S100A7蛋白对局部复发性鼻咽癌患者挽救术治疗前放疗效应的预测价值

陈国富，陈秋蓉

（1.江苏省泰州职业技术学院医学技术学院 225300；2.江苏省泰州市人民医院五官科 225300）

伴随我国社会经济的迅速发展，鼻咽癌（NC）患者的发病率不断增高。由于NC具有一定的特异性，一经确诊通常已进入中晚期，患者的预后不佳，即使通过一定疗程的治疗，部分患者仍容易产生局部复发［1］。针对局部复发性NC患者而言，通常是放疗后再实施挽救术治疗，从而尽可能好地改善患者预后，这就使得通过某种指标对放疗效应进行预测，再针对性地给予治疗成为了难题［2］。鉴于此，为探索针对术前放疗效应较为敏感的标志性指标，本文通过分析S100A7蛋白对局部复发性NC患者接受挽救术治疗前的放疗效应实施预测的价值，以期为临床治疗NC作出相应理论及数据支持，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2010年2月至2013年2月在泰州市人民医院接受治疗的局部复发性NC患者35例作为研究对象。其中，男21例，女14例，年龄52～68岁，平均（62.5±3.8）岁。根据关于鼻咽癌的1992年福州分期标准分成rT2 5例，rT3 12例，rT4 18例；N0 26例，N1 5例，N2 4例。根据癌症临床分期分成Ⅱ期5例，Ⅲ期14例，Ⅳ期16例。纳入标准［3］：（1）症状均符合WHO关于局部复发性NC的诊断标准，并均经CT、磁共振成像（MRI）等影像学手段，以及病理检查确诊；（2）年龄大于50岁；（3）复发时间为治疗后2年内。排除标准［4］：（1）有其他类恶性肿瘤；（2）严重的心、肝、肾等器官功能性不全；（3）无挽救手术的适应证；（4）不接受手术者。另选同期于医院接受治疗的慢性鼻咽炎患者40例作为对照。其中，男20例，女20例，年龄53～65岁，平均（61.9±4.3）岁。局部复发性NC患者与慢性鼻咽炎患者的性别和年龄等资料对比，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 治疗方法 检测过程中使用的兔抗人S100A7多克隆抗体产于Abcam公司。免疫组织化学SP试剂盒与DAB底物显色剂产于北京的中杉金桥公司。两组患者的检测标本常规进行脱蜡至水，将pH6.0的柠檬酸缓冲液在高温、高压下实施抗原修复，滴入过氧化物酶的阻断液，在37℃下封闭约10 min。其中第一抗体S100A7的稀释度是1∶300，置于4℃下冰箱内过夜。而后在37℃下孵育约30min，利用DAB显色，经苏木素复染，再脱水透明，利用中性树脂进行封固。通过磷酸盐缓冲溶液（PBS）代替一抗作为阴性对照。

1.2.2 效果评价［5］S100A7以在细胞质或者细胞核内发现黄色颗粒作为阳性细胞，经2名经验丰富的病理医师通过双盲法读片，于显微镜（×400）下随机地选取5个视野，对各视野内200个癌细胞内阳性细胞比例实施计数，而后取5个视野平均百分数。依照阳性细胞的百分率实施计分，其中阳性细胞小于10%为0分，10%～50%为1分，＞50%为2分。依照染色强弱实施计分，其中无色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。将两项相加：0～1分是阴性（－），2～4分是阳性（＋），5分是强阳性（＋＋）。

1.2.3 观察指标 对比S100A7在不同病变组织中的表达，局部复发性NC患者不同放疗效应的S100A7表达，分析S100A7蛋白表达预测局部复发性NC放疗效应的敏感性、特异度、准确度。其中敏感性＝真阳性者/（真阳性者＋假阴性者）；特异度＝真阴性者/（假阳性者＋真阴性者）；准确度＝（真阳性者＋真阴性者）/总病例。

1.3 统计学处理 采用SPSS13.0统计软件分析，计数资料用率表示，组间采用χ2检验，检验水准α＝0.05，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 S100A7在不同病变组织中的表达对比 局部复发性NC的S100A7表达阳性率显着高于慢性鼻咽炎患者，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

2.2 S100A7在不同病理分型和临床分期中的表达情况对比 不同病理分期和临床分型中低档S100A7的表达差异无统计学意义（P＞0.05），见表2。

2.3 局部复发性NC不同放疗效应的S100A7表达对比 放射抵抗的局部复发性NC S100A7阳性和阴性表达率显着高于放射敏感，差异有统计学意义（P＜0.05），见表3。

表1 S100A7在不同病变组织中的表达对比［n（%）］

2.4 S100A7蛋白表达预测局部复发性NC放疗效应的敏感性、特异度、准确度分析 S100A7蛋白的阳性表达对局部复发性NC在挽救术治疗前放疗效应的预测价值中，敏感性、特异度及准确度为56.43%、68.82%、58.94%，S100A7蛋白在慢性鼻咽炎组织和局部复发性NC组织中的表达情况见图1。

表2 S100A7在不同病理分型和临床分期中的表达情况对比

表3 局部复发性NC不同放疗效应的S100A7表达对比［n（%）］

图1 S100A7蛋白表达情况分析

3 讨 论

由于肿瘤侵袭、转移及复发均为复杂进展过程，主要包含癌细胞相关接触抑制丧失和运动性增大，以及细胞外基质降解。而国外Li等［6］报道称，上述进展过程及生理化学改变可能和S100A7表达具有紧密联系。S100蛋白作为分子量相对较小的Ca结合性蛋白家族，在与钙离子结合之后，其蛋白构象产生变化，并和靶蛋白结合，而后形成生物学效应［7］。人类机体S100中的α基因通常在染色体1q21区域定位，在肿瘤组织内基因常会进行频繁重组，进而导致S100基因出现表达失控，影响正常细胞功能及代谢，最终致使肿瘤产生和发展［8］。所以在肿瘤晚期或癌症转移时均可发现S100蛋白异常表达。S100A7蛋白即为S100蛋白家族成员中的一种，有报道证实［9］，S100A7蛋白具有调节细胞的支架结构及存活增殖等功能，且其与癌症复发有着较为紧密的联系。

本文研究发现，局部复发性NC的S100A7表达阳性率为85.71%，显着高于慢性鼻咽炎的5.00%，表明恶性肿瘤复发时S100A7水平明显上升，与良性病变组织存在明显的阳性表达差异，符合Qin等［10］的报道结果。同时，本文研究显示，放射抵抗的局部复发性局部复发性NC组织S100A7阳性表达率为70.00%，显着高于放射敏感的33.33%，表明检测S100A7蛋白阳性表达可较好地判断是否会发生放射抵抗。进一步研究表明，S100A7蛋白的阳性表达对局部复发性NC在挽救术治疗前放疗效应的预测价值中，敏感性、特异度及准确度均大于50%，这再次提示对于S100A7蛋白的表达情况实施测定，具有较好的预测价值。究其原因，作者认为这可能是因为S100A7蛋白出现的异常表达通过基质金属蛋白酶－2或基质金属蛋白酶－9的上调进一步促进了NC的病情进展［11］。对于复发性NC患者而言，由于其鼻咽部的淋巴组织比较丰富，而毛细淋巴管的有关结构又异于毛细血管，往往管壁较薄，由单层的内皮细胞及极薄结缔组织组成，其管壁缺少完整的基底膜，在内皮外含一层筛状的基质，此基质则含有Ⅳ型胶原蛋白。在组织癌变或者复发时，机体局部的基质金属蛋白酶－2或基质金属蛋白酶－9通过表达增高来降解相应的内皮外基质，肿瘤细胞因黏附于内皮外裸露的粘连蛋白而更易浸润与转移，进而影响S100A7蛋白的表达［12］。针对放射抵抗的局部复发性NC组织S100A7阳性表达率更高，原因可能在于存在放射抵抗的癌瘤组织转移能力相对更强，而引发转移的酶类物质活性更高，进而使得S100A7呈现高表达。国内外研究也证实，S100A7蛋白和多类肿瘤的转移联系紧密，且S100A7蛋白表达可用作乳腺癌化疗后预测疗效的指标［13－15］。这与本文的报道基本一致。需要指出的是，由于样本容量有限等因素的影响，本文也存在着未能深入研究S100A7阳性表达与基质金属蛋白酶－2或基质金属蛋白酶－9表达之间的联系等问题，这值得后续研究工作的进一步关注及开展。

综上所述，S100A7蛋白对于局部复发性NC患者接受挽救术治疗前的放疗效应具有较好的预测价值，临床诊断及治疗时，应对其加以重视，对S100A7实施监测分析，辅助治疗判断，从而使患者获得更佳预后。

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