杨海坤

广东省梅州市人民医院妇产科，广东梅州 514003

人乳头瘤病毒（human papilloma virus,HPV）是双链环状DNA病毒，已发现基因型有100余种，已明确高危HPV感染是引起宫颈癌及其癌前期病变的必要因素。有研究显示，尽管HPV16、18等重要型别在地理区域的分布上存在着一致性，但不同地区仍存在各自的优势HPV型别。笔者利用凯普HPV基因分型检测系统对6 455例梅州客家妇女宫颈分泌物进行了HPV型别检测，以了解本地区妇女HPV感染率及型别分布情况。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2009年2月～2010年8月我院妇科行HPV-DNA检查6 455例，年龄23～68岁，平均37.3岁。

1.2 HPV-DNA检测

取宫颈管分泌物并将收集的细胞洗入盛有保存液的小瓶内，通过PCR扩增、基因探针杂交方法进行人乳头瘤病毒的检测（HPV DNA），检测21种HPV分型。21种HPV包括高危型 HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68，及低危型 HPV6、l1、42、43、44、CP8304。

1.3 实验方法

1.3.1 样本DNA分离提取 取保存有宫颈细胞的细胞保存液0.5 ml，以14 000 r/min离心1 min，弃上清液后，利用凯普生物化学科技公司的基因组提取试剂盒提取DNA，PCR扩增，导流杂交，具体操作步骤详见试剂盒说明书。

1.3.2 结果判断 阳性点为清晰可见的蓝紫色圆点，多个圆点阳性即为多重感染。

1.4 统计学方法

应用SPSS 13.0进行χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 宫颈病变HPV感染

6 455例标本中HPV感染1 334例，总感染率为20.67%。其中炎症HPV感染率为11.9%，宫颈癌HPV感染率为0.94%。见表1。

2.2 HPV感染各年龄组分布

1 334例阳性标本中基因型为高危型1 251例，高危型阳性率为19.38%；低危型83例，低危型阳性率为1.29%。各年龄组总HPV阳性率居前3位的是30～39岁，40～49岁，50～59 岁（χ2=97.132，P=0.00＜0.05）。 各年龄组总 HPV 阳性率差异有统计学意义。高危HPV阳性率居前3位的是30～39岁，40～49 岁，50～59 岁（χ2=74.176，P=0.00＜0.05）。 见表 2。

表1 宫颈病变HPV感染（例）

表2 宫颈分泌物HPV基因型别分布（例）

2.3 HPV感染基因型分布

HPV基因型分布阳性率居前5位的是HPV16（5.61%）、HPV58（2.74%）、HPV52（2.69%）、HPV31（2.14%）和 HPV33（1.28%）。 见表 3。

表3 妇女宫颈分泌物各型HPV感染率排名前7位

3 讨论

宫颈癌已被世界卫生组织WHO列为威胁女性生命的第二大肿瘤，其致病机制复杂。大量流行病学资料显示，持续高危人乳头瘤病毒感染是宫颈上皮内瘤变（CIN）及宫颈癌发病的必要条件[1]。据研究约50%～90%的HPV感染可在感染后数月至2年内被免疫系统清除，感染的平均持续时间为8～12个月。如果在间隔1年以上的时间连续两次检测出同一高危型HPV-DNA被认为是持续感染，只有慢性持续高危型HPV感染最终演变为宫颈癌。

HPV亚型有20种可引起生殖道肿瘤[2]。我国妇女HPV感染及型别分布情况各地报道不同。李霓等学者的研究显示中国妇女人乳头状瘤病毒感染率为16.1%[3]。Cliford等对11个国家共13个地区15 613名无宫颈病变妇女中HPV的感染率进行分析：撒哈拉以南非洲地区HPV感染率最高，达25.6%，南美洲妇女HPV的流行情况介于撒哈拉以南非洲地区与欧洲之间[4]。何桂荣等[5]报道深圳地区女性HPV感染率达17.5%。本文对梅州地区女性感染HPV基因型别进行检测，结果显示6 455例标本中HPV感染1 334例，总感染率20.67%。本研究显示广东省梅州客家地区妇女人群HPV感染率高于国内有关报道，分析由于地理位置及种族不同，感染HPV基因型可能有所不同。再则，梅州客家地区是广东省偏远的贫困山区、革命老区、欠发达地区，健康意识差，与HPV高感染率有一定关系。

年龄是影响HPV流行的一个重要因素，我国HPV感染以35～44岁年龄段感染率为最高，随着年龄的增高，HPV感染率并没有出现明显降低。本研究表明，各年龄组总HPV阳性率居前 3位的是 30～39岁，40～49岁，50～59岁。 各年龄组总HPV阳性率差别有统计学意义。

HPV16和18是宫颈癌及其前期病变中最常见的基因型别，HPV16、HPV52和58型是中国特有的优势感染型别。对于健康人群，HPV感染基因型别报道结果不同地区存在着差异。Clifford等[4]统计分析了11个国家15 613名无宫颈病变妇女HPV型别的分布，HPV感染的主要型别为HPV16、42、58、31、18、56、81、35、33 和 45。在我国，HSIL、LSIL 和正常妇女中最常见的HPV型别为HPV58和52，表明HPV58、52型是我国妇女宫颈癌发生、发展中的重要HPV型别。本研究结果发现梅州客家地区HPV基因型分布位居前5位的是HPV16（5.61%）、HPV58（2.74%）、HPV52（2.69%）、HPV31（2.14%）和HPV33（1.28%），与国内统计相似。

预防宫颈癌的根本方法就是采用疫苗进行人群一级预防。现有的国外疫苗仅仅针对HPVl6和HPVl8型，我国在自发研制预防性HPV疫苗时，应考虑重要优势型别HPV52、58。

总之，高危型HPV感染与宫颈癌发病密切相关，是导致宫颈癌的危险因素。梅州客家地区HPV阳性检出率较高，提示我区应加大宣传力度，进一步加强宫颈癌相关筛查，尽早发现宫颈的早期病变，最大限度减少宫颈癌的发生及死亡。

[1]Herrero R,Castle PE,Sehiffman M,et a1.Epidemiologic profile of typespecific human papilloma virus infection and cervical neoplasia in Guanacaste[J].JInfect Dis,2005,191(11):1796-1807.

[2]Munoz N,Bosch FX,de SanjoséS,et a1.Epidemiologic classification of human papillomavirus types associated with cervical cancer[J].N Engl J Med,2003,348(6):518-527.

[3]李霓,代敏.中国妇女人乳头状瘤病毒感染的多中心横断面研究[J].中华疾病控制杂志,2008,12(5):411-415.

[4]Clifo GM,Gallus S,Herrem R,et a1.Worldwide distribution of human papillomavirus types in cytologically normal WOlYlen in the International Agency for Research On Cancer HPV prevalence surveys:a pooled analysis[J].Lancet,2005,366(9490):991-998.

[5]何桂荣,武学成.深圳地区女性感染人乳头瘤病毒基因类型分析[J].现代检验医学杂志,2007,22(2):19-21.