王平平，胡冠中，周燕珍，吴红照，吴艳珍
·病例报告·
输入性三日疟一例基层实验室检测
王平平，胡冠中，周燕珍，吴红照，吴艳珍
疟疾是严重危害人民健康和经济发展的公共卫生问题［1］，三日疟主要分布在非洲撒哈拉沙漠以南和东南亚地区，在我国主要分布于南方山区，随着疟疾防治工作的深入，三日疟已非常罕见［2］。浙江省近年来疟疾疫情呈下降趋势，并以输入性为主［3］。浦江县地处金华市北部浙江省中部，于2014年成为本地疟疾消除县，近年来无本地感染和输入性三日疟病例报道。目前疟原虫血涂片镜检仍是基层检验机构采用的主要检测方法，三日疟形态与间日疟、卵形疟相似，且虫体多不典型。本文对1例三日疟基层实验室诊断进行分析，报道如下。
1 病例
患者男，32岁，浙江省浦江县浦阳街道人，安哥拉经商，2015年2月10日回浦江，3月7日开始出现发热，畏寒、出汗等症状，并于当日于村卫生室，普通感冒治疗，期间病情反复，发热不规则，最高温度达40.5℃，3月16日病情加重就诊于浙江省金华市浦江县中医院。入院检查：体温40.3℃，脉搏90次/min，血压134/98 mmHg（1mmHg≈0.133kPa），脾肋下可触及，巩膜黄染，寒战、呕吐、头痛，无昏迷等凶险症状。血常规检测：红细胞（RBC）3.46×1012/L，血红蛋白（HGB）101g/L，白细胞（WBC）7.35×109/ L，血小板（PLT）78×109/L，经涂片检测为疟原虫感染未分型，交由本疾控中心复核分型。快速诊断试剂检测（RDT）：对该患者血样检测显示质控区带及检测区T2区带阳性，即Pan阳性。血涂片染色镜检：厚血膜见核、包浆、疟色素清晰，见图1，各期的疟原虫虫体可见，疟原虫密度为1.5×1010/L（按疟原虫数/白细胞数×血液中白细胞浓度计算），裂殖体和配子体占72%。薄血膜中，见小滋养体，大滋养体、未成熟裂殖体、成熟裂殖体及雌雄配子体，寄生的红细胞不肿胀或缩小，裂殖子数目6～8个为主，均未超过12个，并见典型带状大滋养体，及菊花状成熟裂殖体。见封四彩图3，血片虫体密度较低，小滋养体、大滋养体较少，裂殖体及配子体较多，典型的三日疟带状大滋养体及菊花状裂殖体少见。省疾控中心对病例血样进行 PCR扩增出三日疟特异性条带。
2 讨论
随着实验室技术的发展，PCR已经应用到疟疾的检测及型别的分型，但有一定的假阳性和假阴性［4］，且由于设备昂贵、操作繁琐等，在基层应用有一定的局限性。RDT方便、快捷，但与类风湿因子等存在交叉反应，仅对恶性疟比较敏感，尚不能对其他3种疟分型及混合感染鉴别［5］，当虫体抗原的改变或某地人群中少见种的出现，可能会影响RDT的结果［6］。目前疟原虫血涂片镜检仍是疟原虫检测“金标准”［7］，对于基层检测机构，仍以血涂片镜检为主，因此，要求检测者不但要有熟练的血涂片制作技术，还要求有丰富的镜检经验。三日疟基层检测机构基本没遇到，缺乏相应的认识和经验，且该患者热型不规则，感冒对症治疗，给临床诊断带来一定的难度。该病例RDT显示Pan阳性，提示感染除恶性疟以外的其他3种疟原虫单项或混合感染。血涂片中，疟原虫中低密度，寄生红细胞不肿胀或缩小，形态与间日疟、卵形疟相似，未见恶性疟配子体，偶见三日疟典型带状大滋养体和菊花状裂殖体，可能由于三日疟发育周期长大滋养体和成熟裂殖体数量少，多不典型，且比较少见，检测人员很难给出准确判断。建议对于低密度涂片，至少细致观三张涂片，找出各型别典型虫体，给出准确判断。
综合患者临床症状、实验室RDT、血涂片镜检分型及省中心复核，确诊该患者为三日疟感染。基层实验室应提高镜检技术，加强对疟疾的型别诊断能力。
［1］吴观陵.人体寄生虫学［M］.4版.北京:人民卫生出版社，2013:190.
［2］Xia ZG，Feng J，ZhouSS.Malaria situation in the People's Republic of China in 2012 ［J］.Zhongguo Ji Sheng Chong Xue Yu Ji ShengChongBingZaZhi，2013，31（6）:413-418.
［3］许翔，姚立农，杨婷婷，等.2009年浙江省疟疾重点监测地区疫情［J］.中国血吸虫病防治杂志，2010，22（5）:472-474.
［4］Iglesias N，Subirats M，Trevisi P，et al.Per formance of a new gelled nested PCR test for the diagnosis of imported malaria: comparison with microscopy，rapid diagnostic test，and real-time PCR［J］.Parasitol Res，2014，113（7）:2587-2591.
［5］Maltha J，Gillet P，Jacobs J.Malaria rapid diagnostic tests in travel medicine［J］.Clin Microbiol Infect，2013，19（5）:408-415.
［6］陈玉凤，侯君，孟繁琪.1例输入性卵形疟原虫实验室检测［J］.预防医学，2014，20 （1）:23-28.
［7］MohantyS，SharmaR，DebM.Usefulness of a centrifugedbuffycoatsmearexamination for diagnosisofmalaria［J］.IndianJMedMicrobiol，2015，33（1）:63-67.
10.3969/j.issn.1671-0800.2016.04.078
R531.3
B
1671-0800（2016）04-0559-01
2015-06-20
（本文编辑：孙海儿）
322200浙江省金华，金华市浦江县疾病预防控制中心（王平平、周燕珍、吴红照、吴艳珍）；金华市浦江县中医院（胡冠中）
王平平，Email:wping2000-0@163.com
