新鱼腥草素钠眼用即型凝胶的制备与药效学研究

何泰东 刘志承 郭 彬

（广州中医药大学附属深圳市中医院药学部，深圳518033）

新鱼腥草素钠眼用即型凝胶的制备与药效学研究

何泰东 刘志承 郭 彬

（广州中医药大学附属深圳市中医院药学部，深圳518033）

目的 研究新鱼腥草素钠眼用即型凝胶（NSHFEG）对三种质控菌混合感染角膜炎的药效学。方法以泊洛沙姆407、泊洛沙姆188和羟丙甲基纤维素为混合基质，采用冷溶法制备凝胶；用金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和大肠杆菌以注射法制成模型家兔角膜炎，再用NSHFEG药物治疗，以新鱼腥草素钠滴眼液（NSHED）、氧氟沙星滴眼液和注射用水作对照进行治疗观察。结果NSHFEG高剂量组疗效最佳，其治愈率和病原体转阴率分别为93.22%和90.00%；中剂量组与氧氟沙星组相仿；低剂量组与NSHED相当，P＞0.05。NSHFEG对家兔模型角膜炎的疗效比NSHED提高3～5倍。结论NSHFEG对混合感染兔眼药效学试验疗效明显，可供临床治疗使用。

新鱼腥草素钠；眼用即型凝胶；泊洛沙姆407与188；造模角膜炎；药效学研究

清凉解毒中草药鱼腥草对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌等多种常见病菌有一定的抗菌作用［1］，现代科学提取（合成）单体新鱼腥草素钠亦在眼科感染研究应用［2］，为了提高临床疗效，笔者采用热敏材料泊洛沙姆（P407和P188）及粘性材料羟丙甲基纤维素（HPMC）配制新鱼腥草素钠眼用即型凝胶（New sodium Houttuynine in situ forming eye gel，NSHFEG），并对60只家兔三种质控菌混合感染角膜炎结膜炎进行药效学研究试验，结果令人满意。现在简要报道如下。

1 材料

1.1 试药与试剂新鱼腥草素钠原料（江苏亚邦药物研究有限公司，批号：120502，含量：98.5%），泊洛沙姆407（P407）、泊洛沙姆188（P188）（德国BASF公司），羟丙甲基纤维素（HPMC）、尼泊金乙酯（广州化学试剂有限公司），新鱼腥草素钠眼用即型凝胶（NSHFEG，研究品，批号：120801），新鱼腥草素钠滴眼液（NSHED，自制对照品，批号：120802），氧氟沙星滴眼液（OED，广州东康制药厂，批号：120603）。

1.2 实验用动物与病原菌健康新西兰大白兔，♀♂兼用，2.5～3.2kg，共60只（广东省医用试验动物场提供，粤证：12-028）；金黄色葡萄球菌（ACTT25923）浓度2.5×109CFU·ml-1，绿脓杆菌（ACTT27853）浓度1 ×106CFU·ml-1，大肠杆菌（ACTT25922）浓度1.8× 109CFU·ml-1，均为广东省药品检验所提供的质控菌株。

2 方法与结果

2.1 样品的制备

2.1.1 处方新鱼腥草素钠1.0g，P407 200g、P188 20g，HPMC 20g，尼泊金乙酯0.5g，用注射用水配制成1000ml。

2.1.2 制备称取处方量的P407、P188和HPMC依次分散在上述溶液中，搅溶，置4℃冷藏溶胀24h（过夜）得澄明液，另称取1.0g新鱼腥草素钠加入溶解，搅匀，过0.5μ微孔滤膜，调PH6.5左右，加注射用水成1000ml，搅匀，分装即得新鱼腥草素钠眼用即型凝胶（NSHFEG），本品室温下为微黄白色澄明液，当滴眼达34.5℃时，即由液状转变成凝胶状，故日眼用即型凝胶，黏附在眼角膜和眼结膜上。批号：120801。

另取新鱼腥草素钠原料1.0g，用注射用水配制成1000ml，p H6.5左右即为0.1%新鱼腥草素钠滴眼液（NSHED）［2］。批号：120802。

2.2 对家兔眼细菌性混合感染的药效学试验［1］

2.2.1 动物模型的建立用兔座铗固定家兔，以0.6%丁卡因2～3滴滴眼，待其失去知觉后，用1ml注射器抽取0.2ml含混合菌培养液（含金黄色葡萄球菌2.5× 108CFU、绿脓杆菌1×105CFU和大肠杆菌1.8× 108CFU）自眼角膜近中心部位注入角膜实质层内，连续2d（即2次），使造成直径约2～3mm的白色菌斑，经取眼分泌物细菌培养检查起码要有2种细菌培养为阳性，模型家兔随机分为六组，每组10只，分别放入单笼饲养治疗。

2.2.2 动物分组试验与给药方法模型家兔60只，每组10只，分为NSHFEG高、中、低剂量组（高剂量组指6次／d，1～2滴／次；中剂量组指4次／d，1～2滴／次；低剂量组指2次／d，1～2滴／次）。另设两组阳性对照组，即新鱼腥草素钠滴眼液组8次／d，1～2滴／次；氧氟沙星滴眼液组8次／d，1～2滴／次，及空白对照组，给注射用水8次／d，1～2滴／次。以造模后12h开始用药，为期5d，每天进行相关观测工作。天天取眼分泌液作细菌培养，检查分离、鉴别，并记录对比。

2.2.3 观察指标①病原体转阴率：给药前及给药后第5d（直到第7d）取家兔治疗眼分泌物进行涂片及培养分离鉴定，连续2次鉴定病原体均为阴性定为转阴，并计算转阴率（细菌清除率）（表1）；②家兔眼部病变治愈程度（肉眼观察）：借助眼科反光镜从第3d检查家兔眼球结膜、角膜、眼睑等是否充血、水肿、出血等。于停药后第2d将家兔活杀、解剖取眼球标本进行肉眼观察。眼球炎症标本按充血、水肿、出血3项基本指标进行评分。0分（正常）——无充血、无水肿、无出血；1分（轻度）——眼球结膜、角膜及眼睑尚平滑、轻度充血；2分（中度）——眼球结膜或角膜眼睑稍平滑，中度充血，可见点状出血点；3分（重度）——眼球结膜、角膜、眼睑光滑，重度充血，可见大量出血点，组织重度水种。各组检查记分后，再计算治愈率，见表2。

2.3 结果

2.3.1 家兔眼角膜混合感染病原体转阴率见表1。

表1 NSHFEG与三个对照组兔眼混合感染病原体转阴率比较（n，%）

2.3.2 家兔眼部病变治愈程度见表2。

表2 NSHFEG与三个对照组治疗兔眼造模角膜炎治愈率比较

3 讨论

家兔眼造模角膜炎选用角膜内实质层注射法［2］菌斑可达2～3mm甚至更大，造模成功率高，笔者达96%以上，这比角膜环钻法和角膜划痕法及菌液直点法先进且易操作。

造模角膜炎经NSHFEG三剂量，NSHED和氧氟沙星阳性对照品及注射用水空白对照依法治疗后，从表1病原体转阴率比较看：NSHFEG高剂量对三种致病菌混合感染的消除（转阴）率最佳达90.00%（54／60）；中剂量组与氧氟沙星组相当分别为74.14%（43／58）和72.88%（43／59），P＞0.05；低剂量与NSHED相当分别为66.10%（39／59）和67.24%（39／58），P＞0.05。但NSHFEG和NSHED对绿脓杆菌的清除率均最差，这表明新鱼腥草素钠对G＋菌作用较强，对G-菌尤其绿脓杆菌的作用较差。从表2治疗兔眼造模角膜炎治愈率比较看：NSHFEG高剂量最佳，其治愈率为93.22%，其中剂量组与氧氟沙星相当，分别为84.75%和86.44%，P＞0.05，其低剂量组则与NSHED组几乎同效分别为81.36%和79.66%，P＞0.05。看来，NSHFEG的疗效比NSHED可提高3～5倍，这与文献报导［3］接近。

德国研制的泊洛沙姆是一类由聚氧乙烯（PEO）和聚氧丙烯（PPO）组成的PEO-PPO-PEO型三嵌的共聚体。其中，泊洛沙姆407（P407）在一定浓度下具有低温时为液状，温度升高时会转变成凝胶的特性［4］，泊洛沙姆188（P188）的特性与P407相反，两者合用具有调节作用。吴明钗等［5］以15.5%泊洛沙姆407为基质制备凝胶；笔者以20%泊洛沙姆407和2%P188及PHMC为混合基质制备凝胶，其胶凝温度分别32℃和30.5℃，但两者以液态滴眼，达34.5℃时均转变成凝胶粘附在眼角膜、结膜和眼睑上，形成长效缓释制剂比滴眼液缓释作用可长达4倍以上，因为药物的作用包括凝胶的溶蚀和扩散吸收两个过程［6］，其药效可与静脉注射和皮下注射用药相比。

［1］郭彬，刘志承，魏俊婷，等．鱼腥草热敏凝胶滴眼液的药效学研究［J］．中国医药导报，2008，5（19）：32-33．

［2］陈效，徐永红，王章元．新鱼腥草素钠滴眼对家兔细菌性角膜炎的影响［J］．中国医院药学杂志，2006，26（7）：820-823．

［3］Dumortier G，Grossiord JL，Agnely F，et al．A review of poloxamer 407 pharmaceutical and pharmacological characteristics［J］．Pharm Res，2006，23（12）：2709-28．

［4］金璐燕，李娟．泊洛沙姆407在制剂中的应用进展［J］．药学与临床研究，2009，17（3）：231-234．

［5］吴明钗，陈镇国，林洁．氟康唑莫西沙星眼用即型凝胶的制备及质量控制［J］．中国药房，2012，23（17）：1602-1604．

［6］郝吉福，李学桐，张翠玲，等．氯霉素眼用温敏原位凝胶的制备及其兔眼刺激性研究［J］．中国药房，2011，22（21）：1979-1981．

10个穴位可用于急症（二）

头痛：头痛发作时，可用双手食指分别按压头部双侧太阳穴（位于眉梢与外眼角中间向后1寸凹陷处），压至有胀痛感并按顺时针方向旋转1分钟，头痛便可减轻。

胃痛：胃痛时，用双手拇指按揉双腿足三里穴（位于膝盖下3寸，胫骨外侧1横指处），待有酸麻胀感后坚持3～5分钟，胃痛便可明显减轻。

心绞痛：心绞痛发作时常常伴有胸部压迫感、窒息感等。此时可按压至阳穴（位于第7胸椎棘突下凹陷处），一般按压3～6分钟，心绞痛即可得到有效缓解。

胆绞痛：胆囊炎、胆结石发作时，右上腹可发生剧烈绞痛。这时可用大拇指持续按摩右小腿的阳陵泉穴（位于膝盖斜下方，小腿外侧之腓骨小头稍前凹陷处）2分钟，即可获得良好的止痛效果。

肾绞痛：肾绞痛发作时，可用大拇指按揉三阴交穴（位于足内踝尖上3寸，胫骨内侧缘后方），反复按摩3～5分钟，肾绞痛便可得到缓解。

——国家中医药管理局网站

10.3969／j.issn.1672-2779.2013.23.118

：1672-2779（2013）-23-0162-02

苏 玲

2013-10-28）