4种工艺制备芦荟凝胶中芦荟多糖的含量比较※

唐建红　刘川玉　何　洁

（1广西省桂林医学院第二附属医院药学部，桂林　541199；2广西省桂林医学院附属医院药学部，桂林　541001）



4种工艺制备芦荟凝胶中芦荟多糖的含量比较※

唐建红1刘川玉2*何洁2

（1广西省桂林医学院第二附属医院药学部，桂林541199；2广西省桂林医学院附属医院药学部，桂林541001）

摘要：目的测定比较四种工艺制备的芦荟凝胶中芦荟多糖的含量。方法以D-甘露糖作为对照品，采用紫外分光光度法在610 nm处测吸光度，测定比较鲜榨汁法、冷榨汁法、超声提取法及酶提取法等4种方法所得芦荟凝胶的芦荟多糖。

结果甘露糖在0.05～0.60 g·L- 1范围内与吸光度呈良好的线性关系(r=0.9985)，测得四种工艺制备的芦荟凝胶中芦荟多糖的含量分别为鲜榨汁法2.202 mg·g- 1、冷榨汁法1.604 mg·g- 1、超声提取法2.000 mg·g- 1及酶提取法2.150 mg·g- 1。结论不同制备工艺所得芦荟凝胶中芦荟多糖的含量有所不同，其中以鲜榨汁法所得的芦荟多糖含量为最高。研究为芦荟凝胶的制备工艺筛选提供了科学依据。

关键词：芦荟凝胶；芦荟多糖；含量

芦荟为百合科多年生常绿草本植物，目前分布于世界的芦荟属植物多达500余种，但可供药用的只有十几种，其中以库拉索芦荟、好望角芦荟及斑纹芦荟最为常用。芦荟集医药、食用、美容和观赏于一体，含有多种药理成分，具有保护神经、调节机体免疫力[1]、防辐射、抗癌、抗病毒、抑菌杀菌、抗炎抗过敏、促进伤口愈合、减少瘢痕形成等作用[2、3]，在民间具有“百药箱”之称，直接取其原植物入药，不利于临床推广应用。芦荟凝胶是由新鲜芦荟叶肉加工制备而成，既便于临床应用又保持了芦荟原植物的特效。芦荟多糖是芦荟凝胶中主要有效成份之一[4]，具有抗菌、消炎、生肌、促进伤口愈合及组织修复、减少疤痕形成及增强免疫力等多种药理作用[5]。芦荟多糖的含量是芦荟凝胶质量确定的重要指标之一。本研究通过采用醇沉方法提取其中芦荟多糖，用蒽酮-浓硫酸紫外分光光度法测定比较鲜榨汁法、冷榨汁法、超声提取法及酶提取法等4种方法制备芦荟凝胶的芦荟多糖含量，旨在为芦荟凝胶最佳制备方法的筛选提供科学依据。

1　材料与仪器

1.1试剂75%乙醇，无水乙醇（分析纯，批号：1304272），98%浓硫酸（分析纯，批号：1102111），蒽酮（国药集团化学试剂有限公司，批号：20130426），D-甘露糖标准品（中国药品生物制品检验所，批号：140651－200602），果胶酶（上海蓝季科技发展有限公司，批号：131105）。

1.2药材芦荟凝胶库拉索芦荟，品种来源于桂林医学院药用植物园。

1.3仪器旋转蒸发仪RE-52AA（上海亚荣生化仪器厂）；DZF-250真空干燥器（郑州长城科工贸有限公司）；B2500S-M7超声波清洗器（必能信超声有限公司产品）；HANGPING FA2004电子天平（上海精科天平仪器厂）；SHZ-Ⅲ循环水真空泵（上海亚荣生化仪器厂）；YOKO-SY紫外线分析仪（武汉药科新技术开发公司）等。

2　方法与结果

2.1芦荟凝胶的制备取新鲜芦荟叶适量，洁净消毒处理，分成四等份，分别采用鲜榨汁法、冷榨汁法、超声提取法及酶提取法等4种方法制备芦荟凝胶，分别将所得芦荟凝胶于80℃水浴30 min，加入活性炭脱色，减压抽滤。取滤液置于旋转蒸发仪中浓缩至一定体积，并按0.2~0.5%的量加入一定量的亚硫酸钠防止其氧化。

2.2芦荟多糖曲线的绘制D-甘露糖标准溶液的配置：精确称取D-甘露糖标准品25 mg于25 ml容量瓶中，加蒸馏水溶解定容，得1 g·L-1甘露糖标准液。

蒽酮试剂的制备：将98%浓硫酸缓缓加入蒸馏水中，配置成80%的浓硫酸溶液100 ml，准确称取蒽酮0.2 g加入，冷却至室温后贮存于棕色瓶内，于4°C冰箱保存。

甘露糖标准曲线的绘制：分别准确移取甘露糖标准贮备液0.5、1.0、1.5、2.0、4.0、6.0 ml，各置于10 ml容量瓶中，加入蒸馏水定容。分别取上述溶液1.0 ml及甘露糖标准贮备液1.0 ml置于10 ml具塞试管中，准确加入0.2%蒽酮试液2.0 ml，摇匀，水浴加热反应10 min，放冷，以空白试剂为参比，在610 nm处测吸光度。以甘露糖的浓度C为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程为：y=6.1147x+0.0206 (r= 0.9985，n=6)，甘露糖在0.05～0.60 g·L-1范围内与吸光度呈良好的线性关系。

2.3供试品溶液的制备分别取上述四种制备方法所制备的芦荟凝胶10 g，用3倍量蒸馏水于70℃水浴静置溶解30 min，真空抽滤，滤液分别用75%乙醇配成料液比1∶6的芦荟凝胶-乙醇溶液，静置1 h后，过滤并用适量无水乙醇洗涤3次，得芦荟粗多糖（4个品种）。用适量蒸馏水20~30 ml于70℃水浴溶解粗多糖，放冷至室温，定容于50 ml容量瓶中，取粗多糖水溶液2 ml定容于10 ml容量瓶，摇匀，得各种芦荟多糖供试品溶液。

2.4精密度试验精密量取1 g·L-1甘露糖对照品溶液0.5 ml于具塞管中，加入0.2%蒽酮-浓硫酸液2 ml，煮沸10 min，连续6次于610 nm处测吸光度，测得甘露糖吸光度的平均值为0.601，RSD为0.557%。

2.5重复性试验精密量取“2.2”项中鲜榨汁法芦荟多糖溶液5份，分别于具塞管中，加入0.2%蒽酮－浓硫酸液煮沸10 min，于610 nm处测吸光度，结果显示实验重现性良好。索芦荟多糖吸光度的平均值为0.696，RSD为0.388%。

2.6稳定性试验精密量取“2.2”中鲜榨汁法芦荟多糖样品溶液0.5 ml，分别于1、2、3、4、5 h后测定吸光度，测得芦荟多糖的RSD为0.411%，表明供试品溶液在5 h内稳定。

2.7加样回收率试验精密量取鲜榨汁法芦荟多糖溶液2.5 ml，与1.0 g·L-1甘露糖标准液2.5 ml置于25 ml容量瓶中，混匀，用蒸馏水稀释至刻度，用移液枪精取该液1 ml于具塞管，加入4.0 ml 0.2%蒽酮－浓硫酸液煮沸10 min，于610 nm处测吸光度，得出含量，计算回收率。结果见表1。

表1　芦荟多糖回收率测定结果

2.8样品含量的测定比较精密称取“2.2”项中各种制备方法所制备的芦荟多糖供试品溶液，按照“2.1”项中方法操作，测出吸光度，根据所做的标准曲线，求出浓度，再通过稀释倍数计算芦荟凝胶中芦荟多糖含量。得出测定结果见表2。

表2　4种方法制备芦荟凝胶中芦荟多糖含量的比较　(n=200)

3　讨论

芦荟凝胶是以新鲜芦荟叶肉加工制备而成，既可以保持芦荟原植物的特殊药效，又便于芦荟在临床上推广应用。芦荟多糖是芦荟的主要活性成份，可作为芦荟凝胶的质量控制指标之一，本研究通过测定四种不同方法制备芦荟凝胶中的芦荟多糖，为筛选芦荟凝胶的最佳制备方法提供实验数据。研究结果显示，在鲜榨汁法、冷榨汁法、超声提取法及酶提取法等4种方法制备的芦荟凝胶中，以鲜榨汁法所得芦荟凝胶中芦荟多糖含量为最高。由于鲜榨汁法是直接选取新鲜芦荟叶肉而成，在不破坏芦荟原植物分子结构的前提下，最大程度地保留了芦荟多糖分子的生物活性。四种制备方法中鲜榨汁法制备芦荟凝胶工艺简单易行，耗时短，保留芦荟多糖的含量高，因此以芦荟多糖为工艺参数，鲜榨汁法可作为芦荟凝胶制备的最佳工艺选择。

参考文献

[1]王月华，曹立莉.杜冠华.芦荟提取物有效成分对神经细胞和脑线粒体的保护作用[J].中国中药杂志，2010，35（3）：364-368.

[2]傅继华，温涛，徐琛，等.芦荟多糖对动物实验性胃溃疡的影响[J].中草药，2006，37（6）：894-897.

[3]唐建红，刘川玉，何洁，等.芦荟凝胶对大鼠Ⅱ度烫伤创面愈合的影响[J].中国实验方剂学杂志，2010，16（10）：156-158.

[4]孙培.芦荟的药理作用研究进展[J].湖北中医杂志，2012，34（4）：79-81.

[5]赵芯芝，甄丹丹，甄汉深，等.中药芦荟研究进展[J].亚太传统医药，2015，11(6)：45-47．

Content Comparison of Aloe Polysaccharide in Aloe Vera Gel by Four Kinds of Preparation Technology

TANG Jianhong1, LIU Chuanyu2, HE Jie2
(1. Department of Pharmacy, The Second Affiliated Hospital of Guilin Medical University, Guangxi Province, Guilin 541199, China ;
2. Department of Pharmacy, The Affiliated Hospital of Guilin Medical University, Guangxi Province, Guilin 541001, China)

Abstract:Objective To determine the content of Aloe polysaccharide in Aloe vera gel by four kinds of preparation technology. Methods Using carubinose as reference substance, we measured and compared polysaccharide content with the method of UV spectrophotometry at 610 nm absorbance. To determine the content of Aloe polysaccharide in Aloe vera gel by fresh juice, cold juice, ultrasonic extraction and enzyme extraction four kinds of methods. Results Mannose had good linear relationship within the scope of 0.05 to 0.60 (r= 0.9985) . Four kinds of preparation of aloe polysaccharide content in the aloe vera gel is fresh juicing method respectively 2.202 mg·g-1. Cold juicing method is 1.604 mg·g-1. The ultrasonic extraction method of 2.000 mg·g-1and enzymatic extraction method is 2.150 mg·g-1. Conclusion The content of polysaccharide in four kinds of preparation of aloe polysaccharide content in the aloe vera gel was differing. The fresh juicing method was the highest. This study provided scientific basis for the selection of preparation technology of Aloe vera gel.

Keywords:Aloe vera gel; Aloe polysaccharide; content

收稿日期：（本文编辑：苏玲本文校对：童禾锡2015-10-07）

*通讯作者：1046728261@qq.com

基金项目：※广西卫生厅中医药科技专项课题（No：GZYZ1129）；广西卫生厅科技计划课题（No：Z2011166）；广西科学研究与技术开发计划项目（No：桂科攻1355004- 8）；广西教育厅科技项目（No：2013LX073）；广西省桂林市科学研究与技术开发计划项目（No：20110322）

doi:10.3969/j.issn.1672-2779.2016.01.073

文章编号：1672-2779（2016）-01-0139-02