杜庆玮 高锦 李克诚 施军平

我国非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的患病率已逐年升高。NAFLD是代谢综合征（MS）累及肝脏的表现，与肥胖、糖尿病、高血压、高脂血症等代谢性疾病密切相关［1］。其中2 型糖尿病（T2DM）与NAFLD 间有一定的内在关系，且相互影响，与一般人群比较，T2DM 患者中NAFLD 的发病率较高，约为45%~75%。早发现、早干预有利于疾病的预后，目前诊断和评估NAFLD/NASH 的组织学特征的金标准仍是肝脏活检。肝活检为有创检查，存在抽样误差，可能导致某些并发症。高尔基体蛋白（golgiprotein73，GP73）是一种主要表达于肝脏胆管上皮细胞的高尔基体Ⅱ型跨膜蛋白［2］，可作为早期诊断肝癌的特异性标志物［3］，有研究表明检测慢性HBV 感染患者血清GP73 水平有助于肝纤维化程度的判定［4］。本文探讨GP73 作为判断T2DM 是否合并NAFLD 的发生及进展的血液学指标应用价值。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2017 年11 月至2018 年5 月浙江省瑞安市人民医院就诊的T2DM 患者30 例，男22例，女8 例；年龄17~70 岁，平均年龄（50±12）岁。非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）患者122 例，男84例，女38 例；年龄17~71 岁，平均年龄（44±13）岁。T2DM 合并NAFLD 患者41 例，男35 例，女6 例；年龄15~75 岁，平均年龄（49±15）岁。同时选取同期年龄、性别与病例组匹配的健康体检者33 例为正常对照组（NC 组），其中男21 例，女12 例；年龄21~95 岁，平均年龄（46±15）岁。糖尿病的诊断标准符合中华医学会糖尿病学分会2013 年版的中国2 型糖尿病防治指南，且均为初治患者。非酒精性脂肪肝的诊断标准符合中华医学会肝病学分会脂肪肝和酒精性肝病学组2010 年修订的非酒精性脂肪肝肝病诊疗指南。排除标准：病毒性肝炎、酒精性肝病、中毒性肝炎、药物性肝炎、自身免疫性肝炎、经治2 型糖尿病患者等。

1.2 方法 （1）肝脏硬度与血清肝功能指标的检测：所有患者采用FibroScan 检测仪（法国Echosens 公司生产）测量肝脏瞬时弹性硬度，采集受控衰减参数理论CAP 值和E 值，进行10 次成功检测后采取中位数作为最终测定结果，肝脏硬度值（LSM）采取（kPa）表示。同时于当日采集静脉血进行生化指标如丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、谷氨酰转肽酶（GGT）等的检测。（2）血清GP73 水平检测：每位患者进行生化指标检测采集的静脉血，3500r/min 离心10min 后，吸取一份血清，-80°深低温冰箱保存。采用ELISA 法测定血清GP73 水平，GP73 试剂盒购自北京热景生物技术有限公司，检测步骤严格按照试剂盒说明书进行操作，显色后使用瑞士帝肯sunrise 酶标仪进行比色分析。

1.3 统计学方法 采用SPSS 24.0 统计软件。近似正态分布计量资料以（±s）表示，多组比较采用方差分析；非正态分布以M（Q1、Q3）表示，采用Kruskal-Wallis 检验。以P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同人群血清GP73 水平的比较 NAFLD 组及T2DM 合 并NAFLD 组GP 73 检 测 结 果 分 别 为（76.19±41.38）ng/ml 和（73.36±42.00）ng/ml， 较正常对照组（46.22±19.01）ng/ml 和单纯T2DM 患者组（38.13±28.50）ng/ml 高，差异均有统计学意义（P<0.05）。NAFLD 患者组与T2DM 合并NAFLD 患者组以及单纯T2DM 与健康体检组血清GP73 水平差异均无统计学意义（P 均>0.05），见表1。

表1 各组患者GP73检测结果比较（±s）

表1 各组患者GP73检测结果比较（±s）

注：与NC组比较，* P<0.05；与T2DM组比较，△P<0.05

组别 n GP73（ng/ml）T2DM组 30 38.13±28.50 NAFLD组 122 76.19±41.38*△T2DM合并NAFLD组 41 73.36±42.0*△NC组 33 46.22±19.01

2.2 血清GP73 对非酒精性脂肪性肝病的诊断价值 采用ROC 曲线进行分析。ROC 曲线下面 积 为0.792（95%CI：0.733~0.843）（P<0.0001），见图1。根据Youden 指数最大值为0.5248，将cut-off 值设定为59.22ng/ml，GP73 诊断NAFLD 的敏感性和特异性分别为69.94% 和82.54%。

图1 GP73诊断NAFLD 的ROC曲线分析

2.3 GP73 与其他检测指标的相关性分析 相关性分析结果显示：GP73 与ALT、AST、GGT、CAP、E 均呈正相关，相关系数分别为r=0.221、0.152、0.232、0.214、0.285，差异均有统计学意义（P<0.05）。见图2。

图2 血清GP73与ALT、AST、GGT、CAP和E的相关性

3 讨论

2000 年美国学者Kladney 等［2］发现GP73 在肝癌患者中显着升高，可作为肝癌的一个血清标志物［3-4］。此后，国内外众多学者研究发现，GP73 不仅在肝癌中高度表达，在其他一些肝病中也显着升高。如Iftikhar 等［5］学者发现在急性肝炎、慢性丙型肝炎病毒感染、自身免疫性肝炎及酒精性肝病患者中GP73 也有不同程度的升高，且在急性肝炎与自身免疫性肝炎中升高尤为显着。

NAFLD 已取代慢性乙型肝炎成为我国最常见的慢性肝病［6］，NAFLD 和2 型糖尿病作为代谢综合征的组成成分，常相伴存在，越来越多证据显示NAFLD与T2DM 是相互影响、相互作用的［7-10］。魏红山等［7］研究表明肝细胞脂肪变会导致血清GP73 水平显着升高。本资料结果显示，与正常对照及单纯T2DM 患者比较，NAFLD 及T2DM 合并NAFLD 患者GP73 水平显着升高，差异有统计学意义，而GP73 在T2DM 组与健康体检组间差异无统计学意义，表明GP73 的升高与非酒精性脂肪性肝病有关，与单纯2 型糖尿病无关。以健康体检和单纯T2DM 为对照组，利用ROC 曲线分析GP73 对NAFLD 的诊断效能，结果显示曲线下面积为0.792（95%CI：0.733~0.843），表明血清GP73 水平作为NAFLD 的诊断指标有一定的临床意义。余红艳等［11］研究显示，2 型糖尿病促使NAFLD 向非酒精性脂肪性肝炎（NASH）、肝纤维化、甚至肝细胞癌发展，增加肝脏相关死亡率。应筱雯等［12］研究显示，GP73与肝纤维化及血清HA 水平呈正相关，且纤维化越严重GP73 表达水平越高。本资料结果显示，GP73 水平与评估肝纤维化程度的肝脏瞬时弹性检测的E 值［13］呈正相关（P<0.05），提示GP73 可作为NAFLD 患者发生肝脏纤维化的预估指标。本资料结果显示，血清GP73 与ALT、AST、GGT 等指标均呈正相关，可能原因为肝细胞损伤触发GP73 水平上升，但相关系数不高。与许文芳等［14］的研究结果一致。

综上所述，GP73 在NAFLD 及T2DM 合并NAFLD患者中均升高，且与肝细胞损伤与肝纤维化有关，GP73 作为诊断NAFLD 的指标敏感度和特异性尚可，可作为判断T2DM 是否合并NAFLD 及发生肝纤维化进展的一项血清学指标。