张培 夏永祥

临床的细菌学检验是对患者的各种标本物来进行检验,能够作为临床诊断与治疗的客观依据。在进行检验的整个过程中,既包括了对患者样品进行初步采集与处理运送,也包括对样品进行分离培养与试验鉴定,最终会出具相应的检验报告[1]。检验结果受到影响的因素有很多,主要包括采集标本的方法时机、标本的保存运送、标本的培养分离以及标本的技术鉴定等方面。

1 对血液标本进行检验的质量控制措施

致病菌侵入到患者血液后,快速繁殖并超出患者免疫系统所具有的清除能力时,则形成了菌血症。患者通常出现有下列体征后,即可作为对其采血的指征:寒战高热、皮肤黏膜出血、白细胞增多、呼吸加快以及C反应蛋白的升高。包括血液病患者能够出现血小板减少、粒细胞减少等指征,或者同时具备有上述几种临床指征[2]。一部分医生对患者发热的规律不进行分析,对抗生素应用情况也不详细询问,仅仅凭一份血常规检查,就笼统地对患者作出诊断,而这样的结果往往会出现细菌培养呈阴性。其正确的作法为,24 h内经不同部位对患者进行3次采血检查,间隔时间每次不能少于30 min;在必要时需要第2天再对患者进行二次血培养。患者如果已经应用了抗生素,则需要应用含活性炭或者树脂的培养管进行采样。患者的血标本在原则上应该遵循应用抗菌药物之前采血。细菌培养的阳性率与对患者进行采样的部位与频率都有密切的关系。对患者进行多部位采样并且增加对其采样的频率,能够提高临床培养的阳性率。

2 对尿液标本进行检验的质量控制措施

患者在发生有泌尿系的感染后,首先应对其进行尿培养。指征为:第一,患者有典型的泌尿系感染症状。第二,患者出现肉眼血尿以及脓尿。第三,患者的尿常规提示亚硝酸盐或者白细胞呈阳性[3]。由于患者的尿道下三分之一处存在有正常的菌群,所以尿样标本很容易就会受到污染,同时尿液中的营养物质能够使大量繁殖非致病菌,其结果就有可能会出现患者正常的中段尿被误诊呈菌尿,以致于出现假阳性的结果。因此,对患者进行尿培养的时侯应注意:第一,尽量留取患者晨尿;第二,必须留取患者清洁尿;第三,应及时送检。

3 对呼吸道标本进行检验的质量控制措施

正常患者的口腔和呼吸道都会寄生有正常的菌群,所以患者痰标本质量尤为重要。患者痰标本一般不合格的原因有:第一,应用咽拭子与患者正常咳痰以及经患者口腔吸出的上呼吸道分泌物做厌氧菌的培养不具有任何意义;第二,患者痰标本呈唾液样以及水样;第三,盛装患者痰标本的容器有溢漏现象以及送检时间已经超过2 h。患者痰标本的采集与留取之前需要其进行漱口3次,之后再用力咳出。患者痰标本在培养之前要先经革兰染色涂片,才能提高检验结果可靠的程度,进而减少临床误诊以及对抗菌药物进行滥用的现象发生[4]。

4 对粪便标本进行检验的质量控制措施

腹泻的患者,特别是经过临床诊断为发生菌痢的患者,普遍被认为多数都是由痢疾杆菌的感染所导致的,经过多年的实践证明痢疾杆菌的检出率已经十分低下;与此同时,大肠杆菌所能引起患者腹泻的相关报道却越来越多;而能够引起患者腹泻有5种大肠杆菌,对大肠杆菌能否致病则需要有4种血清对其诊断,如果加上志贺菌与沙门菌一共则需要6种血清对其诊断,同时对每种血清标本都要做到全面细致地检查,即使条件非常好的临床医院实现起来也有难度。有的临床检验实验室在未能培养出志贺菌与沙门菌的情况下,仅仅对患者做大肠杆菌的血清鉴定,这种临床检验极具片面性。能够引起患者腹泻的临床致病菌不但包括沙门菌与志贺菌,还包括真菌与艰难梭菌以及空肠弯曲菌等。根据不完全统计,沙门氏菌所能引起的患者感染与空肠弯曲菌相同,并且可以超过志贺氏菌所导致的患者病例数。空肠弯曲菌的培养条件与要求都非常高,一般的临床实验室都很难能够达到其条件。但是空肠弯曲菌可以有端鞭毛,并且进行旋螺状的运动,可以进行悬滴镜检,会比较容易发现[5]。而艰难梭菌则可以因大量的应用抗生素而引起患者发生伪膜性肠炎。艰难梭菌属于厌氧菌类,普通的培养条件不能够把其培养出来。艰难梭菌为粗大的一群革兰氏阳性杆菌,其芽胞呈圆形或者呈椭圆形,其菌体膨大呈梭形,对其镜检能够发现,同时在送检粪便培养,也可以要求对其做细菌学的涂片进行镜检,临床医生则可根据其镜检的结果与临床用药的情况,再结合患者病情来进行综合性地分析。大便中如果能够找到大量细菌在进行旋螺状运动,则可考虑空肠弯曲菌。大便中如果能够找到有粗大的芽胞杆菌,就可以考虑为厌氧菌感染。大便中如果找到大量的真菌,就可以考虑为真菌感染。患者腹泻时,需要在急性期对其采集标本,这样才能够提高检出率,最好能够在患者用药前进行采集,否则将会影响临床诊断[6]。

5 对病灶分泌物与脓液标本进行检验的质量控制措施

患者病灶的脓性分泌物同样也存在着对标本进行采集与检验的质量问题,主要由于对标本取材不规范,经常会培养出来多种细菌,而实际情况是这些额外培养出来的细菌不是引起患者感染真正的致病菌,大多数都是在患者创伤部位创面上进行繁殖的多种杂菌,所以要采集病灶深部分泌物,在必要的时侯则要采集创面以及健康部位的少量组织来进行细菌学培养,而在培养之前应对标本进行涂片镜检,以确认其标本的质量。在多数的情况下能够见到优势菌,也会发生两种细菌的混合感染。标本如果采集的不规范则,就不能够反映患者病变部位准确信息,临床实验室怎样努力的工作,其报告也不能够出现准确的结果。而脓性标本没能够培养出来细菌,是临床细菌检验工作者感到非常尴尬的问题,往往会受到临床医生责怪,主要的原因有如下几个方面:第一,检验标本有可能是在患者进行抗生素治疗后才送检,以致于抑制了致病细菌的生长;第二,检验标本的留取方法出现同题,或者仅仅留取了病灶表面的脓汁,没有按照要求来留取脓汁标本;第三,检验标本没有按时送检,从而导致细菌的死亡;第四,还应该考虑到一些特殊的病原菌致病感染。脓性的检验标本必须严格进行无菌操作,而且做好其病灶部位按时消毒也很重要,检验标本进行采集必须先经过无菌的生理盐水来洗净待检病灶其表面的一些污染菌,并且检验所使用的相关器械与盛取标本所用的标本瓶必须是无菌的,在收集标本后应该立即送检。

[1] 王勇,李忠波.细菌学检验的质量控制[J].中国公共卫生,2002,18(10):1167-1168.

[2] 徐英春.临床细菌学血培养操作规范[J].中华检验医学杂志,2004,27(1):124-126.

[3] 马筱玲,李桂琴.尿培养操作规范[J].中华检验医学杂志,2005,28(10):1087-1089.

[4] 张风梅.临床细菌检验结果的可靠性分析[J].国外医学:临床生物化学与检验学分册,2005,26(10):744-745.

[5] 李仲兴.诊断细菌学[M].广州:黄河文化出版社,1992:454.

[6] 张卓然.临床细菌学和细菌检验[M].北京:人民卫生出版社,2003:468.