针刺大椎、足三里穴对大鼠运动性疲劳影响的实验研究❋

刘景玉，刘治中，马俊楠，燕 平

(1.山西中医学院，太原 030024;2.中国中医科学院中医基础理论研究所，北京 100700)

针刺大椎、足三里穴对大鼠运动性疲劳影响的实验研究❋

刘景玉1，刘治中2，马俊楠1，燕 平1

(1.山西中医学院，太原 030024;2.中国中医科学院中医基础理论研究所，北京 100700)

目的:从抗氧化系统、能量代谢系统等方面研究针刺大椎穴、足三里穴治疗对运动性疲劳的影响。方法:采用大鼠游泳训练模型，60只雄性大鼠按随机数字表法分为安静对照组、运动对照组、运动+大椎穴+足三里穴组和运动+足三里穴组4组各15只。其中安静对照组不进行游泳训练也不针刺，其余3组每天进行游泳训练60 min，运动对照组运动后不进行针刺，剩余2组运动后进行针刺实验，连续5周。测定与运动性疲劳相关的生化指标。结果:本实验表明针灸大椎、后三里能够使大鼠血清乳酸、血清尿素氮和肝脏丙二醛水平降低，血糖和肝、肌糖原水平及肝脏内超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶等抗氧化酶活性升高。结论:针刺大椎、后三里两穴不仅能够缓解运动性疲劳，且其作用效果优于单纯针刺足三里穴。

针灸;大椎;足三里;自由基;能量代谢;运动性疲劳

近年来，现代医学针对运动中广泛存在的运动性疲劳研究较多，而传统中医于此方面显示出极大的优势，其中以安全有效为特色的针灸治疗受到了广泛的关注。本实验组查阅大量文献发现，关于针刺足三里穴抗运动性疲劳的研究较多，而同时配合针刺大椎穴的研究报道甚少。大椎穴又名百劳穴，汇聚手足三阳的阳热之气与督脉的阳气上行头颈，从而有协调脏腑活动的作用。刺激足三里和大椎穴可补气补血、益精补肾、平衡阴阳，故本实验旨在研究探讨足三里与大椎穴配合刺激对运动性疲劳的作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物 体质量150～180 g的6周龄SD雄性大鼠60只，山西医科大学实验动物中心提供。适应性喂养7 d，保持每天换饮水和加足饲料，室温为20～25℃，相对湿度45%～60%左右。

1.1.2 试剂和仪器

2.1 试剂

戊巴比妥钠、BUN、LAC、肝、肌糖、SOD、MDA、GSH-Px等试剂盒(购于上海世仪生物科技有限公司)。

2.2 仪器

秒表、血糖仪(德国罗氏)，Enspire酶标仪(美国PerkinElmer)，UV1601可见紫外分光光度仪(日本 瑞立)，AU5800生化分析仪(美国 Beckman Coulter)，低温台式离心机(德国Heraeus)，WP7微波炉(顺德市格兰仕电器实业有限公司)，塑钢玻璃游泳池150 cm×60 cm×70 cm(上海欣软信息科技有限公司)。

2 方法

2.1 游泳运动训练模型

游泳训练分为适应性训练(3周，周六周日不进行游泳训练)和大强度耐力训练(2周，1周7 d)，每天60 min。

2.2 动物分组及针刺

按随机数字表法将60只雄性大鼠分为安静对照组(Ⅰ)、运动对照组(Ⅱ)、运动加针刺大椎穴与足三里穴组(Ⅲ)和运动加针刺足三里穴组(Ⅳ)4组各15只，分笼饲养。实验期间，安静对照组不进行运动训练也不进行针刺治疗，运动对照组只进行运动训练不进行针刺治疗，运动+大椎+足三里组与运动+足三里组每天游泳训练结束后进行针刺治疗。将大鼠俯卧于鼠固定器上，在所需针刺穴位［1］(大椎:第7颈椎与第1胸椎间，背部正中，足三里:小鼠膝关节外侧腓骨小头下3.5 mm)处剃毛，消毒后以32号0.5寸毫针直刺，持续捻转2 min，留针3 min。

2.3 检测指标与测试方法

于实验第32天全部实验大鼠进行力竭性游泳训练，记录力竭时间。力竭游泳参数:塑钢玻璃游泳池150 cm×60 cm×70 cm，水深50 cm，水温(30± 1)℃，大鼠尾部系5%体质量的重物;力竭判定指标:大鼠经10 s后仍不能返回水面。力竭游泳结束30 min后，3%戊巴比妥钠溶液麻醉大鼠，腹主动脉采血取血清待测;取肝脏、股四头肌液氮冻存待测，葡萄糖氧化酶法测定血糖含量;蒽酮法测定肝、肌糖原的含量;比色法测定LAC含量;酶偶联速率法测定BUN含量;TBA比色法测定MDA含量;黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)含量，DTNB法测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)含量。

3 统计学方法

采用 SPSS 13.0软件进行统计分析，以 α＜0.05。

4 结果

4.1 针刺对大鼠力竭时间的影响

表1显示，运动对照组与安静对照组大鼠力竭时间比较差异有统计学意义(P＜0.05)，说明大鼠经长期游泳训练产生的运动性疲劳会使大鼠游泳力竭时间变短;运动+大椎+足三里组、运动+足三里组与运动对照组大鼠力竭时间比较差异有统计学意义(P＜0.05)，说明针刺治疗延长了大鼠力竭时间。运动+大椎+足三里组与运动+足三里组比较，大鼠力竭时间比较差异有统计学意义(P＜0.05)，说明针刺大椎、足三里两穴的大鼠比只针刺足三里穴的大鼠效果更好。

4.2 针刺大椎、后三里穴对大鼠血清LAC、BUN水平的影响

表2显示，运动对照组与安静对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05)，说明经长期游泳训练的大鼠血清LAC、BUN水平升高;运动+大椎+足三里组、运动+足三里组与运动对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05)，说明大鼠经针刺治疗后血清LAC、BUN水平恢复;运动+大椎+足三里组与运动+足三里组比较差异有统计学意义(P＜0.05)，说明大椎、足三里两穴配合针刺大鼠血清LAC、BUN水平恢复优于单纯针刺足三里穴。

表1 各组大鼠力竭时间比较(±s)

表1 各组大鼠力竭时间比较(±s)

注:与安静对照组比较:*P＜0.05;与运动对照组比较:△P＜0.05;与运动+足三里组比较:#P＜0.05

组 别 鼠数 力竭时间(s) I 15 20.24±0.23 II 13 18.49±0.29*III 13 21.00±0.37△#IV 14 20.07±0.26△

表2 各组大鼠血清LAC、BUN水平比较(±s)

表2 各组大鼠血清LAC、BUN水平比较(±s)

注:与安静对照组比较:*P＜0.05;与运动对照组比较:△P＜0.05;与运动+足三里组比较:#P＜0.05

组 别 LAC(mmol/L) BUN(mmol/L) I 5.77±0.22 7.54±0.16 II 9.34±0.36* 11.02±0.24*III 5.67±0.16△# 7.21±0.25△#IV 6.38±0.28△ 8.31±0.39△

4.3 针刺对大鼠血糖和肝、肌糖原水平的影响

表3显示，运动对照组与安静对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05)，说明运动疲劳大鼠血糖和肝、肌糖原水平降低;运动+大椎+足三里组、运动+足三里组大鼠与运动对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05)，说明大鼠经针刺治疗后血糖和肝、肌糖原水平恢复;运动+大椎+足三里组与运动+足三里组大鼠血糖水平比较差异有统计学意义(P＜0.05)，说明大椎、足三里两穴配合针刺大鼠血糖水平恢复优于单纯针刺足三里穴。

表3 各组大鼠血糖、肝糖原和肌糖原水平比较(±s)

表3 各组大鼠血糖、肝糖原和肌糖原水平比较(±s)

注:与安静对照组比较:*P＜0.05;与运动对照组比较:△P＜0.05;与运动+足三里组比较:#P＜0.05

组 别 血糖(mmol/L) 肝糖原(mg/g) 肌糖原(mg/g) I 5.02±0.26 6.14±0.24 1.82±0.25 II 3.26±0.35* 3.08±0.26* 1.42±0.13*III 5.56±0.22△# 6.08±0.35△ 1.79±0.17△Ⅳ 4.87±0.35△ 6.10±0.28△ 1.80±0.20△

4.4 针刺对大鼠肝脏SOD、GSH-Px、MDA水平的影响

表4显示，运动对照组与安静对照组大鼠肝脏SOD、GSH-Px、MDA水平比较差异有统计学意义(P＜0.05)，说明运动疲劳大鼠肝脏 SOD、GSH-Px水平降低，MDA水平升高;运动+大椎+足三里组、运动+足三里组大鼠与运动对照组大鼠肝脏 SOD、GSH-Px、MDA水平比较差异有统计学意义(P＜0.05)，说明大鼠经针刺治疗后肝脏SOD、GSH-Px、MDA水平恢复;运动+大椎+足三里组与运动+足三里组大鼠肝脏SOD、GSH-Px、MDA水平比较差异有统计学意义(P＜0.05)，说明大椎、足三里两穴配合针刺，大鼠肝脏SOD、GSH-Px、MDA水平恢复优于单纯针刺足三里穴。

表4 各组大鼠SOD、GSH-Px、MDA水平比较(±s)

表4 各组大鼠SOD、GSH-Px、MDA水平比较(±s)

注:与安静对照组比较:*P＜0.05;与运动对照组比较:△P＜0.05;与运动+足三里组比较:#P＜0.05

组 别 SOD (U/mg pro) GSH-Px (U/mg pro) MDA (nmol/mg pro) I 358.10±16.55 61.02±3.05 7.42±1.12 II 286.57±14.76* 47.95±3.28* 9.84±1.55*III 375.83±18.38△# 53.63±4.72△# 6.82±1.34△#IV 347.25±18.56△ 59.24±4.37△ 7.02±1.26△

5 结论与讨论

尿素氮是机体蛋白质代谢的最终产物，机体运动持续时间较长(＞30 min)、强度较大时蛋白质代谢较明显，但其供能比例不超过18%，因此血清中尿素氮含量与运动机能状态、疲劳程度以及运动负荷的大小有关，并以此评定运动负荷的强度［2］。当运动肌肉糖原耗尽时，非运动肌肉中糖原不能及时补充肌细胞内分隔存在的糖原，肌肉吸收较多的血糖供能，引起血糖降低进而影响中枢神经系统的能量供应，乳酸堆积导致运动性疲劳造成体能下降［3］。SOD可有效清除体内超氧阴离子，其活性的变化反映体内自由基的代谢和生成情况［4］。MDA反映机体脂质过氧化程度，同时亦为自由基生成及对膜脂质双层结构破坏的评定指标。GSH-Px是一种可以分解过氧化物及过氧化氢的含硒的酶，通过阻断脂质过氧化连锁反应，从而保护膜结构和功能的完整［5］。大强度运动使肝脏代谢异常或紊乱，破坏肝组织抗氧化系统，不能被及时清除氧自由基攻击细胞膜形成的MDA，导致肝功能有所下降［6］。

中医学的针刺疗法对于消除和缓解运动性疲劳具有良好的效果，且简便易行、无毒副作用。运动性疲劳是机体生理过程中不能持续其机能在一特定水平上或不能维持预定的运动强度［7、12］。运动性疲劳是一个很复杂的综合性生理现象，它以中枢神经的作用为主导，是在中枢神经系统和周围组织相互影响下发生的神经、感觉系统和运动系统及内脏器官的活动而出现的复杂的相互联系的变化［7］。中医认为，精(津)血为体力产生的物质基础，它的化生和运行与中医脾、肾、肝、心有密切关系［8］。由整体观出发，运动性疲劳的本质为脏腑功能失调或津血不足，因其为暂时性内伤虚劳，故多可通过调养或自行恢复［9］，而脾虚、肾虚、气虚、血虚等不同形式的虚证为运动性疲劳的主要表现。目前运用中医药方法尤其是针灸疗法防治运动性疲劳的相关研究，已成为运动医学界的一大热点。《通玄指要赋》有记载:“三里却五劳之羸瘦。”足三里穴能补益中气，又有回阳固脱之效，因此前人将它列为回阳九针穴之一。现代研究表明［4-10］，针灸足三里穴能够延缓运动性疲劳发生。大椎穴为机体联络脏腑、协调表里内外的网络系统(督脉)的重要穴位，《针灸甲乙经》即言大椎为“三阳督脉之会”，可代表督脉通过监督调节各阳经上传下达，从而达到统帅经络功能协调脏腑活动的作用［11］。本实验结果显示，大椎与足三里两穴配合作用不仅可以使运动训练后的大鼠血清LAC、BUN和肝脏MDA水平降低，血糖和肝、肌糖原水平及肝脏抗氧化酶SOD、GSH-Px活性升高，具有良好的抗运动性疲劳效果，且作用效果优于单纯刺激足三里穴的抗运动性疲劳效果。

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Experiment Study the Impact of Acupuncture Dazhui and Zusanli Point on Sports Fatigued Rats

LIU Jing-yu1，LIU Zhi-zhong2，MA Jun-nan1，Yan Ping1
(1．Shanxi University of Traditional Chinese Medicine，Taiyuan 030024，China; 2．Basic theory Institute，China Academy of Chinese Medical Sciences，Beijing 100700，China)

Objective:To study the impact of acupuncture Dazhui and Zusanli point on sports fatigued rats in terms of antioxidant system and energy metabolic system.Methods:The rat models of swimming training were used.60 male rats were randomized into four groups(n=15)，named a motionless control group，a motion control group，a motion + acupuncture Dazhui and Zusanli point group，a motion motion+acupuncture Zusanli point group.In the motionless group，no any motion exercise and acupuncture was applied.Other groups swimming training 60 minutes a day，in the motion control group no acupuncture was applied，in the remaining two groups after motion training corresponding acupuncture was applied for 5 weeks.Afterwards，the relevant biochemical indexes of sports fatigue were determined.Results:Acupuncture Dazhui and Zusanli point decreased the levels of serum lactic acid and urea nitrogen and liver malondialdehyde and increased the levels of blood glucose and some liver antioxidase activities such as superoxide dismutase and glutathione peroxidase.Conclusion:Acupuncture Dazhui and Zusanli point can be anti-sports fatigue，more effective than Acupuncture Zusanli acupoint only.

Acupuncture;Dazhui point;Zusanli point;Free Radicals;Energy Metabolism;Sports Fatigue

R245.31

:B

:1006-3250(2015)11-1435-03

2015-02-14

山西省科技厅自然科学基金资助项目(2012011041-3)

刘景玉(1980-)，男，黑龙江人，讲师，医学硕士，从事体育教育、运动医学的临床与研究，E-mail:42519256@ qq.com。