吉林省临江市朝鲜淫羊藿中淫羊藿苷积累规律研究

邱野1,刘知源1,江歆美1,李杨1,赵君强1,胡全德2,李宜平1*

(1.长春中医药大学，长春 130117;2.吉林农业大学，长春 130118)

摘要：目的研究朝鲜淫羊藿主要有效成分淫羊藿苷的积累规律，为其合理采收种提供依据。方法在同一地点，采集朝鲜淫羊藿不同生长时间的叶，测定其中淫羊藿苷的含量。结果进入秋季朝鲜淫羊藿中淫羊藿苷积累速度加快,9月中旬左右达最高。结论进入秋季，朝鲜淫羊藿叶中淫羊藿苷积累速度加快，在农历的白露前后，朝淫羊藿苷的含量达到最高,因此鲜淫羊藿的最佳采收期应在9月中旬。

关键词：淫羊藿；淫羊藿苷；临江市

DOI:10.13463/j.cnki.jlzyy.2015.05.021

中图分类号：R282文献标志码： A

文章编号：1003-5699(2015)05-0502-03

基金项目:中医药行业科研专项“我国代表性区域特色中药资源保护利用”(201207002)；吉林省代表区域中药资源保护利用(201007002-05)；国家级大学生创新创业训练计划项目(201310199034)。

作者简介:邱野(1989-)，男，硕士研究生，主要从事中药资源及开发利用的研究。

收稿日期:(责任编辑：张瑞彬2015-03-10)

*通信作者:李宜平，电话-(0431)86172201，电子信箱-czdliyiping@163.com

Accumulation of Icariin in Epimedium koreanum Nakai in Linjiang from Jilin Province

QIU Ye1,LIU Zhiyuan1,JIANG Xinmei1,LI Yang1,ZHAO Junqiang1,HU Quande2,LI Yiping1*

(1.Changchun University of Chinese Medicine,Changchun 130117,China;

2.Jilin Agriculture University,Changchun 130118,China)

Abstract:ObjectiveTo provide basis for harvesting by studying the accumulation regularity of icariin in Epimedium koreanum Nakai.MethodsTo collect on a same piece of land,accumulate leaves of Epimedium koreanum Nakai at different times of its growing process for determination of icariin content.ResultsThe accumulative process of icariin accelerates in autumn,during which the content of icariin reaches the highest level in mid-September.Conclusion The best harvest time of Epimedium koreanum Nakai is mid-September.

Keywords:Epimedium koreanum Nakai;Icariin;Linjiang

朝鲜淫羊藿(EpimediumkoreanumNakai)为多年生宿根草本植物，植株纤细、根系浅，分布天然杂木林下，以柞木下分布较多，是淫羊藿药材的主要来源[1-2]。我省长白山区朝鲜淫羊藿分布较广、资源丰富，目前基本靠野生资源供药用，尚无人工栽培[3]。近年来由于不合理采收，临江市朝鲜淫羊藿遭到破坏，资源量急剧下降,目前的年收购量较前10年减少了60%以上;由于采收期不合理造成药材质量下降严重[4-5]。通过对朝鲜淫羊藿不同生长期叶中的淫羊藿苷含量进行比较研究，寻找淫羊藿药材有效成分积累的规律，确定朝鲜淫羊藿的最佳采收期，为市场提供优质药材。

1实验材料

1.1材料采自吉林省临江市吊打水库附近杂木林下，东经：126°56′37.1″；北纬：41°54′26.1″；海拔629.1 m，周边1 km2范围内，经吉林农业大学胡全德教授鉴定为EpimediumkoreanumNakai。分别于2013年5月3日、2013年6月7日，2013年7月13日、2013年8月20日、2013年9月2日、2013年9月15日、2013年9月21日、2013年10月6日采集地上部分，阴干，取叶，作为含量测定用样品。

1.2仪器美国安捷伦公司的高效液相色谱仪，UV IS-201紫外检测器,Column Heater Model 631柱温箱，HPLC Pump Model 626泵，紫外分光光度计(上海精密科学仪器有限公司),KQ-250DB、KQ-500DE型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)，万分之一天平(常熟市衡器厂)等。

1.3试剂乙腈(进口，色谱纯)，纯水，乙醇(分析纯)，甲醇(色谱纯)，淫羊藿苷标准品(中国药品生物制品检定所，批号110737-200413)。

2方法与结果

2.1色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(30∶70)为流动相；检测波长为270 nm。理论板数按淫羊藿苷峰计算应不低于1 500。

2.2对照品溶液的制备取淫羊藿苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含0.1 mg的溶液，即得。

2.3供试品溶液的制备取本品粉末(过三号筛)约0.2 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇20 mL，称定重量，超声处理1 h，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.4测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μL，注入液相色谱仪，测定，即得。本品按干燥品计算,含淫羊藿苷(C33H40O15)不得少于0.50%。

2.5淫羊藿苷含量测定结果在上述色谱条件下，分别进样测定淫羊藿药材中淫羊藿苷的含量，进样量20 μL。结果见表1，色谱图见图1～图2。

表1　不同采集时间朝鲜淫羊藿叶中淫羊藿甘含量

2.6方法学考察

2.6.1线性关系的考察分别精密吸取淫羊藿苷标准品溶液1、2、4、6、8、10 μL，注入液相色谱仪中，按上述色谱条件测定色谱峰面积，测定结果以进样量为横坐标，色谱峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。回归方程为：Y=105 6.5X+7.847 8,R2=0.999 7。表明在0.1～1.0 mg/mL范围内呈良好的线性关系。

2.6.2精密度试验精密吸取淫羊藿苷对照品溶液(0.10 mg/mL)10 mL，重复进样6次，测定淫羊藿苷峰面积，得其RSD为0.36%。

图1　对照品溶液色谱图

图2　供试品溶液色谱图

2.6.3稳定性试验取淫羊藿供试品溶液进样10 μL，每隔2 h测定1次，结果表明样品在8 h内稳定，样品淫羊藿苷峰面积的RSD为0.10%(n=6)。

2.6.4重复性试验取淫羊藿样品，平行6次取样，制备供试品溶液，进样测定，结果淫羊藿苷峰面积的RSD为0.94%(n=6)。

2.6.5回收率实验采取加样回收法。取淫羊藿样品约0.2 g，精密加入淫羊藿苷对照品溶液(0.50 mg/mL)10 mL，制备供试品溶液，按上述色谱条件测定，计算回收率，结果平均回收率为98.54%，RSD为0.13%(n=6)。

3小结

不同采收期朝鲜淫羊藿叶中的淫羊藿苷的含量差异较大。进入秋季，朝鲜淫羊藿叶中淫羊藿苷积累速度加快，9月21日淫羊藿苷的含量达到最高,此时在农历的白露前后，与当地民间淫羊藿应在白露时采摘的说法相符。9月末已有初霜，朝鲜淫羊藿地上部分逐步枯萎,其中淫羊藿苷可能由于发生了水解(酶解)作用导致其含量下降[6]。因此,以中国药典规定的淫羊藿苷含量为指标，在当地， 朝鲜淫羊藿的最佳采收期为9月中旬。

参考文献：

[1]国家药典委员会.中国药典:1部[M].北京:中国医药科技出版社,2010.

[2]江苏新医学院.中药大辞典[M].上海:上海人民出版社,1977:1650.

[3]国脚药典编委会.中国药典:1部[M].北京:化学工业出版社,2000.

[4]刘桂荣,朝鲜淫羊藿的研究进展[J].特产研究,1998(3):57-60.

[5]童一中.作物育种常用统计分析方法[M].上海:上海科学技术出版社,1979.

[6]李建东.吉林植物[M].长春:吉林科学技术出版社,2001.