秦伟斐，廖红梅，谭茜茜，田耘博，黄 霞，李亚斐△
(1.第三军医大学军事预防医学院军队流行病学教研室，重庆 400038；2.重庆市血液中心 400015)
论着·临床研究
重庆市无偿献血者人细小病毒B19的感染状况研究*
秦伟斐1，廖红梅2，谭茜茜2，田耘博2，黄 霞2，李亚斐1△
(1.第三军医大学军事预防医学院军队流行病学教研室，重庆 400038；2.重庆市血液中心 400015)
目的 了解重庆市无偿献血者中人细小病毒B19感染状况，评估B19病毒的流行病学情况，为本市乃至中国未来制订实施更为科学合理的输血安全策略提供基础数据。方法用ELISA对无偿献血者血液进行B19 IgM和IgG抗体筛查。结果1 104份无偿献血者血液样本中，B19 IgM和IgG阳性率分别为5.07%和36.68%(P<0.05)。女性B19 IgM抗体阳性率高于男性(P<0.05)，而在男性和女性中B19 IgG抗体阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05)。各年龄组中B19 IgM阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05)，B19 IgG阳性率随着年龄升高而升高(P<0.05)。不同血型人群比较、不同季节献血者B19 IgM和IgG阳性率比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、HIV阳性样本与阴性样本中B19 IgM、B19 IgG阳性率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论重庆市献血者中，仍有少部分人群感染B19病毒，在尚未开展B19病毒筛查的情况下，存有输血传播该病毒的风险。
献血者；细小病毒B19，人；抗体；流行病学
人细小病毒B19(human parvovirus B19，HPVB19或B19)是细小病毒属中惟一与人类疾病有密切关系并能使人致病的病毒[1]。1975年澳大利亚Cossart在乙型肝炎患者血清样本中，在电子显微镜下观察到B19病毒颗粒。1981年首次证实B19与人类镰状细胞贫血患者发生再生障碍危象有关，人们逐渐认识到B19病毒广泛分布，可通过呼吸道分泌物(或黏液和飞沫)、输注血液和血液制品传播[2]，尤其对于长期输注血液及制品的患者存在潜在的危险。B19病毒感染通常无症状表现，但有研究证实该病毒的感染与成人关节炎、幼儿传染性红斑、孕妇的胎儿水肿和宫内死胎等疾病相关，尤其对于免疫缺陷的人群，可以造成B19病毒的持续性感染[3]。输血也是B19病毒感染的主要传播途径。为了解重庆地区无偿献血人群中B19病毒感染及流行情况，作者用ELISA法对献血者进行B19 IgM和IgG抗体筛查，以期为今后输血和血液制品筛查策略的制订提供依据。
1 资料与方法
1.1 一般资料 抽取2012年10月至2013年9月重庆市无偿献血者血液样本1 104份，每位献血者留取无分离胶EDTA抗凝5 mL和有分离胶8 mL EDTA抗凝血各1管[无分离胶的用于乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、HIV检测，有分离胶的用于B19检测]，各样品管的离心和保存均按相应的检测试剂说明书要求进行操作。本研究的无偿献血者的一般情况见表1。
表1 无偿献血者的一般情况
1.2 试剂与设备 主要试剂:HBsAg检测(北京万泰、生物梅里埃)，抗-HCV检测(上海科华、美国强生)，抗-HIV检测(上海科华、生物梅里埃)。B19 IgG/IgM检测采用德国维润赛润公司生产的赛润ELISA classic细小病毒B19 IgG/IgM抗体检测试剂盒。细小病毒B19 IgM和IgG抗体试剂盒的批号分别为：SMG.CU/SEE.FX和SBD.DC/SDD.EY。主要检测设备：RSP150型全自动样品处理仪(瑞士帝肯)，FAME24/20型全自动酶联免疫分析系统(瑞士哈米尔顿)，EXL808酶标仪(美国BIO-TEK)和TBL4000离心机(湖南湘仪)。
1.3 结果判断 所有检测均按照试剂说明书操作。本实验室将HBsAg、抗-HCV、抗-HIV检测结果S/Co≥0.8即判为有反应性，其中，1.0>S/Co≥0.8之间设置为灰区，双试剂S/Co均≥0.8，直接判为阳性，双试剂S/Co均<0.8，直接判为阴性。B19 IgM抗体浓度：<13 U/mL为阴性、>17 U/mL为阳性，13～17 U/mL为可疑，不记入阳性。B19 IgG抗体浓度：<35 U/mL为阴性、>45 U/mL为阳性，35～45 U/mL为可疑，不记入阳性。
1.4 统计学处理 采用SPSS21.0统计软件进行分析处理，率的比较采用χ2检验，检验水准α=0.05，以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结 果
2.1 献血者中B19 IgM和IgG阳性率 1 140份无偿献血者血液样本中，B19 IgM阳性56份，阳性率为5.07%；B19 IgG阳性405份，阳性率为36.68%；二者比较差异有统计学意义(P<0.001)。IgM、IgG双阳性21份(1.90%)，IgM、IgG双阴性664份(60.14%)，见表2。
表2 无偿献血者中B19 IgM和IgG抗体检测结果分布
2.2 献血者中B19病毒检测结果的人群特点 性别比较：在B19 IgM抗体中，女性IgM阳性率为7.52%，男性阳性率为3.46%，女性高于男性(χ2=9.045，P=0.003)。在B19 IgG抗体中，女性IgG阳性率为39.64%，男性阳性率为34.74%，女性与男性比较差异无统计学意义(χ2=2.732，P=0.098)。不同年龄段比较：不同年龄段B19 IgM阳性率比较差异无统计学意义(χ2=0.827，P=0.843)；B19 IgG阳性检各年龄组间比较差异有统计学意义(χ2=118.324，P=0.000)，阳性率随着年龄增长而增加。不同文化程度人群比较：B19 IgM阳性率比较差异无统计学意义(χ2=2.731，P=0.435)；而B19 IgG阳性率比较差异有统计学意义(χ2=32.941，P<0.001)，随着文化程度的降低，其感染率呈增长趋势。不同血型人群比较：B19 IgM阳性率比较差异无统计学意义(χ2=0.245，P=0.970)；B19 IgG阳性率比较差异无统计学意义(χ2=0.609，P=0.894)。见表3。
2.3 献血者中B19病毒检测结果的季节特点 B19 IgM阳性检出主要分布于1月(7.41%)、4月(7.30%)、6月(6.98%)、8月(6.74%)、9月(9.33%)、11月(8.96%)、12月(6.67%)。B19 IgG各月均表现出较高的阳性率，其中,8月最高(41.57%)，12月最低(25.33%)。按照3～5月为春季，6～8月为夏季，9～11月为秋季，12～2月为冬季进行季节划分，B19 IgM和B19 IgG季节性阳性率比较差异均无统计意义(P>0.05)。见图1和表4。
2.4 献血者样本中B19 IgM、IgG分别与HBV、HCV、HIV共同感染情况 所有无偿献血者血液样本均经过HBsAg、抗-HCV、抗-HIV 两种不同厂家的ELISA试剂检测，分别与B19 IgM、IgG共感染阳性样本共352份，均为阴性的样本752份。经过B19 IgM和IgG检测，与3项ELISA结果共感染的352份样本中，B19 IgM阳性14份(3.98%)，B19 IgG阳性129份(36.65%)。其中，与B19 IgM共感率分别为HIV 5.26%、HBV 4.03%、HCV 2.63%，三者比较差异无统计学意义(χ2=1.047，P=0.623)。与B19 IgG共感率分别为HCV 43.86%、HBV 33.06%、HIV 33.33%，三者比较差异无统计学意义(χ2=3.779，P=0.151)。在3项ELISA结果均为阴性的752份样本中，B19 IgM阳性42份(5.59%)、B19 IgG阳性276份(36.70%)；均阴性样本与共感染阳性样本比较，B19 IgM阳性率比较差异无统计学意义(χ2=1.287，P=0.257)，B19 IgG阳性率比较差异无统计学意义(χ2=0.000，P=0.986)，见表5。
表3 献血者中B19 IgM和IgG抗体阳性率人群特点[n(%)]
图1 B19 IgM与IgG阳性率在各月份的分布情况
表4 不同季节中B19 IgM和IgG抗体阳性率分布情况[n(%)]
表5 B19 IgM、IgG阳性分别与HBV、HCV、HIV共感情况[n(%)]
3 讨 论
细小病毒B19是临床上人感染细小病毒最重要的病原体，能够在人红细胞中进行复制，B19病毒的致病机制逐渐成为国内外学者研究方向。作为一个重要的人类病原体，越来越多的研究发现，B19感染可以累及多脏器，导致胎儿流产和在免疫功能低下的患者中引起多种疾病，因而对B19感染进行诊断和流行病学监测很有必要，这也需要在常规医疗中，如输血、移植等医学领域开展简单有效的筛查诊断，预防B19病毒的传播。
本研究的无偿献血者血液样本中，男性占60.24%，年龄结构主要是18～45岁的中青年，占85.96%，从事自由职业和其他职业者献血比重大，从地域结构看，79.35%为重庆市人，主城区略高于郊县。B19病毒血清学检测包括抗原和抗体的检测。其中，抗体检测是目前临床诊断及流行病学调查B19感染的主要方法。在被检人群中，B19 IgM抗体阳性常标志着急性感染，B19 IgG抗体阳性指示既往感染。B19 IgM抗体常在患者临床症状后3 d出现，发病后约30～60 d抗体滴度和阳性率开始下降[4]，B19 IgG抗体通常在发病后7 d出现，持续数年甚至终身。B19的持续性感染已经被多个国家和地区报道，B19 IgG抗体阳性率在不同地区和时间呈不同的流行趋势[5]。本研究结果显示，献血者中B19 IgM阳性率为5.07%，B19 IgG阳性率为36.68%；二者阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)。郑优荣等[6]报道广州地区献血人群中B19 IgM和IgG阳性率分别为1.90%%和38.60%，台湾地区B19 IgM和IgG阳性率分别为0.35%和32.80%，吉林地区B19 IgG阳性率为55.43%[7]；有英国学者报道B19 IgG抗体阳性率为67.80%；而非洲西部IgG阳性率可达82.30%[8]；因此，重庆地区献血者中B19病毒既往感染率处于相对较低水平，而急性感染率高于中国其他部分地区。提示本市仍有部分处于B19急性感染期的献血者进行献血。
B19病毒抗体在普通人群中广泛存在，多数人在感染病毒后，没有症状。在病毒血症早期，血液中病毒含量很高，能传播病毒引起成人关节炎、孕妇畸胎或流产等疾病。有病例对照研究发现，有反复流产史的妊娠妇女B19感染率达84%，而正常妊娠妇女的感染率仅16.7%[9]，这可能与妇女在妊娠期间内分泌改变及免疫功能下降有关。B19感染常引起关节炎和关节痛，女性(60%～80%)多于男性。多在2周内自行恢复，持续数月或数年者均系女性，并认为与HLA-DR1缺乏有关。本研究也同样发现在不同性别的献血者中，女性B19 IgM阳性率为7.52%，男性阳性率为3.46%，女性高于男性。B19 IgG阳性率女性也高于男性。与国内吉林地区[7]、临沂地区[10]报道一致。这是否与女性的免疫机制有关，还待进一步研究。
B19病毒感染一年四季均可发生，实验结果显示重庆地区四季感染率比较差异无统计学意义(P>0.05)。B19疾病呈世界性分布，其病毒可引起局部流行和暴发性流行。其感染率高，大部分B19急性感染发生在学龄儿童和青少年[11]。本研究结果显示，急性感染率高峰为18～28岁年龄段，并随年龄增长有所减低，这也说明本地区的献血者比较年轻。既往感染率随年龄增长而增高，而其他学者的所有研究几乎都得出了阳性率随年龄增长而增高。重庆市献血人群中B19既往感染率随着文化程度的降低呈增长趋势。本研究结果显示献血者不同血型间B19 IgM和IgG阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05)，与国内其他学者报道结果不符[12]。
在献血者中，存在一部分HBV、HCV、HIV病毒携带者，如B19感染免疫缺陷患者，能造成严重的慢性贫血等。有文献报道B19病毒在乙型肝炎相关肝病中有较高的感染率[13]，HIV感染人群B19病毒远期和近期感染率明显高于健康人群[14]。但在本实验研究的HBV、HCV、HIV共有阳性与3项均阴性的结果中，B19病毒的感染情况无统计学意义，可能是因为这部分献血者大多是青年人，属于健康病毒携带者。通过对HBV、HCV、HIV病毒携带者中B19 IgM和IgG阳性率进行分析发现，B19感染差异无统计学意义(P>0.05)，而在HIV急性感染中B19 IgM阳性率最高，这与本地区无偿献血者中HIV感染率呈逐年上升趋势，且HIV感染者主要是小于30岁年龄段人群[15]有关。
综上所述，重庆市无偿献血者中，部分人群存在B19病毒急性感染和既往感染。目前，国家还没有制订针对献血者血液及血液制品中人细小病毒B19的筛查策略，本研究为输血安全和血液制品安全管理政策的制订提供了一定的理论依据。
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Study on the infection status of human parvovirus B19 among unpaid blood donors in Chongqing*
QinWeifei1，LiaoHongmei2,TanXixi2,TianYunbo2,HuangXia2,LiYafei1△
(1.DepartmentofEpidemiology,CollegeofPreventiveMedicine,ThirdMilitaryMedicalUniversity，Chongqing400038，China；2.ChongqingBloodCenter，Chongqing400015,China)
Objective To provide basic datas for enriching the scientific and reasonable security strategy of blood transfusion in Chongqing,even for the national use in the future,we studied the infection status of human parvovirus B19(B19V) among unpaid blood donors and evaluated the prevalence of B19V in Chongqing.MethodsB19 IgM and B19 IgG antibody from blood donors were detected by the method of enzyme linked immunosorbent assay.ResultsAmong 1 104 blood samples of blood donors,the positive rate of B19 IgM was 5.07%,and the positive rate of B19 IgG was 36.68%,there was a significant difference between them(P<0.05).The positive rate of B19 IgM from females was higher than males′(P<0.05),but there was no statistical difference for the positive rate of B19 IgG between different gender(P>0.05).Comparing with various age groups,There was still no significant difference of the positive rate of B19 IgM among them(P>0.05),but the positive rates of B19 IgG increased with age increasing(P<0.05).The different blood types or collection seasons,and the statistical difference were not established in these two conditions (P>0.05).And there was no significant difference for positive rate of B19 IgM between positive samples and negative samples of HBV,HCV,HIV,the results of B19 IgG also were such(P>0.05).ConclusionAmong blood donors in Chongqing,although there was no screening for B19V,we still found infections by B19V.So this may illustrated that the risk of blood transfusion by B19V was still existed.
blood donors；parvovirus B19,human；antibody；epidemiology
10.3969/j.issn.1671-8348.2015.35.022
重庆市卫生局医学科研基金资助项目(2012-2-482)。
:秦伟斐(1981-),检验师,在读硕士,主要从事血液传染病学研究。△
，Tel：(023)68752293；E-mail：liyafei2008@hotmail.com。
R18;R373
A
1671-8348(2015)35-4968-04
2015-06-16
2015-08-24)
