旋覆花的研究进展

何国云 李钢 耿红梅

旋覆花主要来源有二，一为旋覆花(Japanese inula)，叶基部渐窄，无小耳，《证类本草》的随州旋覆花与《本草纲目》的旋覆花图即为此种；二为欧亚旋覆花(inula britannica)，叶基宽二抱茎，有小耳，花序较大，《救荒本草》与《植物名实图考》旋覆花为此种，此二者为传统药用正品旋覆花。旋覆花主要分布于我国、韩国和日本，我国主产于河南、河北、江苏、浙江、新疆、东北等地[1]。

中国药典中旋覆花的检验方法只有性状鉴别和简单的薄层鉴别，没有含量测定，不能检出其有效成分的含量，所以经常出现真假难辨、以假充真的现象。为了更好地开发利用旋覆花药用价值，保证药品质量，本文就近十年来旋覆花的鉴别、化学成分、含量测定、作用机制以及药效学的研究进展状况做一系统综述。

1 鉴别

旋覆花为常用传统中药，目前国内市场上主流商品为旋覆花，因其同科属的植物有10多种，历史上各地用药习惯有不同，故市售品混淆现象极为严重。近年来还有引起皮肤过敏反应[2-3]的报道，应引起足够的重视。

张西国等[4]、蔡崇高等[5]从性状鉴别真伪旋覆花药材，聂凤禔等[6]研究了欧亚旋覆花的显微鉴别要点，张晓红等[7]总结了正品旋复花中掺伪品的鉴别。侯艳鹏[8]等从全国24个省、市、自治区收集到27份旋覆花商品药材，其中18份为日本旋覆花，5份为线叶旋覆花，2份为日本旋覆花和线叶旋覆花的混合品，余2份分别为湖北旋覆花和水朝阳旋覆花，做了HPLC指纹图谱分析鉴别。

2 化学成分的提取与分析

2.1 黄酮 耿红梅[9]采用多种分离技术对欧亚旋覆花乙醇提取物的正丁醇部位分离纯化，根据其理化常数测定和光谱数据进行结构鉴定，结果从欧亚旋覆花中分得8个化合物，经鉴定为芦丁、小檗碱、万寿菊苷、异槲皮苷、槲皮苷、绿原酸、槲皮素和山柰酚，首次从欧亚旋覆花植物中得到芦丁、小檗碱。耿红梅等[10]用95%乙醇提取欧亚旋覆花，并用各种柱色谱分离纯化，通过测定理化常数和光谱分析鉴定其结构，结果分离得到10个黄酮类化合物，经鉴定为菠叶素、6-甲氧基-木犀草素、木犀草素、槲皮素、异鼠李素、山柰酚、芦丁、万寿菊苷、异槲皮苷和槲皮苷，首次从欧亚旋覆花植物中得到异鼠李素、槲皮苷。邓双炳等[11]采用多种分离技术对旋覆花乙醇提取物的氯仿和乙酸乙酯萃取部分分离纯化，根据其理化常数测定和光谱数据进行结构鉴定，结果从旋覆花中分得11个化合物，经鉴定为金圣草素，万寿菊素，槲皮素，木犀草素，山奈酚，旋覆花内酯C，旋覆花内酯，胡萝卜苷，β-谷甾醇，大花旋覆花内，首次从欧亚旋覆花植物中得到金圣草素。

2.2 挥发油 查建蓬等[12]用气相色谱-质谱联用仪对山西运城地区产欧亚旋覆花挥发油进行化学成分分析，鉴定了欧亚旋覆花挥发油中的62个成分，约占挥发油总成分的68.4%，主要成分为2，3，4，5-四氢-1-苯并庚英3醇(相对含量4.3%)。

2.3 多糖 付焱等[13]从欧亚旋覆花地上部分提取出水溶性多糖，用苯酚-硫酸法对其进行了测定和初步药理试验，实验表明，欧亚旋覆花多糖有一定的免疫增强作用。

2.4 三萜和甾体化合物 吴一兵等[14]从欧亚旋覆花中分离出三萜和甾体化合物，丁海新等[15]以小麦赤霉病菌和小麦白粉病菌为活性跟踪菌种，从旋覆花花中分离得到3种杀菌活性化合物，鉴定为倍半萜类化合物和三萜类化合物。

2.5 旋覆花内酯结构的改造 刘守信等[16-17]对旋覆花的主要抗肿瘤成分旋覆花内酯进行了结构改造，以此为原料，合成了近50多种新化合物，发现了多种活性好的化合物。

3 化学成分的含量测定

3.1 旋覆花内酯 许俊博等[18]用反相高效液相色谱法，用SpherisorbODS柱，流动相为甲醇-水(40:55)，检测波长210 nm，测定了旋复花中旋复花内酯的含量，结果表明旋复花内酯线性范围为7.984～159.7 μg/ml，r=0.9998，平均回收率97.4%，RSD 1.4%。

3.2 总黄酮 耿红梅等[19]用可见紫外分光光度法对欧亚旋覆花中总黄酮的含量进行了测定，结果旋覆花中总黄酮含量为5%～8%。

3.3 绿原酸 耿红梅[20]高效液相色谱法，采用色谱柱为 Inertsil ODS-3(4.6 mm×250 mm，5.0 μm)，流动相为乙腈-0.4%磷酸溶液(10:90)，流速为1.0 ml/min，检测波长为326 nm，测定了欧亚旋覆花中绿原酸的含量，结果绿原酸在0.20～8.0 μg范围内线性关系良好(r=0.9996)，回归方程Y=5342.2X+1960.5。平均回收率42%，RSD为1.9%。

3.4 咖啡酸 杨斌等[21]用高效液相色谱法测定了旋复花中咖啡酸含量，结果咖啡酸的进样量线性范围为0.017 38～0.434 μg(r=0.9995)， 平 均 回 收 率 为 99.40%，RSD=2.03%(n=6)。吴怀恩等[22]用正交试验确定旋覆花配方颗粒中绿原酸、咖啡酸的最佳提取工艺，并采用HPLC法[1-2，4]同时测定制剂中绿原酸、咖啡酸含量，为旋覆花配方颗粒的质量控制提供科学依据。

3.5 槲皮素 杨玲娟等[23]高效液相色谱法，采用ZORBAX eclipse XDB C8色谱柱(150 mm×4.6 mm，5 μm)，流动相为甲醇-磷酸(0.2%)，体积比为65:35，检测波长为370 nm。实验结果表明，槲皮素在5.0～100.0 μg/ml范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9999)，测定结果的相对标准偏差为1.2%(n=6)，平均加标回收率为97.1%槲皮素在5.0～100.0 μg/ml范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9999)， RSD=为1.2%(n=6)，平均加标回收率为97.1%。

3.6 鞣质 万祺等[24]采用干酪素法合滴定法对旋覆花水提物中鞣质进行含量测定，结果干酪素法鞣质含量为5.96%，RSD=1.68%(n=3)；络合滴定法测得含量为8.32%，RSD=2.09%(n=3)。

4 药理作用机制及药效学研究

4.1 抗氧化作用 耿红梅等[25]采用大脑中动脉栓塞法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型，观察欧亚旋覆花总黄酮(TFIB)对脑缺血-再灌注后大鼠神经症状改善情况，实验结果显示，TFIB对大鼠缺血-再灌注损伤大脑具有显着的保护作用，其作用机制可能与TFIB抗氧化作用有关。

胡建平等[26]对欧亚旋覆花总黄酮提取物对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用进行了研究，结果表明，TFIB对脑缺血再灌注损伤有显着的保护作用，其作用机制与抑制并减少体内脂质过氢化物的产生、增强机体抗氧化活性有关。张红兵等[27]研究观察欧亚旋覆花总黄酮对内皮剥脱诱导的血管组织氧化应激和新生内膜形成的干预效应，在细胞和分子水平上阐述了旋覆花总黄酮能够抑制血管新生内膜形成和由此导致的血管狭窄，抑制VSMC氧化应激。TFIB是一种有效的血管保护制剂，通过抗氧化而减轻血管内皮损伤和内膜增生程度。

近期韩国科学家Kim S R[28]从旋覆花正丁醇提取物中分离出的黄酮类化合物通过DPPH试验证明有抗氧化活性，通过抑制钙内流、降低细胞内过氧化物水平和增加谷胱甘肽水平而对抗谷氨酸对大脑皮层神经细胞的损伤，产生明显的神经保护作用。

4.2 抗肿瘤作用 魏海青等[29]用MTT比色法，检测低、中、高个剂量范围旋覆花素对小鼠肝癌H22细胞株、小鼠肉瘤S180细胞株、人肺腺癌A549细胞株、人卵巢癌SK-OV3细胞株及人宫颈癌Hela细胞株的细胞毒性作用。测定旋覆花素对肿瘤细胞的生长抑制作用，并计算半数抑制浓度IC50。倒置显微镜下及激光共聚焦显微镜下观察旋覆花素对上述5种肿瘤细胞形态的影响，结果表明旋覆花素具有抗肿瘤作用，并有细胞株选择性。

4.3 抗增生作用 万鲲等[30]研究了不同浓度的旋覆花提取物对成纤维细胞形态的影响，结果表明均能使其改变，抑制细胞增殖，浓度在500 μg/ml以下无明显的细胞毒作用。

狄柯坪等[31]采用主动脉球囊损伤后血管再狭窄动物模型，观察旋覆花提取物对内皮剥脱诱导的新生内膜形成的影响，以及旋覆花素对内皮剥脱诱导的新生内膜形成过程中血管壁粘附分子OPN、ICAM-1、ILK表达的影响[32]，结果在实验结束时，模型组损伤处血管壁血管平滑肌细胞(VSMC)大量增生。

4.4 抗炎作用 王英杰等[33]把30只SD大鼠随机分为对照组、模型组及旋覆花素给药组，海马内注射Aβ25～35制备AD大鼠模型，给药组每天给予旋覆花素26 mg/(kg·d)，模型组给予等量溶剂，分两次灌胃，共21 d。用Morris水迷宫测定大鼠的学习记忆能力，免疫组化及Western印迹法测定大鼠海马iNOS、NF、κB蛋白表达。结果显示，旋覆花素的抗炎作用可能是改善AD大鼠学习记忆能力的作用机制之一。

4.5 对肝炎的预防作用 李宗友[34]对日本旋复花中的醋酸蒲公英甾醇酯进行分离、鉴定并做了小鼠急性肝损伤实验，结果显示对实验性肝炎有预防作用。

4.6 抗真菌作用 焦斌等[35]采用生长速率法、孢子萌发法，分别测定了旋覆花花序氯仿萃取物对13种植物病原真菌的离体抑菌活性，并测定了其对黄瓜灰霉病的防治效果。结果表明，在剂量为1.0 g/L时，氯仿萃取物对小麦全独病菌、西瓜炭疽病菌、葡萄炭疽病菌、苹果炭疽病菌、黄瓜灰霉病菌和番茄果腐病菌的菌丝生长有较强的抑制作用，抑制率均在50%以上，其中对小麦全独病菌的抑制作用最强，抑制率高达100%，对西瓜炭疽病菌和番茄果腐病菌孢子萌发抑制率达92.90%和82.92%。在10.0 g/L剂量下，氯仿萃取物对黄瓜灰霉病的治疗效果和保护效果分别为54.27%和76.68%(48 h)，其中保护效果与对照药剂0.4g/L施佳乐无显着差异。

4.7 其他单俊杰等[36]研究发现旋覆花多糖具有抗便秘作用。赵修南[37]研究发现旋覆花多糖具有显着降血糖活性，对血脂紊乱也有一定改善作用，可能作用于胰腺，对糖尿病引起的胰腺损伤有保护作用。王建华[38]对欧亚旋覆花特征性成分旋覆花素进行了镇咳、祛痰活性的实验，发现旋覆花素小鼠口服给药具有着显着的镇咳活性，旋覆花素具有镇咳祛痰作用。

近十年来大量药学工作者对旋复花的鉴别、化学成分、含量测定、作用机制以及药效学做了很多研究，尤其是关于欧亚旋覆花I.britannica L.的研究取得了很大的进展，为旋覆花的正确及合理利用提供了严谨的科学依据，但是对日本旋覆花Inula japonica Thunb.的研究还有待继续。

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