不孕症和自然流产患者染色体核型异常分析

郭彦伟，温莉娟，赵显杰，赵慧敏

1.内蒙古包钢医院检验科，内蒙古包头　014010；

2.内蒙古包钢医院心血管内科，内蒙古包头　014010

不孕症和自然流产患者染色体核型异常分析

郭彦伟1，温莉娟1，赵显杰2，赵慧敏1

1.内蒙古包钢医院检验科，内蒙古包头014010；

2.内蒙古包钢医院心血管内科，内蒙古包头014010

目的 分析评价不孕症和自然流产患者染色体核型分布的关系。方法 整群收集该院2012年1月—2015年12月行外周血染色体检查的不孕症和自然流产患者416例进行G显带染色体核型分析，发现异染色区异常病例进行C显带确认，发现随体及随体柄异常进行N显带确认。结果在对该院就诊的不孕症和自然流产患者核型分析检查的416例样品中，共检出的51例染色体异常核型和2例性发育异常病例，总异常率为12.26%。51例染色体异常核型中常染色体结构异常有34例；异染色区多态性9例；性染色体结构异常4例。染色体数目异常4例，其中1例为嵌合型数目异常。结论染色体核型异常与不孕症和自然流产密切相关，也是出生异常胎儿的重要原因，为达到降低出生人口缺陷率优生优育的目标应进行必要的遗传学咨询、产前筛查、产前诊断。

不孕症；自然流产；染色体核型

［Abstract］Objective Analysis and evaluation of the relationship between infertility and spontaneous abortion karyotype distribution.Methods Group selection 416 cases of natural infertility and abortion cases collected in our hospital from January 2012 to December 2015 were peripheral blood chromosome G-banding karyotype，abnormal cases heterochromatin zones C banding confirmed the body was found with the body and handle exceptions with the N-banding confirmation.Results In 416 cases of infertility and spontaneous abortion samples karyotyping examination of our hospital，a total of 51 cases of detected abnormal karyotypes and two cases of dysplasia cases，the total abnormal rate was 12.26%.51 cases of abnormal karyotypes often chromosome structural abnormalities in 34 cases；heterochromatin polymorphism 9 cases；sex chromosome structural abnormalities in 4 cases.The number of chromosome abnormalities in 4 cases，1 case of abnormal number of chimeric.Conclusion Karyotype abnormality associated with infertility and spontaneous abortion，birth is an important reason for abnormal fetus，to achieve the goal of reducing the rate of prenatal and postnatal care of Birth Defects should undertake the necessary genetic counseling，prenatal screening，prenatal diagnosis.

［Key words］Infertility；Spontaneous abortion；Chromosome karyotype

染色体异常是染色体病中患者表现正常的一类，是不孕症和自然流产患者重要的遗传原因，据人类遗传学家夏家辉等人统计每106～107对夫妇中就有1位染色体异常携带者，也有报道中国一般人群中染色体异常率为0.5%～1.0%［1］，在不孕与流产夫妇中，染色体异常携带者占3%～6%［2］。染色体异常中的异染色区多态性与不孕和流产的相关性在目前的相关研究报道中存在不同的观点。该研究对该院2012年1月—2015年12月行外周血染色体检查的不孕症和自然流产患者416例进行染色体核型分析检查，以探讨染色体核型异常患者染色体核型分布、染色体异常与不孕症和自然流产的相关性以及异染色区多态性与不孕症和自然流产的相关性，为遗传咨询提供参考，以达到降低出生人口缺陷率优生优育的目标，现报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料

整群收集在该院就诊并进行外周血染色体检查的不孕症和自然流产患者病例，同时对患者进行孕产史、接触史、家族史等可能引起染色体改变的相关信息详细采集。

1.2方法

1.2.1 G显带无菌操作抽取肘静脉血2～3 mL，在超净工作台中种植于10 mL培养基中，放置37℃恒温培养箱培养每日混匀1次，培养70～72 h后加入20 ug/mL秋水仙素100 uL混匀后，再继续培养2.5 h，1 500 r/min离心10 min吸取掉上清，培养物中加入0.075%KC1溶液10 mL低渗处理30 min，加入2 mL固定液预固定10 min离心去上清，加入10 mL固定液固定3次，42℃烤片1 h，隔日进行显带和染色。核型分析：每例至少计数20个核型，分析5个核型，异常者加大计数到60个核型，嵌合型病例计数到100个核型。

1.2.2 C显带新滴玻片42烤片1 h。隔日，60℃的1～5%（过饱和）氢氧化钡液10～15 min，在60℃的2×SSC液中处理90min时，用自来水冲洗干净，5%Giemsa染液染色10min。

1.2.3 N显带新滴玻片42烤片1 h。隔日，玻片用4层干净擦镜纸（略小于玻片大小）盖好，置于一干燥培养皿漂于60℃水浴箱水面上，新鲜配制的AgNO3溶液慢慢滴于玻片纸上，直至擦镜纸呈棕黄色（黑色）为止，轻轻启开擦镜纸，将玻片用自来水冲干净，6%Giemsa染色液染色5 min。发现异染色区、着丝粒和随体异常时进行C显带或N显带分析，根据ISCN 2013人类细胞遗传学国际命名体制进行核型命名。

2　结果

不孕症和自然流产患者416例病例核型分析，共检出51例染色体异常核型和2例性腺发育异常病例，异常率为12.26%。

51例染色体异常核型中常染色体结构异常有34例，占66.67%，其中平衡易位25例，占总异常率的49.02%；倒位6例，占总异常率的11.76%，其中9号染色体倒位3例。异染色区多态性例，占总异常率的，其中1 qh+，2例；9 qh+，2例；16 qh+，1例，Yqh+，1例；Yqh-，3例。性染色体结构异常4例，占总异常率的7.84%，其中X染色体臂间倒位2例，X长臂等臂1例；环状X染色体1例。染色体数目异常4例，占总异常率的7.84%，均为性染色体数目异常，其中46，XXY，2例；46，XYY，1例；1例核型为45，X［17］/46，XX［83］的嵌合体。染色体结构异常核型包括性染色体结构异常共38例占到总异常率的74.5%。

表1　染色体异常分布比例情况

3　讨论

染色体异常无论是男方或女方都可能导致不孕症及流产，不孕症及流产染色体异常常见得结构异常主要有平衡易位、罗氏易位 、倒位等。染色体数目异常导致不孕症及流产常见于性染色体数目异常常见类型如：45，X；47，XXY；47，XYY以及一些嵌合型病例。常染色体数目异常导致不孕症及流产可见于嵌合型染色体核型患者［3］。该文416例患者中共检出51例异常核型，检出率为12.26%，与李亚丽等报道检出率12.6%一致［4］。从检测结果可以看到结构异常病例包括性染色体异常共38例占到74.5%说明染色体结构是引起流产、不孕症的主要细胞遗传学因素，与相关报道结果一致［5］，这是由于染色体结构异常患者在生殖细胞减数分裂过程中染色体联会时产生异常联会结构，平衡易位染色体在联会时可形成4射体能够产生18种配子，其中只有1种配子核型正常，1种平衡易位携带配子，还有16种染色体结构异常配子，这16种异常配子都可导致流产；而倒位核型在联会时可形成倒位环可产生4种配子其中只有1种配子核型正常。由于染色体结构异常患者产生异常配子几率较大，所以可能发生不孕和自然流产的概率增大。检测结果中发现9例异染色区多态性，占到异常的17.6%，异染色区多态性是指在正常人群中超过1%携带这类异常，多态性与不孕症及流产的相关性在业内存在2种不同的观点，从报道中也可看出［6-8］。该文认为这与染色体检测的分辨率相关，染色体检测在320～400条带阶段分辨率在5～10 MB，即染色体检测是检测不出小于5 MB变异，甚至一些特殊病例由于缺失或重复的染色体带纹处于浅带区，可能超过10 MB的变异也无法检测出来。所以染色体检测中发现的异染色区多态性病例中可能一部分存在微小结构异常，需要更进一步进行分子水平的检测如芯片或高通量测序。随着技术发展染色体检测的优势转变为检测分子技术无法检测的染色体结构异常如倒位和易位。而染色体检测未发现异常患者又排除其它原因导致的不孕不育患者应建议行分子水平的遗传学检测。

综上所述，染色体核型异常与不孕症和自然流产密切相关，也是出生异常胎儿的重要原因。对不孕症及流产患者进行遗传咨询和染色体核型分析是必不可少的，而携带有染色体多态性的患者需要得到足够的重视，应建议进行分子水平的检测。为达到降低出生人口缺陷率优生优育的目标应进行必要的遗传学咨询、产前筛查、产前诊断。

［1］石锦平，肖建平，王峻峰，等.276例不良孕产及核型异常患者染色体核型分析［J］.安徽医药，2015，19（11）：2142-2144.

［2］左伋主编．医学遗传学［M］.6版．北京：人民卫生出版社，2013.

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［4］李亚丽，高健，余小平，等．复发性流产与染色体相关性研究［J］．中国妇幼保健，2013，28（22）：3615-3618.

［5］陈美佳，吕福通，黄霈，等．327对自然流产夫妇的染色体核型分析［J］．中华医学遗传学杂志，2015，32（1）：132.

［6］秦胜芳，魏萍，曾兰，等．581例多态染色体的临床表现综合性分析［J］．中国优生与遗传杂志，2014，22（4）：50-53．

［7］王桂玲，任春娥，姜爱芳．染色体多态性qh+与复发性流产关系的探讨［J］．中华医学遗传学杂志，2015，32（4）：591-592

［8］刘念，阎炯，宋婕萍，等.染色体多态性与复发性流产的关系研究［J］．实用妇产科杂志2015，31（1）：75-77.

Infertility And Spontaneous Abortion Abnormal Karyotype Analysis

GUO Yan-wei1，WEN Li-juan1，ZHAO Xian-jie2，ZHAO Hui-min1
1.Clinical Laboratory，Baogang Hospital，Baotou，Inner Mongolia，014010 China；2 Department of Cardiology，Baogang Hospital，Baotou，Inner Mongolia，014010 China

R711

A

1674-0742（2016）08（c）－0085-03

10.16662/j.cnki.1674-0742.2016.24.085

2016-05-27）

郭彦伟（1978.1-），男，内蒙古商都人，硕士，主管检验师，研究方向：细胞遗传学。

温莉娟（1962.7-），女，内蒙古包头人，本科，副主任技师，研究方向：细胞遗传学，E-mail：875499399@qq.com。