良好实验室规范体系下全自动血液分析仪的3Q验证

张　谦　刘　娜　肖云峰▲.内蒙古医科大学新药安全评价研究中心，内蒙古呼和浩特　000；.内蒙古自治区巴彦淖尔市医院检验科，内蒙古巴彦淖尔　05000

良好实验室规范体系下全自动血液分析仪的3Q验证

张谦1刘娜2肖云峰1▲
1.内蒙古医科大学新药安全评价研究中心，内蒙古呼和浩特010110；2.内蒙古自治区巴彦淖尔市医院检验科，内蒙古巴彦淖尔015000

目的 以Sysmex XT-1800iv全自动血液分析仪为例，探讨良好实验室规范（GLP）体系下全自动血液分析仪的3Q验证过程。方法 选择白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、血红蛋白（HGB）、血细胞比容（HCT）、血小板（PLT）5项检验指标，对仪器的精密度、携带污染率、线性进行性能验证。结果 所测指标的批内精密度CV值＜4.00%，携带污染率＜1.0%，线性相关系数r值＞0.99。结论 经GLP体系下的3Q验证，该全自动血液分析仪各方面性能良好，可以用于临床检验实验室的检验工作。

良好实验室规范；全自动血液分析仪；3Q验证

［Abstract］Objective To explore the procedures of 3Q validation for automatic blood analyzer under the good laboratory practice（GLP）system based on the Sysmex XT-1800iv automatic blood analyzer.Methods 5 test indicators of blood cell（WBC），red blood cell（RBC），hemoglobin（HGB），hematocrit（HCT）and platelet（PLT）were chosen to evaluate the precision，cross contamination，linearity of the automatic blood analyzer.Results The within-run precision of the items was lower than 4.00%，the cross contamination rate was lower than 1.0%，the linear coefficient r was more than 0.99. Conclusion The 3Q validation under the GLP system proves that the automatic blood analyzer is good in performance and is appropriate for clinical laboratories.

［Key words］Good laboratory practice；Automatic blood analyzer；3Q verification

良好实验规范 （good laboratory practice，GLP）实验室是主要针对食品、化妆品、新药等进行的安全性评价实验而制订的规范［1］，在最大程度上消除可能影响实验结果的主观和客观因素，降低误差，确保实验结果的真实可靠［2］。为保证研究数据的真实有效，GLP实验室不仅在硬件方面具有相应仪器设备，在人员和软件方面也具有较高的要求［5-6］。国家食品药品监督管理总局、美国食品和药物管理局均有相应文件明确规范GLP实验室中备案仪器设备应定期进行3Q验证［3］。所谓3Q验证，即指仪器的安装验证（installation qualification，IQ）、操作验证（operation qualification，OQ）和性能验证（performance qualification，PQ）［4］。而其中涉及到的性能验证是整个3Q验证中的关键步骤，需要在实验前精心设计验证指标和验证方案［7］。本文以Sysmex XT-1800iv全自动血液分析仪为例，探讨在GLP管理体系下全自动血液分析仪的校准及PQ验证。

1　材料与方法

1.1仪器与试剂

仪器为Sysmex XT-1800iv全自动血液分析仪（仪器编号70440）；试剂、质控品、校准品为Sysmex公司生产，CELL PACK（批号G5168），STROMATOLYSER-FB（批号R5021），STROMATOLYSER-4DL（批号R5034），SULFOLYSER（批号A5008），STROMATOLYSER-4DS（A5022），质控品Level2（批号6050811），SysmexSCS-1000（批号60600525），高、中、低三个水平的EDTA-K2抗凝血。

1.2方法

1.2.1批内精密度 取高、中、低三个水平的新鲜EDTAK2抗凝血，连续重复测定10次，计算CV、SD。

1.2.2携带污染率取高浓度新鲜EDTA-K2抗凝血混匀测定3次，其测定值为H1、H2、H3；取低浓度新鲜EDTA-K2抗凝血测定3次，测定值为L1、L2、L3。通过公式携带污染率=（L1-L3）/（H3-L3）×100%计算携带污染率。

1.2.3线性取1份高值新鲜EDTA-K2抗凝血（H），分别按5∶5、4∶5、3∶5、2∶5、1∶5的比例进行稀释，每个浓度重复3次测定，计算平均值。将实际测定值与理论值相比较，通过方程y=ax+b验证线性范围。

2　结果

2.1批内精密度

批内精密度是衡量仪器性能的重要指标，通过对高、中、低3个水平的新鲜EDTA-K2抗凝血连续重复测定，计算CV、SD值均在判定标准内，见表1～3。

表1　低值批内精密度测定（n=10）

表2　中值批内精密度测定（n=10）

表3　高值批内精密度测定（n=10）

2.2携带污染率

携带污染率是直接衡量上一个样品对下一个样品测定结果影响大小的指标。各项目的携带污染率均＜1.0%，符合行业通用标准，见表4。

表4　携带污染率测定结果（n=6）

2.3线性实验

RBC、WBC、HGB、HGB、PLT 5项参数的线性相关系数r＞0.99，a值在（1.00±0.05）范围内，表明该仪器在一定稀释范围内具有良好的线性相关性。见表5。

表5　线性测定结果（n=5）

3　讨论

GLP实验室是药物非临床研究安全性评价的一个必然趋势，也是世界经济发展一体化的要求［8-9］。相对于非GLP的药理毒理等实验所得出的结果更具有严密性和可靠性［10-11］。纳入GLP的实验，从项目负责人制订实验方案，到机构负责人的审批，经质量保障部的检查，到方案完整实施，及质量保障部在实验中的监督以及最后实验报告总结等，都是十分的周密和详细的［12-13］，并且所涉及的每一个程序都要有相应的标准操作规程做为依据与指导［14］，整个实验排除了许多因素的干扰，所以能够给新药研发提供完整、原始的数据［15］，给临床研究提供更为有价值的资料［1］。

3Q验证中PQ验证频率为每年一次［16］。仪器有下列情况之一则需要重新验证：仪器的放置地点改变、仪器的检测方法改变、仪器进行重大维修［17］。GLP体系下仪器的性能验证需在部门负责人的监督下由有经验的工作人员完成［18］：第一，制订验证方案；第二，对仪器参数进行设置，对检测项目进行校准，对仪器精密度、线性、携带污染率、准确性等进行性能验证；第三，验证报告由检测人员签名确认后连同原始数据以书面形式归档，3Q验证过程需要质量保障部门人员的监督［19-20］。

经过良好实验室规范体系下的3Q验证，临床检验部Sysmex XT-1800iv全自动血液分析仪各项性能指标良好，所测定的实验数据真实准确，可用于药物非临床研究安全性评价的临床检验中血液学指标的检测。。

［1］吴建辉，闫晗，苏欣，等.GLP人员的岗位职责与各类人员的培训［J］.中国药理学与毒理学杂志，2013，27（3）：458-458.

［2］于文莲，陈会明，宋乃宁，等.良好实验室规范与实验室认证［J］.分析实验室，2010，29（5）：120-122.

［3］项新华，黄海伟，左宁，等.建立性能管理为核心的仪器设备质量管理新模式［J］.中国药事，2014，28（7）：721-725.

［4］王三龙，沈连忠，齐卫红，等.安全药理遥测系统进行3Q验证的关注点［J］.中国药学杂志，2010，45（10）：797-800.

［5］余珊珊，李正奇.GLP认证现场检查常见问题简析［J］.药物评价研究，2014，37（4）：295-299.

［6］贾栗，赵瑞勤，赵君，等.GLP体系下生化分析仪的3Q验证过程及要点［J］.军事医学，2013，37（10）：752-755.

［7］杨琛懋，马璟.关于GLP实验室仪器验证的探讨［J］.毒理学杂志，2007，21（4）：285-285.

［8］吴洪海，李五一，阮慧，等.综合性高校GLP实验室建设的探索［J］.实验技术与管理，2013，30（2）：202-204.

［9］林琎，赵春青，慕卫，等.浅析高校GLP实验室的建设［J］.实验科学与技术，2013，11（5）：178-181.

［10］陈晓燕，房春娟.GLP实验室管理初探［J］.江西科技学院学报，2012，7（1）：37-40.

［11］霍艳，谢寅，汪巨峰.GLP组织机构和管理体系的建立与运行［J］.中国药理学与毒理学杂志，2013，27（3）：458-459.

［12］张晓芳，宗英，袁伯俊，等.GLP实验室专题研究QA核查常见问题探讨［J］.中国新药杂志，2011，20（20）：1949-1952.

［13］张呈菊，马璟，顾珺，等.GLP实验室中QAU的检查类型及其功能［J］.中国药事，2013，27（8）：812-815.

［14］于志瀛，朱庆，王焱.浅谈GLP实验室仪器设备SOP的制定［J］.中国药事，2010，24（2）：144-146.

［15］杨锋，王红星，艾应先.质量控制在GLP中的实践与体会［J］.中国卫生质量管理，2011，18（4）：70-72.

［16］王和枚，董延生，韩刚，等.GLP条件下毒性病理学的规范化建设与实践［J］.2013，27（3）：455-456.

［17］张冬梅，闫俊，苗强，等.Sysmex XT-2000iv血细胞计数仪的性能验证［J］.生物医学工程研究，2013，32（1）：38-40.

［18］吕会田.GLP条件下实验仪器的验证和管理［J］.中国药理学与毒理学杂志，2013，27（3）：457-458.

［19］古海锋，郭洪祝，厉进忠，等.药品检验用仪器设备性能验证指导原则和技术标准的探讨［J］.中国药事，2014，28（7）：710-714.

［20］刘晓萌，谢寅，孟建华，等.GLP实验室仪器验证的质量保证［J］.中国药理学与毒理学杂志，2013，27（3）：607-607.

3Q verification of automatic blood analyzer under good laboratory practice system

ZHANG Qian1LIU Na2XIAO Yunfeng1▲
1.Center for New Drug Safety Evaluation and Research，Inner Mongolia Medical University，Inner Mongolia Autonomous Region，Huhhot010110，China；2.Clinical Laboratory，Bayan Nur Hospital，Inner Mongolia Autonomous Region，Bayan Nur015000，China

R95

A

1673-7210（2016）05（b）-0170-03

内蒙古自治区卫生和计划生育委员会医疗卫生科研计划项目（201302052）。

2016-02-10本文编辑：程铭）