母逸青
摘 要：美国药典和欧洲药典对蔗糖中的亚硫酸盐都进行了杂质限量检查，所用的方法为酶法。中国药典2015版对亚硫酸盐没有进行杂质限量检查，且在国内检查所用的酶难以购买。本论文探索了用简单便捷的碘量法测定蔗糖中亚硫酸盐的方法，并进行了方法学验证。验证结果，该检测法准确性，重现性，线性均良好，可用于蔗糖中亚硫酸盐的限量检测。
关键词：蔗糖；亚硫酸盐；酶法；碘量法
中图分类号：TS255.7 文献标识码：A 文章编号：1671-2064（2017）21-0189-02
药用蔗糖在医药工业中是一个重要的药用辅料，在片剂中主要作为填充剂（稀释剂），同时也具有矫味和粘合作用。蔗糖具有一定的粘性，在用蔗糖粉作为稀释剂时，在制粒时容易掌握，可减少片剂的麻点、松散等现象，片剂的表面和硬度均较好。因此，药用蔗糖在中药和化学药制剂中都有着广泛的应用，有巨大的市场需求。
蔗糖中的杂质，特别是其中的金属离子、亚硫酸盐和还原糖等，会影响药品的质量而缩短其保质期，给用药安全带来危害。因此，中国药典和美国药典（USP），欧洲药典，日本药典均对蔗糖中的杂质有相应的限量要求。但是，现行版药典中，中国药典对药用蔗糖中的亚硫酸盐没有限量要求，而美国/欧洲/日本药典对亚硫酸盐均有限量要求（不得大于10PPM）。查阅中国药典的通则检查项，也没有亚硫酸盐限量检查的通用方法。美国/欧洲/日本药典蔗糖的亚硫酸盐限量检查是用酶法，具体为亚硫酸盐转化酶等三种酶或辅酶，而我们在国内这三种酶的采购有较大困难，且成本过高，因此，本实验的目的是寻求一种简便，快捷，经济的药用蔗糖中亚硫酸盐限量检测方法。
1 实验原理及实验方案设计
本实验的基本原理是亚硫酸盐与碘的氧化还原反应。用一定浓度的碘滴定液滴定样品中的亚硫酸盐，淀粉指示剂指示终点。终点时，过量的碘滴定液使淀粉指示剂由无色变为蓝色。
碘滴定液的常规使用浓度一般为0.1mol/L或0.05mol/L，在此浓度范围内，每1ml的碘滴定液与0.1mmoL（8mg）或 0.05mmoL（4mg）的亚硫酸盐反应，终点颜色变化敏锐，易判断。但这个浓度对于蔗糖中的亚硫酸盐限量检查太大了，因为蔗糖中亚硫酸盐的限量不得超过10PPM，以蔗糖取样量10g计，亚硫酸盐最多为0.1mg，因此，本实验的碘滴定液浓度应是0.1mol/L*0.01=0.001mol/L，在如此低的浓度范围，淀粉指示剂是否仍有敏锐的终点颜色变化？蔗糖中的亚硫酸盐以外的成分是否对本测定有干扰，本实验设计对蔗糖中的亚硫酸盐是否有一定的专属性？这些问题将在本实验中进行验证。
2 实验内容
2.1 试剂与仪器
碘（分析纯）；碘化钾（分析纯）；亚硫酸钠（分析纯）；可溶性淀粉（分析纯）；蒸馏水（用纯化水新鲜蒸馏，当日使用）。
分析天平（万分之一）；棕色酸式滴定管（10ml，1ml）；移液管；容量瓶。
2.2 预实验
（1）验证用0.0010mol/L碘滴定液滴定0.126mg的亚硫酸钠（即0.08mg亚硫酸根），终点是否敏锐，易判断。
配制并标定碘滴定液0.1mol/L，配制1.26mg/ml亚硫酸钠溶液。
将上述碘滴定液和亚硫酸钠溶液分别稀释100倍和10倍，得到0.001mol/L碘滴定液（滴定液A）和0.126mg/ml亚硫酸钠溶液（对照液A）。精密吸取5ml对照液A于锥形瓶中，加蒸馏水30ml，摇匀，加入淀粉指示剂2滴，滴定液A滴定至蓝色出现，当滴定液消耗5.4ml时，蓝色出现，且颜色变化敏锐，终点易判断；精密吸取1ml对照液A于锥形瓶中，加蒸馏水30ml，摇匀，加入淀粉指示剂2滴，滴定液A滴定至蓝色出现，当滴定液消耗1.3ml时，蓝色出现，且颜色变化敏锐，终点易判断。
（2）验证蔗糖中的亚硫酸盐以外的成分是否对本测定有干扰，本实验对蔗糖中的亚硫酸盐是否有一定的专属性。
称取10g蔗糖样品，加30ml蒸馏水溶解，加入淀粉指示剂2滴，用0.0010mol/L碘滴定液滴定，消耗滴定液0.2ml时，蓝色出现。
另取一锥形瓶，加30ml蒸馏水，加入淀粉指示剂2滴，用0.0010mol/L碘滴定液滴定，消耗滴定液0.2ml时，蓝色出现。
上述实验说明：蔗糖中的亚硫酸盐以外的成分对本测定无干扰，本实验对蔗糖中的亚硫酸盐有一定的专属性。
预实验的结果表明：用0.0010mol/L碘滴定液滴定1.26mg的亚硫酸钠（即0.8mg亚硫酸根），终点颜色变化易判断，可用于10PPM亚硫酸盐的杂质限量检查。下面的实验将对该方法的准确度，重现性，线性，检测限，耐用性进行考察。
2.3 准确度
实验方法：精密吸取1ml0.126mg/ml亚硫酸钠溶液（对照液A）于锥形瓶中，加入10g蔗糖，加30ml蒸馏水溶解，加淀粉指示液2滴，0.0010mol/L碘滴定液（滴定液A）滴定至溶液显蓝色，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml0.0010mol/L碘滴定液相当于0.126mg亚硫酸钠。平行测定3次，计算回收率。实验结果见表1。
2.4 精密度
照上述含量测定方法，重复测定6次，结果如表2。
2.5 线性
分别精密吸取对照液A0.25ml，0.5ml，1.0ml，2.0ml，5.0ml，于锥形瓶中，加入10g蔗糖，加30ml蒸馏水溶解，加淀粉指示液2滴，0.0010mol/L碘滴定液（滴定液A）滴定至溶液显蓝色，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml0.0010mol/L碘滴定液相当于0.126mg亚硫酸钠。结果如表3和图1。
消耗的碘滴定液体积（Y）和亚硫酸钠的加入量（X）之间的线性方程为Y=1.0598X，相关系数0.9998，本实验说明：本测定方法在测定浓度的25%至500%范围内有良好的线性。
2.6 耐用性
本实验因所用的滴定液浓度低，水中溶解的微量亚硫酸盐对实验有一定的影响，所以，本实验所用的水为用纯化水新鲜蒸馏水。为考察不同的水对本实验的影响，分别以30ml自来水，纯化水，纯化新整馏水为空白，空白消耗的碘滴定液体积见表4。
3 实验结论
基于以上实验，我们得出药用蔗糖中亚硫酸盐限量检查方法为：取10克蔗糖样品于锥形瓶中，加30ml蒸馏水溶解，加淀粉指示液2滴，0.0010mol/L碘滴定液滴定至溶液显蓝色，并将滴定的结果用空白试验校正。消耗的0.0010mol/L碘滴定液不得大于1.2ml。
参考文献
[1]中国药典委员会.《中华人民共和国药典》[M].2015.
[2]国家药典委员会编著.《各国药用辅料标准对比手册》[M].中国医药科技出版社[M].2016，第三册（共三册）：674-675.
[3]刘文英主编.全国高等学校教材《药物分析》（第六版）[M].人民卫生出版社，2007.
