2054例中期妊娠产前诊断染色体核型分析

汤丽霞，禤洁甜，梁彩红，林 蔚，陈华锦，郑慧洁，杨 光

（广东佛山市第一人民医院临床研究所 528000）

介入性产前诊断的实施是防止染色体异常患儿出生的有效方法之一。羊水或脐血穿刺后，经过体外细胞培养，获取中期染色体核型，分析染色体数目或结构是否正常，判断胎儿染色体是否异常，能够帮助孕妇选择分娩正常发育的胎儿。近年来，随着中国政府对《母婴保健法》的普及和执行力度的加强，以及妇产医学在产前诊断领域的技术进展，产前筛查和产前诊断的受众面越来越大，染色体异常的患儿出生数量下降，大大提高了出生人口的健康质量。在有了一定数量的产前诊断染色体核型分析工作后，对临床应用的产前诊断指征进行回顾性分析，旨在总结产前诊断常用指征的应用价值，提高产前诊断异常染色体胎儿的检出率。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2009年1月至2012年4月间在本院就诊的符合产前诊断指征的中期妊娠孕妇2054例，经过知情同意后羊水穿刺1755例，脐血穿刺299例，孕周15～25周，年龄20～43岁。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养和染色体制备 羊水和脐血穿刺均经腹壁在B超定位指引下进行。羊膜腔穿刺抽取羊水20～30mL，平均分置于2支15mL离心管中，离心后弃上清，羊水第一线培养采用GIBCO羊水培养基6mL重悬沉淀，第二线培养采用以色列羊水培养基6mL重悬沉淀，分别接种于25cm2培养瓶，置37℃、5%CO2的培养箱中培养，6～7d后观察，收获前1d换液，在细胞克隆数达到5堆以上，且细胞生长旺盛，数量足够时，加入秋水仙素继续培养4～6h进行收获，常规制片和G显带后核型分析。每例计数20个中期分裂相，分析5个核型以上。脐血标本接种达辉外周血淋巴细胞培养基，标本均实行双线培养。

1.2.2 产前诊断指征 中期妊娠产前诊断指征主要包括在以下6种：（1）唐氏筛查高风险，包括21三体高风险，18三体高风险、13三体高风险；（2）高龄孕妇，≥35岁的孕妇；（3）超声检查胎儿异常超声标记，包括妊娠中期或中期前检出的胎儿各系统的异常超声影像学指标，如胎儿颈后透明带宽度值增大、胸腔积液、脉络丛囊肿、脑室增宽、心室强光斑、双肾盂分离、肠管回声增强、羊水过多或过少、鼻骨发育不良、肱骨及股骨短小等。（4）夫妇单方为染色体平衡易位携带者；（5）不良孕产史：流产史、新生儿死亡；（6）其他：包括不良接触史、孕母血清筛查中单项高、母亲智力低下、近亲结婚以及上述5组未能包括的产前诊断指征。有重叠指征选择入其中一组。6组之间没有重叠。

1.2.3 异常染色体判断 计数20个核型，分析核型大于或等于5个，异常核型判断标准执行SICN2005。羊水培养核型分析结果为嵌合体时，进行脐血染色体核型分析，并以脐血核型分析结果与羊水核型分析结果相符时为真性嵌合体。胎儿核型分析结果为易位时，需排除是否为父母一方携带来源，如果为父母来源的平衡易位，则不包括在异常核型数据中。

2 结 果

2.1 染色体异常检出结果 产前诊断70例异常染色体种类分布见表1。在2054例羊水和脐血细胞核型分析中，染色体数目异常占47.1%，结构异常占30.0%，嵌合体占异常染色体22.9%。

2.2 各种产前诊断指征染色体异常结果分布 各种产前诊断指征检查例数和异常染色体构成比，以及染色体异常检出率见表2。

表1 产前诊断异常染色体种类分布

表2 产前诊断各种指征与染色体核型异常检出的分析

3 讨 论

染色体结构和数目异常是严重的出生缺陷之一，染色体病患儿通常智力低下，生长发育迟缓，缺乏特异性临床学表现。中期妊娠产前诊断染色体核型分析是有效阻止染色体病患儿出生的重要和有效手段之一。本研究中，2054例孕妇进行羊水和脐血染色体检查，结果胎儿染色体异常检出率为3.4%（70／2054），与同类文献报道的检出率基本一致［1－2］。夫妻单方平衡易位携带者生育染色体病患儿的检出率为42.9%（3／7），明显高于其他指征。唐氏筛查高风险、高龄和B超提示胎儿异常3种产前诊断指征异常染色体检出率分别为3.7%（39／1052）、1.4%（10／706）、8.1%（15／186），其与国内外同类文献报道的检出率水平持平［3－4］。3种指征所包含的异常染色体患儿检出数占检出总数的91.4%（64／70）。3种指征包含了产前诊断孕妇的94.6%（1944／2054）。本研究中羊水染色体分析检出18例嵌合体，其中经脐血染色体分析验证有5例嵌合体为细胞培养引起的假性嵌合体［5］。

虽然唐氏筛查所选出的唐筛高风险指征中异常染色体胎儿检出率为3.7%，但是55.7%的异常染色体胎儿是从唐氏筛查高风险阳性的孕妇中检测出来。唐氏筛查高风险是产前诊断的重要指征之一，提高这个由众多检查指标和临床指标综合确定的检查界值，需要不断地对检测系统进行调整，需要进行诊断性试验的询证评价，以进一步提高异常染色体胎儿检出率。

高龄孕妇是指孕妇的分娩年龄大于或等于35周岁，是唐氏综合征婴儿的一个重要危险因素。因此有越来越多的高龄孕妇直接进入产前诊断。本研究中高龄孕妇指征占比为34.37%，总数为706例。高龄孕妇直接进入产前诊断的胎儿异常染色体检出率为1.4%（10／706）。在唐氏筛查高风险几项指征中比较，高龄孕妇胎儿染色体异常检出率为最低。高龄孕妇直接进入有创性的胎儿产前诊断，无疑对高龄孕妇造成较大的精神压力。对高龄孕妇根据筛查结果行产前诊断，可以减少高龄孕妇的介入性产前诊断手术［6－7］。高龄孕妇直接进入还是结合产前筛查的其他指征进入产前诊断需要进一步多角度的研究。

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