向丽华，张治国，王 震，孙 刚，王笑红，李媛媛，刘 洋
(中国中医科学院中医基础理论研究所，北京 100700)
正常人每天摄入和从消化腺及胃肠上皮细胞分泌的消化液总量约9L，大部分被胃肠道重吸收，最终随粪便排出的水液只有0.12L左右。腹泻时胃肠道分泌、消化、吸收和运动等功能发生障碍，致使黏液分泌量增加、食物消化吸收不完全、水液吸收量减少和肠动力加速等，最终导致大便次数增加，粪便稀薄而形成腹泻。腹泻可引起大鼠体重明显下降，检测体重可了解大鼠通过大小便丢失的水液量。腹泻易引发脱水及电解质紊乱，肾脏通过排渗透压不同的尿液来维持血液及组织液正常渗透压，检测尿渗透压可了解肾的浓缩功能。因此，本研究观察了五苓散对腹泻模型大鼠体重及血清、尿渗透压的影响，探讨五苓散的止泻作用机理。
1 材料
1.1 动物
SD大鼠，SPF级，雌雄各半，2月龄，体重150g±10g，共101只，由中国药品生物制品检定所实验动物资源中心提供(许可证号 SCXK(京)2005-0004)。
1.2 药品
五苓散购于同仁堂药店，按《中国药典》和《伤寒论》制法配制:猪苓 150g，泽泻 250g，白术 150g，茯苓150g，桂枝100g，共研细粉，过 120目筛，干燥备用。使用前加蒸馏水配成相应浓度。氢氯噻嗪由山西云鹏制药股份有限公司生产(批号A090802)，使用前加蒸馏水配成相应浓度。口服盐液(ORS)按世界卫生组织(WHO)推荐配方配制:葡萄糖20g，氯化钠3.5g，碳酸氢钠2.5，氯化钾1.5g，加蒸馏水至1000ml。番泻叶液制备:200g番泻叶浸入 100℃1000ml纯净水，充分搅拌30min后用纱布绞出滤液约600ml备用。
1.3 仪器
SMC30渗透压摩尔浓度测定仪，天津天河医疗仪器有限公司生产。
2 方法
2.1 分组及给药方法
动物随机分7组:①正常对照组;②腹泻模型组;③口服盐液组:自由饮用口服盐液(ORC);④氢氯噻嗪组:灌胃氢氯噻嗪9mg/kg(相当于成人剂量100mg/d等效剂量);⑤五苓散低剂量组:灌胃五苓散1.35g/kg(相当于成人剂量15g/d等效剂量);⑥五苓散中剂量组:灌胃五苓散2.7g/kg;⑦五苓散高剂量组:灌胃五苓散5.4g/kg。实验进行6d。② ～⑦组连续6d每日上午灌胃20ml/kg番泻叶液制作并维持模型腹泻状态，④～⑦组每日下午灌胃给药1次。各组大鼠实验前和实验开始后每天下午给药前称体重，观察大鼠的一般状态、粪便状态、稀便率等。分别于第4天上午、第7天上午用拉尾促排尿方法收集大鼠尿液。通过眼球取血法获取血液，凝固后离心取上清液为血清。采用冰点法检测血清渗透压、尿渗透压的摩尔浓度(Osmol/kg)。
2.2 统计学方法
3 结果
②～⑦组灌胃番泻叶液后全部出现腹泻，排不成形含大量水和黏液的稀便，稀便率为100%。同时大鼠出现不同程度的精神萎靡、皮毛色泽下降、肛门周围污浊等。五苓散高剂量组3d后，大便已成形，黏液减少，但与对照组比较大便仍显湿软。各组大鼠体重变化见图1，各组血清、尿渗透压变化结果见表1、2。
图1 大鼠体重变化图
结果显示，正常对照组大鼠体重在实验期间继续增长，其他各组体重在灌胃番泻叶液后第2天检测均下降，随后体重变化如下:腹泻模型组体重增长下降;口服盐液组体重继续增长，但增长低于正常对照组，高于其他组;氢氯噻嗪组和五苓散各剂量组体重停止增长或体重下降。各组大鼠血清渗透压在实验前后没有明显变化，腹泻模型组和口服盐液组尿渗透压下降，6d后检测更明显，明显低于其他各组(P ＜0.001)。
表1 实验3d后大鼠血清、尿渗透压变化
表1 实验3d后大鼠血清、尿渗透压变化
组别 例数 血清渗透压 例数 尿渗透压正 常 对 照 组5 0.308±0.005 8 1.524±0.520腹 泻 模 型 组 7 0.306±0.004 12 1.341±0.726口 服 盐 液 组 7 0.300±0.006 8 1.053±0.451氢 氯 噻 嗪 组 7 0.299±0.005 14 1.454±0.713五苓散低剂量组 7 0.304±0.013 11 1.350±0.405五苓散中剂量组 7 0.305±0.004 14 1.660±0.546五苓散高剂量组7 0.305±0.005 14 1.664±0.570
表2 实验第6天后大鼠血清、尿渗透压变化
表2 实验第6天后大鼠血清、尿渗透压变化
注:与正常组比较:＊＊P＜0.01;与模型组比较:△△P＜0.01
组别 例数 血清渗透压 例数 尿渗透压正 常 对 照 组 6 0.305±0.005 6 1.780±0.343△△腹 泻 模 型 组 8 0.305±0.005 8 0.504±0.252＊＊口 服 盐 液 组 8 0.307±0.003 8 0.833±0.281＊＊氢 氯 噻 嗪 组 8 0.315±0.011 7 1.715±0.594△△五苓散低剂量组 8 0.308±0.006 8 1.507±0.396△△五苓散中剂量组 8 0.312±0.009 8 1.459±0.601△△五苓散高剂量组 8 0.307±0.004 8 1.781±0.521△△
4 讨论
番泻叶能使肠蠕动增加，损伤结肠黏膜和促进大肠排空，使肠道对水的吸收受抑制，造成大鼠腹泻［1］。本实验显示，20ml/kg(合生药 3.6g/kg)番泻叶液灌胃能使大鼠明显腹泻，体重增长下降，尿渗透压下降，说明腹泻大鼠丢失了大量水、电解质及营养物质，使处于体重增长期的2月龄大鼠体重增长下降。大鼠通过增加饮水补充部分水液，使电解质丢失显得更突出，大鼠通过排泄低电解质尿液等维持血清渗透压正常，这是腹泻模型组大鼠血渗透压正常而尿渗透压下降的原因，说明腹泻时机体有维护内环境稳定的自我调节能力。
口服盐液能补充大鼠因腹泻丢失的水和电解质，这是口服盐液组大鼠能维持大鼠体重增长的原因。但由于每日灌胃番泻叶，大鼠仍处于腹泻状态，所以口服盐液组体重增长低于正常组，尿渗透压也低于正常组。氢氯噻嗪是利尿剂，作用机制主要是抑制远端肾小管前段和近端小管对氯化钠的重吸收，从而增加远端小管和集合管的Na+-K+交换，使尿钠、钾、氯、磷和镁等离子排泄增加，尿量增加，这可能是氢氯噻嗪组尿渗透压没有明显下降的原因。其利尿作用是氢氯噻嗪组体重增长低于腹泻膜型组的原因。
药理研究表明，五苓散水煎剂有明显的利尿作用，40g/kg灌胃明显增加家兔、水负荷大鼠、小鼠的尿量[2]。五苓散的利尿作用维持时间长于西医利尿剂，五苓散中的茯苓、猪苓、泽泻、桂技均有利尿作用，但单味药的利尿作用不如五苓散复方强[3]，茯苓与桂枝有协同利尿作用[4]。五苓散利尿的作用机理主要是通过抑制肾小管重吸收功能，促进Na+以及K+、Cl－的排出;其中茯苓有抗醛固酮作用，泽泻增加心钠素(ANF)的含量[5-6]。五苓散的利尿作用是五苓散各剂量组大鼠体重不增长和体重低于腹泻模型组的原因。因此，认为五苓散对腹泻模型大鼠的止泻作用可能与利尿作用有关，这与五苓散“利小便实大便”治疗腹泻观点相符合。五苓散的利尿作用不利于腹泻大鼠体重增长，在应用五苓散治疗腹泻时要多饮热水或补充盐液，用以补充体内水液丢失，这可能正是《伤寒论》141条、386条提到应用五苓散时要“多饮暖水，汗出愈”的原因。
[1]刘顺良，周月彩，李建新，等.番泻叶的化学成分毒性及用药安全性研究[J].时珍国医国药，2002，13(11):693-693.
[2]陈奇.中药药理学实验[M].上海:上海科学技术出版社，2001:47-52.
[3]刘青云.中药药理学[M].北京:人民卫生出版社，1997:83-84.
[4]刘新，马成，盛萍，等.茯苓与桂枝配伍对小鼠利尿的实验研究[J].新疆中医药，2009，27(5):45-48.
[5]侯家玉.中药药理学[M].北京，中国中医出版社，2002:95-100.
[6]周联，陈芝喜，陈津岩.五苓散及其组分对正常小鼠血浆心钠素含量的影响[J].中国中西医结合杂志，1995，15(1):36.
