不同分型的涎腺多形性腺瘤组织中血管内皮生长因子、核转录因子p50的表达及意义

张强 刘江 陈晖 毕磊

河北联合大学附属医院口腔科，河北唐山063000

不同分型的涎腺多形性腺瘤组织中
血管内皮生长因子、核转录因子p50的表达及意义

张强 刘江 陈晖 毕磊

河北联合大学附属医院口腔科，河北唐山063000

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)、核转录因子(NF.κB)p50在不同分型涎腺多形性腺瘤中的表达及意义。方法本研究收集河北联合大学附属医院和开滦总医院2007年3月～2012年6月50例涎腺多形性腺瘤组织石蜡标本，采用免疫组化染色方法SP法检测50例涎腺多形性腺瘤(基质丰富型25例为A组、细胞丰富型25例为B组)中VEGF、NF.κB p50的表达情况，并与瘤旁涎腺组织(对照组)25例的表达情况做对比分析。结果VEGF在A组的积分光密度(IOD)值为(153.13±60.81)；B组的IOD值为(954.65±305.79)；对照组的IOD值为(52.46± 9.76)，A、B组均较对照组增高，B组较A组增高，组间比较差异均有统计学意义(均P＜0.05)。NF.κB p50在A组的IOD值为(43.40±5.56)；B组为(529.79±163.81)；对照组为(6.83±1.90)，A、B组均较对照组增高，B组较A组增高，组间比较差异均有统计学意义(均P＜0.05)。结论细胞丰富型涎腺多形性腺瘤组织中VEGF、NF.κB p50较基质丰富型涎腺多形性腺瘤均有更高的表达，VEGF、NF.κB p50的检测对鉴别涎腺多形性腺瘤的不同分型及指导临床诊断和治疗均有帮助。

VEGF；NF-κB p50；联合检测；涎腺多形性腺瘤

人类许多疾病的发生和发展都可以归因于某些基因的异常表达，从而导致疾病的发生。其中一部分基因是在核转录因子kappa B(nuclear factor.kappa B，NF.κB)调控下进行［1］。涎腺肿瘤是口腔颌面部常见的肿瘤，而多形性腺瘤(pleomorphic adenoma，PA)则是涎腺肿瘤中最常见的一种，占涎腺肿瘤的60%～70%。肿瘤中不仅含有肿瘤性上皮组织，还含有黏液样组织或软骨样组织，组织学形态呈显着的多形性及混合性。由于其位置的特殊性，患者术后美容及心理都会受到一定的影响；并且由于其还具有侵袭性生长的生物学特性，使得术后容易复发，且多次复发或病史较长者会转变为恶性多形性腺瘤或称之为癌在多形性腺瘤中［2］。随着研究的深入，后来为简便起见，学者们将多形性腺瘤合并为两型，即基质丰富型和细胞丰富型［3］。本研究通过检测血管内皮生长因子(VEGF)、核转录因子(NF.κB)p50在基质丰富型和细胞丰富型多形性腺瘤以及瘤旁正常涎腺组织中的表达，以探讨VEGF、NF.κB p50在涎腺多形性腺瘤不同分型中的表达及意义，以便对涎腺多形性腺瘤不同分型的鉴别诊断和治疗提供帮助。

1 资料与方法

1.1 标本来源

收集河北联合大学附属医院和开滦总医院2007年3月～2012年6月80例涎腺多形性腺瘤组织石蜡标本，选取术前均无放疗或化疗史，具有完整病历资料，无严重的心脑疾病、糖尿病等及石蜡包埋组织完整的50例患者的临床资料，其中男23例，女27例；年龄20～79岁，平均(45.38±3.63)岁。据参考文献［3］的判定标准，80例涎腺多形性腺瘤患者分为25例基质丰富型多形性腺瘤(A组)；25例细胞丰富型多形性腺瘤(B组)；采集涎腺多形性腺瘤旁涎腺组织(距肿瘤5 cm以外的涎腺组织)25例作为对照组。A组患者中男12例，女13例；年龄(44.76±2.83)岁。B组患者中男14例，女11例；年龄(46.06±1.83)岁。对照组患者中男13例，女12例；年龄(45.46±2.03)岁。3组患者的年龄、性别比较差异均无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。本研究经医院伦理委员会通过，患者均知情同意并签署知情同意书。

1.2 方法

对所收集的标本切片后行HE染色，经有经验的病理医师进行在镜下分型，分为细胞丰富型和基质丰富型两类。VEGF和NF.κB p50的检测采用SP免疫组化法，染色程序按SP试剂盒说明书进行［4］。用PBS取代一抗作为阴性对照，用已知阳性切片(恶性多形腺瘤)作阳性对照［5］。行镜下观察，计算肿瘤组织积分光密度(IOD)值。

1.3 统计学方法

采用SPSS 13.0软件包对所得的数据进行统计学分析，计量资料数据以均数±标准差(x±s)表示，采用t检验。计数资料以率表示，采用χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

三组患者中，与对照组比较，A、B组患者VEGF、NF.κB p50 IOD值均增高(P＜0.01)；与A组比较，B组患者VEGF、NF.κB p50 IOD值均增高(P＜0.01)。见表1。

表1 三组患者各指标IOD值的比较

表1 三组患者各指标IOD值的比较

注：与对照组比较，aP＜0.01；与B组比较，bP＜0.01；VEGF：血管内皮生长因子；NF.κB：核转录因子；IOD：积分光密度

组别例数VEGFNF.κB p50 A组B组对照组25 25 25 153.13±60.81ab954.65±305.79a52.46±9.76 43.40±5.56ab529.79±163.81a6.83±1.90

3 讨论

VEGF是Ferrara等［6］1989年在牛垂体滤泡的星状细胞体外培养液中首先纯化出血管内皮生长因子，是一类具有高度特异性的血管内皮细胞有丝分裂素，具有特异性促进血管内皮细胞增殖的作用。近来，以探讨涎腺多形性腺瘤组织中VEGF的表达及其在腮腺多形性腺瘤细胞增殖活性中的价值逐渐成为热点［7］，并有研究发现NF.κB p50除了在免疫炎性反应过程中发挥重要作用外，还参与多种细胞增殖和凋亡相关基因的转录和调控，目前研究显示NF.κB p50在卵巢癌、乳腺癌、口咽部鳞癌等恶性肿瘤中表达显着增加［8］。但国内外目前对VEGF、NF.κB p50联合检测在涎腺多形性腺瘤良恶性判定及预后评估的应用价值和意义尚未见报道［9.10］。

VEGF是一种作用于血管内皮细胞的多功能细胞因子，仅表达与血管内皮细胞表面，能引起血管通透性增加，引起细胞外基质成分改变，诱导血管形成。而NF.κB是一种重要的细胞转录因子，主要由p65和p50组成，激活后参与多种细胞增殖，凋亡相关基因和癌基因等的转录调控，在涎腺多形性腺瘤发生、发展以至恶变中起着重要的作用。

本研究结果显示，VEGF在A组的IOD值为(153.13±60.81)；B组的IOD值为(954.65±305.79)；瘤旁正常涎腺组织对照组的IOD值为(52.46±9.76)，A、B两组明显高于对照组(均P＜0.01)，B组明显高于A组(P＜0.01)，表示B组细胞丰富型PA中存在着丰富的新生血管形成，为肿瘤细胞的增殖供给了营养基础，和国内外研究结论基本一致［11］。另外，NF.κB p50在A组的IOD值为(43.40±5.56)；B组的IOD值为(529.79±163.81)；对照组的IOD值为(6.83±1.90)，A、B两组明显高于对照组(均P＜0.05)，B组明显高于A组(P＜0.05)，表示B组细胞丰富型PA中存在显着的NF.κB p50异常活化，和国外研究结论基本一致［12］。

综上所述，细胞丰富型涎腺多形性腺瘤与基质丰富型涎腺多形性腺瘤组织中VEGF、NF.κB p50均有较高表达，细胞丰富型较基质丰富型均有更高的表达，腺瘤组织中VEGF、NF.κB p50的联合检测对涎腺多形性腺瘤的不同分型的鉴别诊断和治疗均有帮助。

［1］张强，李金源，王晓波，等.血管内皮细胞生长因子、核转录因子p50在多形性腺瘤中的表达及意义［J］.中国医药导报，2011，8(16)：19.20.

［2］杨文军，刘应时，陈巨峰，等.涎腺多形性腺瘤微血管密度及血管内皮生长因子表达的意义［J］.实用口腔医学杂志，2008，24(4)：571.574.

［3］杨慧远，杨学华，郑颖，等.咽旁间隙多形性腺瘤的CT表现［J］.放射学实践，2012，27(5)：506.508.

［4］宋萌，汪廷乐，肖翠翠，等.涎腺多形性腺瘤中Gli.2蛋白的表达及意义［J］.中华口腔医学杂志，2011，46(1)：58.60.

［5］谢东华，唐孝达，夏术阶，等.核转录因子κB在膀胱癌中的表达及临床意义［J］.癌症，2002，21(6)：663.667.

［6］Ferrara N，Henzel WJ.Pituitary follieular cells secrete a novel heparin.binding growth factor specific for vascular endothelial cells［J］.Bio.chem Biophys Res Commun，1989，161(2)：851.858.

［7］张学斌，杨文军，刘应时，等.细胞核增殖抗原及血管内皮生长因子在多形性腺瘤中表达的相关性研究［J］.中华临床医师杂志：电子版，2011，5(9)：2728.2730.

［8］Yu LL，Yu HG，Yu JP，et al.Nuclear factor kappa B p65 transcription factoris constitutively activated in humancolorectal carcinoma tissue［J］.World J Gast roenterol，2004，10(22)：3255.3260.

［9］张丽，唐军民，唐岩，等.人外周血单核细胞分化为树突状细胞过程中核转录因子.κB p50的表达及柴胡皂苷a的影响［J］.解剖学报，2007，38(6)：681.686.

［10］Suboj P，Babykutty S，Valiyaparambil DR，et al.Aloe emodin inhibits colon cancer cell migration/angiogenesis by downregulating MMP.2/9，RhoB and VEGF via reduced DNA binding activity of NF.κB［J］.European journal of pharmaceutical sciences，2012，45(5)：581.591.

［11］Kim JW，Kwon GY，Roh JL，et al.Carcinoma ex pleomorphic adenoma of the salivary glands：distinct clinicopathologic features and immunoprofiles between subgroups according to cellular differentiation［J］.Journal of Korean medical science，2011，26(10)：1277.1285.

［12］Sezgintürk MK.A new impedimetric biosensor utilizing VEGF receptor.1(Flt.1)：Early diagnosis of vascular endothelial growth factor in breast cancer［J］.Biosensors &bioelectronics，2011，26(10)：4032.4039.

VEGF and NF-kappa B/p50 joint detection in benign and malignant salivary gland pleomorphic adenoma determination and prognosis evaluation of application value and significance

ZHANG QiangLIU JiangCHEN HuiBI LeiDepartment of Stomatology,the Affiliated Hospital of Hebei United University,Hebei Province,Tangshan063000, China

Objective To study the expression and it significance of VEGF and NF.κB/p50 in cell.rich and matrix. rich polymorphous adenomas of salivary gland.Methods 50 cases of salivary gland pleomorphic adenoma tissue paraffin specimens were collected in the Affiliated Hospital of Hebei United University and Kailuan General Hospital from March 2007 to June 2012,and were detected by the method of immunohistochemical staining SP（25 cases of matrix rich type were in group A,25 cases of cell type were in group B）in the expression of VEGF and the nf.kappa B/p50 situation,and peritumoral were compared and analyzed with 25 cases of normal salivary gland tissue expression in the control group.Results The IOD value of VEGF in group A was（153.13±60.81）;the IOD value of group B was（954.65±305.79）;IOD value of control group was（52.46±9.76）,the differences between the three groups had statistical significance（P＜0.05）.The NF.kappa B p50 IOD values in group A was（43.40±5.56）;the IOD value of group B was（529.79±163.81）;IOD value of control group was（6.83±1.90）,the differences between the three groups had statistical significance（all P＜0.05）.Conclusion VEGF,the NF.kappa B p50 joint detection in benign and malignant salivary gland pleomorphic adenoma judgement has practical application value,better for the treatment of pleomorphic adenoma and prognosis judgement,can identify different classification of the salivary gland pleomorphic adenoma and to guide clinical diagnosis and treatment with helpful.

VEGF;NF.κB p50;The joint detection;Salivary gland pleomorphic adenoma

R781.1

A

1673-7210（2014）02（a）-0041-03

2013.10.30本文编辑：卫轲)

河北省科学技术研究与发展计划项目(编号11276135)；河北省唐山市科学技术研究与发展计划卫生临床研究项目任务分解计划(编号11150205A.9)。

张强(1975.)，男，硕士，副主任医师，主要从事口腔疾病防治研究。