舌下含服特异性免疫治疗对变应性鼻炎患儿IL-10和IL-13表达水平的影响

吕渊，叶栋，章菊琴，张秀强

变应性鼻炎（AR）儿童的患病率在逐年升高，如不及早干预，会愈加严重乃至转变为过敏性哮喘。当前，舌下含服特异性免疫治疗（SLIT）逐渐成为AR的重要治疗方式[1]。目前特异性免疫治疗的疗效评估主要通过主观指标，缺少客观指标。嗜酸性粒细胞、sIgG4及sIgE等表达水平与免疫治疗疗效之间关系的研究已有诸多文献报道[2-4]，而与过敏反应密切相关的细胞因子与免疫治疗疗效之间关系的研究却极少。有研究发现，IL-4、TGF-、IL-10、IL-13及 IFN-等细胞因子与免疫治疗机制密切相关[5-7]。本研究采用标准化的粉尘螨滴剂治疗AR患儿84例，完成治疗疗程后对AR患儿进行疗效评估，观察治疗前后血清中IL-10和 IL-13表达水平的变化。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集 2014年 2月至2015年4月宁波市医疗中心李惠利医院收治的AR儿童84例，均符合2015年AR诊断和治疗指南中的诊疗标准[1]。患儿在治疗前进行过敏原检测试验，检测结果要求粉尘螨阳性（皮肤点刺需要2＋以上，或血检特异性IgE水平在2级或2级以上），临床症状病史与过敏原尘螨存在着密切的相关性。排除：（1）合并未控制的哮喘（哮喘处于急性发作期）；（2）合并有鼻窦炎、鼻息肉和鼻中隔偏曲；（3）患有自身免疫学疾病、精神类疾病、恶性肿瘤、心血管疾病及肺结核活动期。按治疗方法不同分为SLIT组和对照组，各42例。SLIT组男20例，女22例；年龄6～14岁，平均（9.0±0.5）岁。对照组男21例，女21例；年龄6～13岁，平均（8.0±0.5）岁。两组一般资料差异无统计学意义。

1.2 方法 SLIT组采用标准化粉尘螨滴剂（浙江我武生物科技有限公司，S20060012，畅迪）对过敏患儿进行2年的治疗，粉尘螨滴剂共有5个规格，粉尘螨滴剂1号（1 g/ml）、粉尘螨滴剂2号（10 g/ml）、粉尘螨滴剂 3 号（100 g/ml）、粉尘螨滴剂4号（333 g/ml）及粉尘螨滴剂5号（1 000 g/ml）。整个SLIT治疗分为两个治疗阶段，即递增阶段和维持阶段。递增阶段：第1周使用1号，第2周使用2号，第3周使用3号，每周的1～ 7 d，分别使用 1滴、2滴、3滴、4滴、6滴、8滴和10滴。维持阶段（第4周开始）：使用4号维持治疗，每天1次，每次3滴，后面的治疗一直使用4号维持，如果个别患儿耐受良好，可以根据个体化的原则尝试使用5号（每天1次，每次2滴）。前3周需要配合对症药物，如抗组胺类药物和鼻用激素类药物，后3周如果症状加重也需要配合对症药物。治疗过程如果出现不耐受的情况，需要进行个体化减量。对照组单纯使用对症药物如组胺类和鼻用激素类药物治疗。整个治疗过程获得院伦理委员会的批准，且签订知情同意书（与患儿监护人）。

1.3 观察指标 根据就诊随访记录进行鼻部症状改善和对症药物使用的打分，分别于治疗前、治疗6个月、1年和2年时进行评估。鼻炎症状评分标准根据文献[8]对喷嚏、流涕、鼻塞和鼻痒分别进行评估，并进行打分，4者的分数之和为总鼻部症状评分（TNSS）。对症用药评分标准根据文献[9]，口服孟鲁司特钠为1分，口服氯雷他定记为1分，使用丙酸氟替卡松鼻喷雾剂为2分，所有相加为用药评分（TMS）。

1.4 ELISA检测细胞因子表达水平应用酶联免疫吸附法检测血清中 IL-10和IL-13的表达水平，分别于治疗前、治疗6个月、治疗1年和治疗2年后检测。试剂盒均购自南京森贝伽生物科技有限公司，使用美国宝特ELX-808酶标仪完成。

1.5 统计方法 采用SPSS17.0统计软件进行数据分析，计量资料以均数±标准差表示，采用t检验；相关性分析采用Pearson相关分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组TNSS评分比较 SLIT组及对照组治疗1年、2年时与治疗前TNSS评分差异均有统计学意义（t≥2.19，均P＜0.05），两组治疗1年、2年时TNSS评分差异均有统计学意义（均P＜0.05）。见表1。

2.2 两组TMS评分比较 SLIT组及对照组治疗1年、2年时与治疗前TMS评分差异均有统计学意义（t≥5.30，均P＜0.05），两组治疗1年、2年时TMS评分差异均有统计学意义（均P＜0.05）。见表2。

2.3 细胞因子表达水平的变化 与治疗前相比，治疗1年后，SLIT组的IL-10水平显着上升，IL-13水平显着下降（t≥6.32，均P＜0.05）。两组治疗1年后IL-10及IL-13差异均有统计学意义（均P＜0.05）。见表3。

2.4 相关性分析 治疗前及治疗2年后IL-10水平与TNSS评分均呈负相关（r=－ 0.26、－ 0.47，均 P＜ 0.05），IL-13水平与TNSS评分均呈正相关（r=0.64、0.72，均P＜0.05）；而治疗1年后IL-10及IL-13水平与TNSS评分不存在相关性（均P＞0.05）。

3 讨论

SLIT的疗效已在大量的临床试验和Meta分析中得到证实[10]。目前，国内外主要通过主观症状评分进行脱敏疗效的评估，即TNSS评分、TMS评分、VAS评分和生活质量评估等。客观指标在临床上的应用极少，主要是由于目前临床上通过实验室客观指标来评估脱敏疗效还处于实验室研究阶段，除了有报道sIgG4、IgE等抗体分子及炎性细胞（如嗜酸性粒细胞）的表达水平变化与免疫治疗疗效之间可能存在关系外，对于细胞因子水平与免疫疗效之间可能存在的关系研究较少。Th2细胞通过产生细胞因子IL-4、IL-5及IL-13在变态反应疾病中发挥重要作用[11]。而IL-13参与IgE介导的过敏反应的调节，与IgM/G到IgE的转换密切相关。在外周血单核细胞中可以检测出产生IL-13的免疫细胞花粉季节过敏性疾病后患者体内的IL-13表达水平会增加[12]。同时研究发现在过敏鼻炎患者的鼻黏膜和支气管肺泡灌洗液中可检测到IL-13的存在[13]。IL-10由T调节细胞产生，具有免疫抑制的作用，能够抑制炎性反应的发生，体内IL-10表达的下调，会导致人体的过敏性疾病产生[14]。Marek 等[15]研究发现，经过屋尘螨变应原活性蛋白特异性免疫治疗后，屋尘螨过敏患者外周血单核细胞中 IL-10的表达水平增加。

表1 两组TNSS评分比较 分

表2 两组TMS评分比较 分

表3 两组治疗前后血清IL-10及IL-13水平的比较 ng/L

本研究结果显示，免疫治疗1年，IL-10的水平较治疗前有明显上调，且和TNSS评分呈负相关；这表明IL-10可能参与了免疫调节机制及抑制过敏性炎症的作用。IL-13的表达水平在免疫治疗2年后，表达水平降低，且与TNSS评分呈正相关；这说明在IL-13参与的IgE介导的过敏反应调节中，免疫治疗可能对IL-13的表达水平产生了影响。

综上所述，舌下免疫治疗对AR患儿有效。此外，本研究证实IL-10及IL-13表达水平与疗效改善情况存在一定的相关性，但仍需要大量的临床数据及更长期的随访评估支持。

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