酒精依赖对机体组织中腺苷脱氨酶含量的研究*

张建东，郭连峰，李宁，刘北陆，尹学敬(哈励逊国际和平医院:.检验科；.产科,河北衡水 053000)

·临床探讨·

张建东1，郭连峰1，李宁1，刘北陆1，尹学敬2(哈励逊国际和平医院:1.检验科；2.产科,河北衡水 053000)

目的探讨酒精依赖对大鼠机体组织腺苷脱氨酶(ADA)含量的影响。方法 40只大鼠随机分为对照组(10只)和酒精依赖组(30只),应用腺苷脱氨酶检测试剂盒检测各组大鼠脑顶叶、脾、肝脏、小肠、肌肉中 ADA含量。结果与对照组比较，酒精依赖组脑组织和小肠中ADA(30、60 d)差异无统计学意义(P>0.05)，90 d组ADA含量明显升高(P<0.05)；酒精依赖组脾中ADA含量均高于对照组，但差异无统计学意义(P>0.05)；酒精依赖组肝脏中ADA含量均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)；酒精依赖组肌肉中ADA(30、60、90 d)与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)，但90 d组有升高趋势。结论酒精依赖使机体组织中ADA含量增高,促进嘌呤核苷酸分解代谢。

酒精依赖；腺苷脱氨酶；核苷酸

目前人们对酒的消费量逐渐增大，长期大量饮用易使人成瘾，但酒精依赖机制尚未明确。多数学者认为神经适应机制可能是酒精致依赖的主要机制。本研究通过前期研究表明酒精依赖可导致机体血尿酸水平升高。尿酸是嘌呤核苷酸代谢产物，腺苷脱氨酶(ADA)是嘌呤核苷酸分解代谢的关键酶。现通过检测大鼠机体组织中ADA含量变化，研究酒精是否通过调控核苷酸代谢的关键酶而影响机体的核酸代谢。报道如下。

1 材料与方法

1.1 一般材料河北省实验动物中心提供的健康成年SD雄性大鼠40只，体质量(200±20)g,腺苷脱氨酶检测试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。

1.2 方法

1.2.1 动物分组参照 Turchan等方法建立酒精依赖动物模型。40只大鼠随机分为2组，分别为对照组10只,酒精依赖组30只。大鼠普通固体饲料，且同条件饲养。

1.2.2 动物模型制备对照组：大鼠饮自来水,自由进食,每天 9:00更换饮水。酒精依赖组：实验大鼠的饮水为含6% (v/v)乙醇的水溶液,作为饮水的惟一来源,24 h自由饮水,自由进食,每天9:00配制酒精水溶液。实验30、60、90 d处死。2组大鼠均用乙醚麻醉,快速取脑顶叶、脾、肝脏、小肠、肌肉组织标本,立即置-20 ℃保存,备用。

1.3 样本检测脑顶叶、脾、肝脏、小肠、肌肉中ADA测定，按ADA检测试剂盒说明书严格操作,采用比色法。

2 结果

2组大鼠ADA含量检测结果比较：(1)脑中ADA ：与对照组比较，酒精依赖组(30、60 d)ADA含量差异无统计学意义(P>0.05)，酒精依赖组(90 d)ADA含量明显升高，差异有统计学意义(P<0.05)。(2)脾中ADA：酒精依赖组ADA含量均高于对照组，但差异无统计学意义(P>0.05)。(3)肝脏ADA：酒精依赖组ADA含量均明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。(4)小肠ADA：酒精依赖组ADA 含量变化与脑中相似，30 d和60 d组ADA含量差异无统计学意义(P>0.05)，90 d组ADA含量升高明显 (P<0.05)。(5)肌肉ADA：酒精依赖组(30、60、90 d)与对照组差异无统计学意义(P>0.05)，但90 d组有升高趋势(P<0.05)。见表1。

表1 2组大鼠各组织ADA检测结果比较

注：-表示无数据。

3 讨论

尿酸是嘌呤核苷酸分解代谢的终产物。流行病学研究提示高尿酸血症还会引起尿酸增高，与高血压、高脂血症、动脉粥样硬化、肥胖、胰岛素抵抗的发生密切相关[1-2]。嘌呤核苷酸分解代谢过程中的关键酶有ADA 和黄嘌呤氧化酶,其在机体广泛存在，ADA占优势地位。最新研究表明，ADA活性的增加会升高机体体内黄嘌呤与次黄嘌呤的产生量并引起细胞毒性，而其活性降低则能提高机体的抗炎能力[3-4]。嘌呤核苷酸的分解代谢过程中,ADA将腺嘌呤核苷催化生成为次黄嘌呤核苷。XOD将次黄嘌呤催化生成黄嘌呤,然后进一步催化生成尿酸。通过检测组织中ADA活性可反映嘌呤核苷酸在体内的分解代谢情况。

本研究酒精依赖组各组织(脑、脾、肝脏、小肠)中ADA活性均升高，说明酒精在机体整体水平上使嘌呤核苷酸分解代谢增加。脾中ADA活性升降幅度不明显，分析原因可能为ADA在脾中含量较高，而构建动物模型为慢性酒精依赖模型，每天的饮酒量相对较低，经血液流经到脾的含量就更低，相对于高含量的ADA，酒精的作用就不明显。脑组织中ADA活性均升高比较慢，酒精依赖组(90 d)升高有明显差异，戒酒后脑组织ADA含量虽有下降趋势,但与酒精依赖组(90 d)比较，差异无统计学意义(P>0.05),提示酒精对脑组织中核苷酸的代谢影响是一个较长过程，脑内核苷酸合成能力较低，其合成主要依赖补救合成途径。因此酒精对脑组织的影响更明显而持久。肌肉中只有90 d组ADA有升高趋势，可见酒精依赖对肌肉的作用较缓慢，这与临床上酒精依赖患者晚期出现肌肉乏力、震颤等症状原因一致。

综上所述,酒精依赖可以使各组织(脑、脾、肝脏、小肠)中ADA含量增高,促进嘌呤核苷酸分解代谢，为酒精依赖作用的生化药理学机制提供新认识。

[1]Bhole V,Choi JW,Kim SW,et al.Serum uric acid levels and the risk of type 2 diabetes:a prospective study[J].Am J Med,2010,123(10):957-961.

[2]Rodrigues TC,Maahs DM,Johnson RJ,et al.Serum uric acid predicts progression of subclinical coronary atherosclerosis in individuals without real disease[J].Diabetes Care,2010,33(11):2471-2473.

[3] Yury K，Elena K．AMP deaminase and adenosine deaminase activities in liver and brain regions in acute ammonia intoxication and subacute toxic hepatitis[J]．Brain Research，2010，1311(85):175-181.

[4] Luziane PB，Paula ER，Faida HA，et al．An in vitro comparison of a new vinyl chalcogenide and sodium selenate on adenosine deaminase activity of human leukocytes[J]．Chem Biol Interact，2011，189(29):141-148.

河北省卫生厅医学科学研究课题资助项目(20130342)。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.18.043

1672-9455(2015)18-2753-02

2015-03-15

2015-04-10)

酒精依赖对机体组织中腺苷脱氨酶含量的研究*

1 材料与方法

2 结 果

3 讨 论

2 结果

3 讨论