李松宾 李 红
（河南省商丘市食品药品检验所，商丘476000）
HPLC法测定芩斛利咽合剂中黄芩苷的含量
李松宾 李 红
（河南省商丘市食品药品检验所，商丘476000）
目的建立芩斛利咽合剂中黄芩苷的HPLC含量测定方法。方法采用ODS-C18色谱柱5μm（4.6×250mm），流动相：甲醇-水-磷酸（47∶53∶0.2）；流速：1.0ml·min-1；检测波长280nm。结果黄芩苷在0.02638～0.1319μg范围内线性关系良好（r＝0.9999），平均加样回收率为98.38%，RSD＝1.39%（n＝6）。结论本方法简便快速、结果准确，可较好地控制该制剂的质量。
芩斛利咽合剂；黄芩苷；高效液相色谱法
芩斛利咽合剂是经过多年临床经验证明，质量稳定，疗效可靠的医院制剂，由黄芩，石斛，麦冬，地黄，赤芍等12味中药材加工制成。黄芩苷为黄芩的主要有效成分，黄芩苷具有清热燥湿，泻火解毒，止血，安胎。用于湿温、暑湿，胸闷呕恶，湿热痞满，泻痢，黄疸，肺热咳嗽，高热烦渴，血热吐衄，痈肿疮毒，胎动不安的作用，对芩斛利咽合剂疗效的发挥起重要作用。国内现行的质量标准中未收载含量测定项目，为了有效地控制制剂质量，本文采用HPLC测定了黄芩中黄芩苷的含量，可较好地控制该制剂的质量。现报道如下。
1 仪器与试药
1.1仪器AUW-220D电子分析天平Agilent 1200高效液相色谱仪。
1.2试药黄芩苷对照品（批号：110715-201016，来源：中国药品生物制品检定所）；水纯化水，甲醇为色谱纯，磷酸为分析纯。芩斛利咽合剂（样品由柘城县人民医院提供，批号120615、121225、130516）。
2 方法与结果
2.1色谱条件色谱柱：ODS-C18色谱柱5μm（4.6× 250mm），甲醇-水-磷酸（47∶53∶0.2）为流动相；检测波长280nm；流速1.0ml·min-1；进样量10μl。理论板数按黄芩苷峰计算不低于2500［1］。
2.2对照品制备取在60℃减压干燥4小时的黄芩苷对照品13.19mg，至容量瓶中，加甲醇适量溶解并稀释至刻度。精密量取5ml对照溶液至50ml容量瓶中，加甲醇至刻度，作为对照品溶液。
2.3供试品溶液的制备取本品5ml，精密称定，加70%乙醇40ml，加热回流3小时，放冷，滤过，滤液置100ml量瓶中，用少量70%乙醇分次洗涤容器和残渣，洗液滤入同一量瓶中，加70%乙醇至刻度，摇匀。精密量取1ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。
2.4线性关系考察取黄芩苷对照品溶液，按照“2.1”项色谱条件，分别进样2、4、6、8、10μl，记录黄芩苷峰面积值，以峰面积（A）为纵坐标，以对照品进样量（C）为横坐标进行线性回归，得回归方程：Y＝43.842X＋1.0371 r＝0.9999。结果显示，在0.02638～0.1319μg范围内黄芩苷进样量与峰面积值呈良好的线性关系。
2.5干扰试验取不含黄芩的阴性样品（自制）约5ml，照供试品溶液制备方法制备，注入液相色谱仪，进样量10μl，阴性对照液对测定无干扰，结果见图1。
图1 高效液相色谱图
2.6精密度试验取同一浓度的对照品溶液（13.19μg／ml），重复进样6次，每次10μl，测定黄芩苷峰面积，RSD＝0.34%（n＝6），表明仪器精密度良好。
2.7稳定性试验取同一浓度供试品溶液，分别在0、2、4、8、12h进样测定，结果黄芩苷峰面积RSD＝0.74%，显示供试品溶液在12小时内稳定。
2.8加样回收率试验称取已知含量为2.232mg／ml的样品6份，每份1ml，精密量取，分别精密加入对照品储备液13.19μg／ml的溶液10ml，按照供试品溶液制备方法制备，按照“2.1”项色谱条件，分别测定，结果见表1。
表1 加样回收率试验结果
2.9含量测定取3批样品，按制备供试品溶液制备方法制备样品溶液，按照“2.1”项色谱条件测定，按外标法计算黄芩苷的含量，结果见表2。
表2 3批样品中黄芩苷的含量
3 讨论
本法测定结果准确，精密度高，线性关系、重复性好，空白无干扰，可作为芩斛利咽合剂质量标准含量测定方法。
［1］国家药典委员会．中国药典［S］．2010年版一部．北京：中国医药科技出版社，2010．
Determination of Baicalin in Qinhu Liyan Mixture by HPLC
Li Songbin Li hong
（Shangqiu Institute for food and drug control,Shandong provicine,Shangqiu,476000,China）
ObjectiveTo establish a HPLC method for determination of Baicalin in Qinhu Liyan Mixture．MethodsUsing ODS C18chromatographic column 5μm（4．6×250mm），using Methanol－water－phosphoric acid（47∶53∶0.2）as mobile phase．The content was detected at a waveleng of 280nm，the flow rate was 1.0ml·min-1．ResultsThe Baicalin have a good linear relationship in the range of 0.02638～0.1319μg（r＝9999），the average recovery was 98.38%，RSD＝1.39%（n＝6）．ConclusionThe established method is accuracy，sensitive and simple．It can be used for quality control of Qinhu Liyan Mixture．
Qinhu Liyan Mixture；Baicalin；HPLC
10.3969／j.issn.1672-2779.2014.06.095
：1672-2779（2014）-06-0150-02
苏 玲 本文校对：王伟丽
2013-12-20）
