张志聪 张晓笛 岳枫 李晋生 刘莹 靳冉

摘要 目的：观察安宫降压丸对自发性高血压大鼠（SHR）受损靶器官的保护作用。方法：选取18只WKY大鼠为对照组，78只SHR大鼠随机分为SHR模型组、安宫降压丸高剂量组（1 600 mg/kg）、安宫降压丸中剂量组（800 mg/kg）、安宫降压丸低剂量组（400 mg/kg）、卡托普利组（20 mg/kg），连续给药6周。给药前和给药6周后分别测定大鼠的血压。给药6周后取胸主动脉、左心室、大脑、肾脏组织制作病理切片，进行苏木素-伊红（HE）染色，光学显微镜观察各脏器组织病理组织学形态变化。结果：与SHR模型组相比，安宫降压丸各剂量组给药6周后收缩压均明显降低（P＜0.01）；安宫降压丸能够明显改善SHR大鼠胸主动脉、左心室、脑、肾的组织病理损伤。结论：安宫降压丸在降低SHR大鼠血压的同时，对大鼠高血压累及靶器官胸主动脉、心脏、脑、肾脏具有一定的保护作用。

关键词 自发性高血压；安宫降压丸；靶器官；保护作用；大鼠；实验研究

doi：10.12102/j.issn.1672-1349.2024.07.011

高血压是心脑血管系统常见疾病之一。长期持续的血压升高会导致心、脑、肾以及主动脉等靶器官的病理损伤。研究表明，中药的降压机制多样，能兼顾高血压的多个病理环节，包括改善微循环、保护血管内皮、调节血管活性物质、逆转血管重构等。安宫降压丸作为传统中成药，具有清热镇静、平肝降压的功效［1-2］。对于初发难治性高血压病人，在应用标准抗压药的基础上，合并使用安宫降压丸能够明显增强高血压的治疗效果［3］。前期动物实验表明，安宫降压丸对于自发性高血压大鼠（SHR）出现的眩晕、易怒等高血压临床症状有所缓解，可通过调节肾素-血管紧张素系统（RAS）、改善血管内皮功能等发挥其降压作用。本研究团队在前期研究的基础上，进一步探讨安宫降压丸对于高血压受损靶器官的保护作用，为明确安宫降压丸的作用优势和特点提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物

无特定病原体（SPF）级14周龄WKY雄性大鼠18只和雄性SHR大鼠78只，体质量260～300 g，许可证号：SCXK（京）2016-0006。实验动物饲养于SPF级动物室内，日光灯照明，12 h明暗周期，自由饮水、饮食，温度20～26 ℃，送风每小时6～10次，湿度40%～70%。

1.2 分组与给药  实验动物适应性饲养6 d后，将18只WKY大鼠作为对照组，将78只SHR大鼠分为5组：SHR模型组18只，安宫降压丸高剂量组12只，安宫降压丸中剂量组18只，安宫降压丸低剂

量组12只，卡托普利组18只。安宫降压丸高剂量组（1 600 mg/kg）、中剂量组（800 mg/kg）、低剂量组（400 mg/kg）、卡托普利组（20 mg/kg），每日给药1次，连续给药6周。WKY对照组和SHR模型组灌胃同体积的纯净水，每周测量大鼠体质量，调整给药体积。

1.3 药物试剂及仪器

安宫降压丸（北京同仁堂股份有限公司同仁堂制药厂生产，批号：18035208）；卡托普利（常州制药厂有限公司生产，批号：18110912）；组织固定液（北京益利精细化学品有限公司生产，批号：20180806）；95%乙醇（北京化工厂生产，批号：20190118）；100%乙醇（北京化工厂生产，批号：20181008）；二甲苯（北京化工厂生产，批号：20180605）；苏木素（九州柏林，批号：20181130）；伊红（九州柏林，批号：20180115）；切片石蜡58～60 ℃（Leica，批号：20180530）；BX61光学显微镜（日本Olympus）；TP1020全自动组织脱水处理机（德国Leica公司）；ST5010全自动组织切片染色机（德国Leica公司）；BP2010大鼠无创血压仪（北京软隆生物技术有限公司）。

1.4 血压测定

采用大鼠无创血压仪，在安静、干净的实验环境，分别于给药前和给药6周后监测大鼠的尾动脉收缩压。

1.5 病理组织检测

取各组大鼠胸主动脉、左心室、脑、肾脏固定于甲醛溶液，经取材修块，梯度乙醇脱水，包埋，切片厚度4 μm，分别进行苏木素-伊红（HE）染色，另取胸主动脉进行内皮型一氧化氮合酶（eNOS）免疫组化染色，光学显微镜下观察各组织病理情况。

1.6 统计学处理

采用SPSS 19.0统计软件进行数据分析。定量资料结果符合正态分布，以均数±标准差（x±s）表示，采用t检验或F检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 各组大鼠收缩压比较

给药前及给药6周后，SHR模型组收缩压明显高于WKY对照组（P＜0.01）。给药6周后，与SHR模型组相比，安宫降压丸高剂量、中剂量、低剂量组及卡托普利组收缩压均明显降低（P＜0.01）。详见表1。

2.2 各组大鼠胸主动脉病理组织学变化

WKY对照组大鼠胸主动脉结构清晰，内膜层光滑平整，平滑肌细胞排列规则，未见明显异常。SHR模型组大鼠胸主动脉内膜层欠平滑，平滑肌细胞排列紊乱，细胞大小各异，纤维组织排列紊乱。安宫降压丸高、中剂量低各组大鼠胸主动脉结构清晰，内膜层较完整，平滑肌细胞排列规则，未见明显异常。卡托普利组大鼠胸主动脉结构清晰，内膜层平滑，平滑肌细胞排列规则，未见明显异常。详见图1。

2.3 各组大鼠胸主动脉组织中eNOS表达比较

光镜下观察发现，免疫组化染色后，WKY对照组胸主动脉组织切片细胞浆内出现棕黄色颗粒者为阳性细胞，可见eNOS主要表达于主动脉内皮细胞和平滑肌细胞，外膜的成纤维细胞也有少量表达。与WKY对照组相比，SHR模型组大鼠胸主动脉组织中eNOS的表达量明显降低（P＜0.01）；与SHR模型组相比，安宫降压丸高剂量组、低剂量组大鼠胸主动脉组织中eNOS表达明显增加（P＜0.05）。采用图像分析系统计算平均灰度值进行蛋白定量分析，结果见表2，各组胸主动脉eNOS免疫组化染色见图2。

2.4 各组大鼠左心室病理组织学变化

WKY对照组大鼠心肌细胞未见明显肥大，细胞排列较规则，未见明显的心肌纤维化。SHR模型组大鼠心肌细胞排列紊乱，局部心肌纤维断裂，间质炎细胞浸润，心肌纤维化，心肌细胞肥大，局部心肌细胞核近似长方形或圆形肥厚。安宫降压丸高、中、低各剂量组大鼠心肌细胞排列较规则，未见明显心肌细胞肥大，偶见间质纤维化。卡托普利组大鼠心肌细胞排列规则，未见明显心肌细胞肥大，局部偶见心肌纤维化。详见图3。

2.5 各组大鼠脑组织病理组织学变化

WKY对照组大鼠脑神经细胞排列规则，脑血管管壁未见明显增厚，血管周围间隙轻微扩张。SHR模型组大鼠脑内血管管壁增厚、管腔狭窄，血管周围间隙扩大，局部神经细胞排列紊乱。安宫降压丸高剂量、中剂量、低剂量组大鼠脑内血管未见明显管壁增厚，管腔狭窄，局部小血管周围间隙轻微扩大，神经细胞排列规则，未见明显异常。卡托普利组大鼠脑内血管未见明显的管壁增厚，管腔狭窄，血管周围间隙轻微扩张，神经细胞排列规则未见明显异常。详见图4。

2.6 各组大鼠肾脏病理组织学变化

WKY对照组大鼠肾脏组织结构清晰，肾小球未见明显的萎缩、玻璃样变、硬化，肾小球未见明显肥大。SHR模型组大鼠肾脏组织肾小球萎缩，玻璃样变，小球硬化，局部肾小球代偿性肥大，肾小球毛细血管扩张，肾小囊腔狭窄，肾小管排列紊乱，肾小管扩张，肾小管上皮细胞脱落，间质纤维化。安宫降压丸高剂量、中剂量、低剂量组肾脏组织结构清晰，肾小球未见明显病理改变，偶见局部肾小球轻微萎缩伴肥大，肾小球偶见分叶，肾小管见轻微扩张，局部小管上皮细胞脱落。卡托普利组大鼠局部肾小球萎缩，代偿性肾小球肥大，小球内细胞增生，肾小囊腔狭窄，局部小管上皮脱落。详见图5。

3 讨 论

长期高血压会导致血管、心脏、脑、肾脏等靶器官的损伤，会引发左心室肥厚、充血性心力衰竭、脑卒中、肾脏衰竭等并发症［4］。

血管结构的改变是持续高血压的结果。持续的高血压会使血管壁受压，血管内膜破坏，内皮细胞间隙扩大，血管的通透性增加，导致蛋白质或脂质沉积进入血管壁，最终会使血管壁变厚，血管变硬，弹性降低［5-8］。本实验结果表明，SHR大鼠的胸主动脉内膜及细胞层结构紊乱，管壁结构不规则，安宫降压丸能够改善SHR大鼠的胸主动脉病理损伤，表明其对高血压大鼠的血管损伤具有一定的保护作用。

eNOS为结构型一氧化氮合酶（NOS），主要分布于血管内皮细胞、心肌细胞、肾小管上皮细胞等组织中。eNOS能够催化产生一氧化氮（NO），是体内重要的舒张血管物质，具有扩张血管、调节血压、抑制血小板聚集、抗平滑肌细胞增殖、白细胞黏附等作用［9］。eNOS表达减少导致NO生成减少，从而引起内皮功能障碍，血压升高［10］。本实验结果表明，安宫降压丸能够提高SHR大鼠胸主动脉eNOS的表达，从而发挥其保护血管和降低血压的作用。

心脏是高血压病损害最主要的靶器官之一。心脏改变主要表现为心肌细胞肥大，心肌间质增生，心室壁向心性肥厚，心室腔容积减小，冠状动脉供血不足，这种改变称为心脏结构的重塑［11］。血压升高是引起左心室肥厚的重要因素。左心室肥厚既是心肌细胞实质成分的肥大，同时存在心肌间质成分和血管结构变化。这种复杂的心脏“重构”主要表现在心肌细胞肥大、心肌异常纤维化、冠状动脉硬化等病理变化［12］。本研究中，SHR大鼠的左心室病理变化主要表现为心肌细胞排列紊乱，局部心肌纤维断裂，心肌纤维化，心肌细胞肥大，局部心肌细胞核近似长方形或圆形肥厚。安宫降压丸对于左心室心肌细胞的病理改变具有明显的抑制作用。

高血压会导致体内小微血管结构的轻微改变，会使血管硬化，管腔增厚。SHR大鼠脑部血管结构的病变即重构性病变和肥厚性病变，从而使血管内径缩小，管腔变厚［13］。本实验中，SHR大鼠脑内血管管壁增厚，管腔狭窄，血管周围组织间隙扩大。安宫降压丸能够有效缓解SHR大鼠脑血管的病理改变，表明其对大鼠脑血管损伤具有一定的保护作用。

长期高血压会导致高血压肾病。肾脏病理损伤由肾小球、肾小管缺血造成。主要表现为肾小球毛细血管壁皱缩性萎陷，毛细血管壁增厚，系膜区基质增生，囊壁增厚、硬化，肾间质纤维化等［14］。本实验中SHR大鼠模型肾脏病理组织学变化主要表现为肾小球萎缩，玻璃样变，小球硬化，局部肾小球代偿性肥大，肾小球毛细血管扩张，肾小囊腔狭窄，肾小管排列紊乱，肾小管扩张，肾小管上皮细胞脱落，间质纤维化。安宫降压丸能够在一定程度上缓解SHR大鼠肾小球和肾小管的病理损伤。对于SHR大鼠肾脏具有一定的保护作用。

综上所述，安宫降压丸可以降低SHR大鼠的血压，对SHR大鼠的胸主动脉、心、脑、肾靶器官具有一定的保护作用，其保护作用机制有待进一步深入研究。

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（收稿日期：2022-08-05）

（本文编辑王丽）