HSC的生成及纤维组织的增生。

1.4 柴胡谢东浩等［18］认为，春柴胡与北柴胡均可通过抑制肝细胞的异常凋亡、减少正常肝组织损害达到治疗肝纤维化的作用，而春柴胡疗效较低于北柴胡。何燕等［19］以柴胡提取物柴胡皂苷（saikosaponin，SS）最具有活性的成分柴胡皂苷d（saikosaponin d，SSd）预防性给药予肝纤维化大鼠时发现，SSd 可促进病鼠肝组织SOD 的表达，并降低血清ALT、AST、MDA 及肝纤四项指标如透明质酸、血清Ⅲ型前胶原氨端肽、血清Ⅳ型胶原蛋白、层黏连蛋白的含量，结果表明SSd 可抑制脂质过氧化反应、减少正常肝细胞凋亡及肝纤维组织的增生。LEE等［20-21］研究发现，柴胡可抑制肝炎及肝星状细胞活化，并认为这种抑制作用机制可能与上调PPAR-γ表达相关。其也发现SS 能抑制蛋白激酶B/细胞外信号调节激酶的磷酸化和NF-κB活性，从而发挥抗肝纤维化的作用。杨洁等［22］认为，柴胡可抑制HSC 增殖活化，其作用机制可能与降低TGF-β1、PDGF 及TIMP-1/MMP-1 水平有关。郭景珍等［23］认为，SSd 通过升高血清白细胞介素10、一氧化氮（nitric oxide，NO）和降低血清TNF-α的水平减轻肝细胞应激氧化反应，发挥保护肝细胞的作用。此外，SSd亦可通过TGFβ/Smad信号通路下调HSC-T6 的TGFβ1、Smad3 的表达以减少细胞ECM 的生成，并上调肝细胞保护性因子Smad7 mRNA的表达达到抗纤维化的作用［24］。

2 化瘀理气类药物

2.1 郁金黄小鸥等［25］通过皮下注射CCl4溶液建立大鼠肝纤维化模型，认为桂郁金呈剂量依赖性地使ALT、AST、Ⅲ型前胶原含量下降，发挥保肝降酶、改善蛋白质合成的作用。研究表明，桂郁金抗肝纤维化的作用机制可能与抑制TGF-β1/Smad信号传导通路有关［26］。秦华珍等［27］研究发现，郁金能显着减少肝组织中的HYP、MDA 的含量，增加SOD 及谷胱甘肽过氧化物酶的含量，发挥护肝和改善肝纤维化的作用。彭岳等［28］认为，桂郁金提取物呈剂量依赖性地抑制HSC-LX2 增殖，减少纤维组织增生，减缓肝纤维化病变进程。刘雪梅等［29］研究发现，桂郁金提取物可通过抑制HSCLX2 的增殖从而减少Ⅰ型和Ⅲ型胶原的分泌，并加强MMP-1 及MMP-13 的分泌，发挥促进纤维蛋白降解、减少结缔纤维组织生成的效应，但这种效应呈剂量依赖性。

2.2 姜黄近年的研究发现植物姜黄根茎中存在的一种天然色素——姜黄素具有抗氧化、抗肿瘤、抗炎及抗病毒等生物学活性，其在抗肝纤维化方面具有良好的疗效［30］。而姜黄素可通过降低肝纤维化大鼠血清中升高的ALT、AST、HYP、MDA、NO的含量发挥治疗大鼠肝纤维化的作用［31］。赵珍东［32］认为，姜黄素可抑制HSC 中的血小板衍生生长因子-BB（platelet derived growth factor-BB，PDGF-BB）、血小板衍生生长因子受体β及下调ERK 的表达，从而抑制成纤维细胞及胶质细胞的分裂增生以改善纤维化。吴雄健等［33］认为，姜黄素可在不同程度上降低血清内毒素、组织内活性氧类物质及肝组织中MDA、NF-κB、TGF-β1、PDGF-BB、CTGF、TIMP-1 的含量与活性，并通过多种机制预防肝纤维化的发生发展。研究发现，姜黄素可以通过丝裂原活化蛋白激酶/信号通路抑制细胞外信息调节蛋白激酶1/2、c-Jun 氨基末端激酶、p38丝裂原活化蛋白激酶的激活，并减少多种炎症反应因子的表达，达到保护肝细胞的作用［34］。

2.3 莪术现代研究显示，莪术的活性成分为挥发油类，莪术油中的主要成分为多种倍半萜类物质，如莪术酮、莪术醇、榄香烯、姜黄素等［35］。熊振芳等［36］认为，莪术提取物药物血清在一定程度上可起到钙通道阻滞的作用，其可抑制PDGF 诱导的HSC细胞内Ca2+内流及磷脂酰肌醇3-激酶的表达，减少HSC 的活化与增殖，达到治疗肝纤维化的效应。江远等［37］、聂广等［38］从分子层面解释莪术提取物治疗肝纤维化的效应：莪术醇可抑制HSC-T6的TGF-β1、细胞色素P450a 表达，莪术油可抑制HSC-T6的TIMP-2、白细胞介素6表达，而这些细胞因子及蛋白均参与了肝纤维化的形成过程。胡胜军等［39］认为，莪术提取物β-榄香烯亦可起到治疗肝纤维化的作用，其可通过抑制HSC 增殖活化，抑制肝组织中的TGF-β1、平滑肌肌动蛋白表达，从而抑制ECM 的分泌与纤维组织的形成并逆转肝纤维化的病程发展。刘雪梅等［40］认为，桂莪术提取物可通过降低HSC-LX2 中的I 型胶原合成，增强HSC-LX2 中MMP-1 基因表达，减少HSC 的生成与活化，从而发挥治疗肝纤维化作用。

3 小结与展望

中医对于治疗肝纤维化具有独特且有效的理解，而肝纤维化的形成与肝气郁滞关系密切。故而具有理气作用的中药如香附、荔枝核、小茴香、郁金、姜黄、莪术等在抗肝纤维化的方面均具有良好的表现。通过多项实验研究发现，目前各不同的理气药物其主要信号作用靶点主要在炎症反应、氧化应激、纤维增生等相关通路上，通过不同的作用靶点发挥抗肝纤维化的作用，但由于各药物对肝纤维化的药理效应仍缺乏准确细致的分子机制及完整的自上而下的级联信号传导反应，故而仍难以完整的形成对某一药物的全面认识。此外，目前对各中药的研究仍较多停留在药物的粗提取物上，缺乏对中药提取的单一化合物的精确药理作用认识，一些对疾病无治疗作用的物质未得以祛除，随着时代科技的发展，在之后的研究与实验过程中，各学者应立足于中医理论与古籍论述，运用现代科学技术完善各中药的药理生物学实验与临床研究，更为全面准确地深入探讨各味中药是否具有治疗肝纤维化的效用及其具体完整的相关作用机制，并将其合理运用到之后的中药研制与开发当中。