凹叶厚朴叶的化学成分研究

张 超，吴锦玉，黄泽豪，吴建国，吴锦忠，吴岩斌

（福建中医药大学药学院，福建 福州 350122）

中药厚朴来源于木兰科植物厚朴（Magnolia officinalis Rehd.et Wils.）和凹叶厚朴（Magnolia officinalis Rehd.et Wils.var.biloba Rehd.et Wils.）的干燥干皮、枝皮及根皮，具有燥湿消痰、下气除满的功效［1］。厚朴和凹叶厚朴是多年生落叶乔木，其生长周期长，一般要生长15 a才能剥皮供药用，其采集方式主要是砍树剥皮，长期以来，其资源受到严重的破坏［2］。因此，充分开发利用厚朴叶资源，可以挖掘厚朴潜在的医药价值。近年来化学和药理研究表明：厚朴叶含有木脂素、黄酮、挥发油、多糖等化学成分，具有抗菌、抗氧化、止咳、抗抑郁、舒张血管等药理作用［3-11］。但目前关于凹叶厚朴叶的研究报道较少，本课题组前期从凹叶厚朴叶中分离得到了黄酮类和木脂素类等17个化学成分［12-13］，通过对凹叶厚朴叶进一步的研究分析，又从中分离得到7个化合物，并对其进行了结构鉴定。

1 仪器与试药

Bruker DRX-400／AV-500型超导核磁共振波谱仪（美国Bruker公司）；色谱柱硅胶和薄层硅胶GF254（烟台江友硅胶开发有限公司）；Sephadex LH-20（瑞典Pharmacia公司）；反相ODS填料（德国Merck公司）；其他试剂均为分析纯。凹叶厚朴叶于2011年10月采自福建省光泽县，经福建中医药大学药学院杨成梓教授鉴定为凹叶厚朴（Magnolia officinalis Rehd.et Wils.var.biloba Rehd.et Wils.）的干燥叶。

2 方法与结果

2.1 提取分离 取干燥凹叶厚朴叶10 kg，用10倍量75%乙醇回流提取2次，每次3 h，合并提取液并减压浓缩，最后加蒸馏水得到混悬液；依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，浓缩得到不同部位萃取浸膏，其中乙酸乙酯部位浸膏 221 g，正丁醇部位浸膏 399 g。乙酸乙酯部位浸膏经硅胶柱（200～300目）色谱，以石油醚-醋酸乙酯（100∶0→0∶100）梯度洗脱，再经反相ODS及Sephadex LH-20反复柱色谱得到化合物 1（22 mg）、化合物 2（32 mg）、化合物3（19 mg）、化合物 4（27 mg）、化合物 5（36 mg）、化合物 6（32 mg）、化合物 7（46 mg）。

2.2 结构鉴定

2.2.1 化合物1 淡黄色羽毛状晶体（甲醇），1H NMR（500 MHz，MeOD） δ：7.85（1H，d，J＝9.5 Hz，H-4），7.10 （1H，s，H-5），6.76 （1H，s，H-8），6.20（1H，d，J＝9 Hz，H-3），3.90（3H，s，H-11）；13CNMR（125MHz，MeOD） δ：164.3（C-2），112.9（C-3），146.4 （C-4），110.2 （C-5），147.4 （C-6），153.2 （C-7），104.2 （C-8），151.74 （C-9），112.8 （C-10），57.1（C-11）。 以上数据与文献报道基本一致［14］，故鉴定化合物1为莨菪亭。

2.2.2 化合物2 黄色针状结晶（甲醇），1H NMR（500 MHz，MeOD） δ：7.72（1H，d，J＝2.0 Hz，H-2'），7.62（1H，dd，J＝2.0，8.5 Hz，H-6'），6.87（1H，d，J＝8.5 Hz，H-5'），6.38（1H，d，J＝2.0 Hz，H-8），6.17（1H，d，J＝2.0 Hz，H-6）；13C-NMR（125MHz，MeOD）δ：158.5（C-5），137.5（C-3），177.6（C-4），149.1（C-2），99.5（C-6），165.8（C-7），94.7（C-8），162.8（C-9），104.8（C-10），124.5（C-1'），116.2（C-2'），146.5（C-3'），148.3（C-4'），116.5（C-5'），121.9（C-6'）。以上数据与文献报道基本一致［15］，故鉴定化合物2为槲皮素。

2.2.3 化合物3 无色针状晶体（甲醇），1H NMR（400 MHz，MeOD） δ：7.52（1H，d，J＝15.9 Hz，H-7），7.02（1H，d，J＝2.1 Hz，H-2），6.93（1H，dd，J＝2.0，8.2 Hz，H-6），6.76（1H，d，J＝8.2 Hz，H-5），6.24（1H，d，J＝15.9 Hz，H-8）；4.20（2H，q，J＝7.1 Hz，OCH2CH3），1.30（3H，t，J＝7.1 Hz，OCH2CH3），13CNMR（100MHz，MeOD） δ：128.0（C-1），115.4（C-2），147.1 （C-3），147.0 （C-4），116.7 （C-5），123.1 （C-6），149.8（C-7），115.5（C-8），169.6（C-9），61.6（C-1'），14.9（C-2'）。 以上数据与文献报道基本一致［16］，故鉴定化合物3为咖啡酸乙酯。

2.2.4 化合物4 无色晶体（甲醇），1H NMR（400 MHz，MeOD）δ：7.54（2 H，m，H-2，6），6.83（1 H，d，J＝8.7 Hz，H-5），3.88（3H，s，3-OCH3），13C-NMR（100 MHz，MeOD）δ：125.5（C-1），116.1（C-2），148.96（C-3），152.9（C-4），114.1（C-5），123.4（C-6），170.3（C-7），56.6（3-OCH3）。 以上数据与文献报道基本一致［17］，故鉴定化合物4为香草酸。

2.2.5 化合物5 白色针晶（甲醇），1H NMR（400 MHz，MeOD） δ：8.06（1H，dd，J＝6.2，1.6 Hz，H-4），7.93 （1H，s，H-2），7.42（1H，dd，J＝6.3，1.4 Hz，H-7），7.17（2H，m，H-5，H-6）；13C-NMR（100 MHz，MeOD） δ：133.6（C-2），109.1（C-3），122.3（C-4），122.6 （C-5），123.8 （C-6），113.1 （C-7），138.5 （C-8），127.8（C-9），169.5（C-10）。 以上数据与文献报道基本一致［18］，故鉴定化合物 5为 1H-indole-3-carboxylic acid。

2.2.6 化合物6 黄色晶体（甲醇），1H NMR（400 MHz，MeOD） δ：7.96（1H，d，J＝5.9 Hz，H-2），6.32（1H，d，J＝2.1 Hz，H-8），6.19（1H，d，J＝2.1 Hz，H-6），6.18（1H，d，J＝6.0 Hz，H-3），13C-NMR（100 MHz，MeOD）δ：183.6（C-4），166.4（C-7），163.7（C-5），160.2（C-9），158.3（C-2），111.9（C-3），106.8（C-10），100.6（C-6），95.4（C-8）。 以上数据与文献报道基本一致［19］，故鉴定化合物 6 为 5，7-dihydroxychromone。

2.2.7 化合物7 白色片状结晶（氯仿），1H NMR（400 MHz，CDCl3） δ：2.35（2H，t，J＝7.4 Hz，CH2-2），1.63（2H，m，CH2-3），1.26～1.30（26 H，brs，CH2×13），0.88（3H，t，J＝6.7 Hz，CH3-17）。 以上数据与文献报道基本一致［20］，故鉴定化合物7为正十七酸。

3 讨论

本课题所分离鉴定的7个化合物均为首次从凹叶 厚 朴 叶 中 分 离 得 到 ，其 中 莨 菪 亭［21］、槲 皮 素［22－23］等具有抗癌、抗炎等药理活性。我省厚朴种植面积约10万亩，其中光泽县约有5万亩。厚朴叶为厚朴植物的每年落叶，其资源十分丰富，研究凹叶厚朴叶的化学成分，为其资源综合开发利用提供依据。