张彬，娄红，刘松，刘志

保定市第二医院普通外科，河北 保定0710000

胃癌是最常见的消化系统恶性肿瘤，具有较高的发病率，早期胃癌患者多无特异性临床症状，早期诊断率低，当患者出现症状或确诊时已属于进展期或晚期。胃癌患者的预后除了与治疗方式有关外，还与胃癌的临床分期、病理类型以及生物学行为等有关。因此，寻找简便易行的胃癌相关性检测指标，并探讨其在胃癌早期诊断和预后判断中的应用价值是目前胃癌研究领域中的重要课题[1]。有研究表明，血管内皮细胞生长因子在肿瘤的生长、侵袭和转移过程中发挥着重要的作用，为新生血管的形成提供基质支架；趋化因子主要分布于细胞的细胞膜和细胞质中，能直接刺激新生血管的形成；血管内皮细胞生长因子和趋化因子不仅对细胞的各项生命活动起着重要的调控作用，而且对肿瘤细胞的增殖、迁移具有协同作用。趋化因子受体 7（C-X-C chemokine receptor 7，CXCR7）是趋化因子受体家族中的一员[2]。有研究发现，CXCR7和趋化因子受体4（C-X-C chemokine receptor 4，CXCR4）均是趋化因子配体 12（C-X-C chemokine ligand 12，CXCL12）[即基质细胞衍生因子-1（stromal cell-derived factor-1，SDF-1）]的受体，而SDF-1已被证实在胃癌、卵巢癌和膀胱癌等恶性肿瘤的发生、发展过程中均发挥着重要的作用[3-5]。本研究比较了104例胃癌患者胃癌组织、癌旁黏膜组织和50例胃部良性病变患者正常胃黏膜组织中CXCR7的表达情况，并分析了CXCR7的阳性表达与胃癌患者临床特征的关系，旨在为胃癌的临床诊治开拓新的思路，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2015年1月至2017年12月保定市第二医院收治的胃癌患者的胃癌组织标本。胃癌患者的纳入标准：①均进行了胃癌根治性切除术；②均经组织病理学检查证实；③未接受过任何与肿瘤相关的治疗；④临床资料完整。排除标准：合并其他恶性肿瘤的患者。根据纳入和排除标准，本研究共纳入104例胃癌患者，其中，男66例，女38例；51岁以下7例，51～69岁83例，69岁以上14例。同时选取上述104例胃癌患者的癌旁黏膜组织（距肿瘤边缘≥5 cm）标本，标本均经病理检查证实无肿瘤细胞浸润。另选取本院同期收治的行胃次全切除术的胃部良性病变患者的正常胃黏膜组织标本。胃部良性病变患者的纳入标准：①经病理诊断及胃镜检查确诊患有胃炎、胃溃汤、良性肿瘤或息肉等；②组织病理学检查证实未产生恶性病变；③临床资料完整。排除标准：①合并自身免疫性疾病；②存在严重的心、脑、肾、肝等功能障碍；③合并精神类疾病。根据纳入和排除标准，本研究共纳入胃部良性病变患者50例，其中，男32例，女18例；51岁以下4例，51～69岁40例，69岁以上6例。两组患者的性别、年龄比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 免疫组织化学染色方法

采用免疫组织化学法和免疫荧光双染法检测胃癌组织、癌旁黏膜组织和正常胃黏膜组织中CXCR7的表达情况。具体方法：所有组织标本以10%中性甲醛溶液固定，经常规石蜡包埋后作连续性病理切片，厚度约为4 μm；将切片脱蜡至水，以微波枸橼酸盐进行抗原修复，行二氨基联苯胺（diaminobenzidine，DAB）室温显色，一抗和二抗的稀释浓度均为1∶200，苏木素复染，脱水、透明、封片；磷酸盐缓冲液（phosphate buffered saline，PBS）洗涤。检测试剂为兔抗人CXCR7多克隆抗体（购自美国Abnova公司），严格按照说明书的步骤进行操作。

1.3 免疫组织化学染色结果判定标准及观察指标

以细胞质内出现黄色或者棕黄色颗粒为阳性染色，综合阳性细胞占肿瘤细胞的比例和染色强度进行半定量判定。参照相关文献[6]对染色强度和阳性细胞占肿瘤细胞的比例进行评分。染色强度判定标准：无色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。阳性细胞占肿瘤细胞的比例判定标准：选取5个高倍视野（×400）于显微镜下进行观察，计算阳性细胞占肿瘤细胞的比例，阳性细胞所占比例≤5%为0分，6%～25%为1分，26%～50%为2分，51%～75%为3分，>75%为4分。两项评分相加，最终结果0分为阴性（-），1～3分为弱阳性（+），4～5分为中度阳性（++），6～7分为强阳性（+++）。本研究将弱阳性（+）、中度阳性（++）和强阳性（+++）归为阳性表达，将阴性（-）归为阴性表达。比较胃癌组织、癌旁黏膜组织、正常胃黏膜组织中CXCR7的阳性表达率，分析CXCR7表达与胃癌患者临床特征的关系，以及CXCR7表达与胃癌患者临床特征的相关性。

1.4 统计学方法

采用SPSS 20.0软件对数据进行统计分析。计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用t检验；计数资料以例数和率（%）表示，组间比较采用χ2检验；相关性分析采用Spearman秩相关分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 CXCR 7在胃癌组织和正常胃黏膜组织中的表达情况

胃癌组织中CXCR7的阳性表达率为94.23%，明显高于正常胃黏膜组织的2.00%，差异有统计学意义（χ2=125.106，P＜0.01）；胃癌组织中CXCR7中度阳性（++）和强阳性（+++）的比例较高。（表1）

表1 胃癌组织和正常胃黏膜组织中CXCR 7的表达情况[ n（%）]

2.2 CXCR 7在胃癌组织及癌旁黏膜组织中的阳性表达情况

CXCR7在胃癌组织中的阳性表达率为94.23%（98/104），明显高于癌旁黏膜组织中的37.50%（39/104），差异有统计学意义（χ2=74.437，P＜0.01）。

2.3 不同临床特征胃癌患者胃癌组织中CXCR 7的表达情况

肿瘤直径≥5 cm、TNM分期为Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴结转移、低分化、侵及浆膜的胃癌患者胃癌组织中CXCR7的阳性表达率均高于肿瘤直径＜5 cm、TNM分期为Ⅰ～Ⅱ期、无淋巴结转移、中高分化、未侵及浆膜的胃癌患者，差异均有统计学意义（P＜0.05）。（表2）

表2 不同临床特征胃癌患者胃癌组织中CXCR 7表达情况的比较

2.4 CXCR 7表达与胃癌患者临床特征的相关性

经Spearman秩相关分析，结果显示，胃癌患者的肿瘤直径、TNM分期、淋巴结转移情况、浸润深度均与胃癌组织中CXCR7的表达呈明显正相关（r=0.538、0.627、0.569、0.597，P＜0.01），分化程度与胃癌组织中CXCR7的表达呈明显负相关（r=-0.513，P＜0.01）。

3 讨论

胃癌多发于胃窦部、胃大弯和胃小弯，绝大多数胃癌属于胃腺癌，患者的发病年龄大多在50岁以上。近年来，胃癌的发病率逐渐下降，且呈现年轻化的趋势；在性别方面，中国男性胃癌的发病比例高于女性[7]。胃癌的发病原因至今尚未完全清楚，其症状与胃炎、胃溃疡等慢性胃疾病的症状相似，目前认为胃癌的发生可能与患者的饮食结构、工作压力、幽门螺杆菌感染、环境和遗传等因素有关[8]。有研究表明，幽门螺杆菌是与胃癌相关的病原菌，幽门螺杆菌感染的黏膜上皮组织内CXC趋化因子表达增高，通过过度募集白细胞而产生胃黏膜慢性炎症反应，增加病变上皮细胞癌变的概率，演变成为胃癌，提示趋化因子及其受体也可能参与了胃部肿瘤的发生、发展及转移等过程[9]。

趋化因子是一类能够趋化细胞移动的小分子分泌蛋白，由70～100个氨基酸组成。目前已发现了多种趋化因子。所有趋化因子蛋白质序列中均有4个保守的半胱氨酸，可分为CXC、CC、CX3C和C四个亚型，其对应的受体有CXCR、CCR、CX3CR和CR。CXCL12属于CXC型趋化因子。有研究发现，CXCL12广泛表达于多种肿瘤组织和细胞中，CXCL12的唯一受体是CXCR4，既往关于CXCL12/CXCR4反应轴的研究较多，CXCL12与CXCR4结合能够促进肿瘤细胞的侵袭和转移[10]。也有研究发现，CXCR7也是CXCL12的受体，且与CXCL12具有较高的亲和力[10]，由此推断，作为趋化因子与其特异性受体结合而发挥生物学效应的CXCR7，同样可能会促进肿瘤细胞的增殖、侵袭、迁移、黏附以及肿瘤新生血管的生成[11]。有研究发现，CXCR7与肝癌、乳腺癌、子宫癌、胰腺癌等恶性肿瘤的发生、发展密切相关[12-13]。CXCR7主要表达于细胞的细胞膜和细胞质中。本研究中，胃癌组织中CXCR7的阳性表达率明显高于正常胃黏膜组织，且CXCR7在胃癌组织及其癌旁黏膜组织中均有所表达，胃癌组织中CXCR7的阳性表达率明显高于癌旁黏膜组织（P＜0.01），表明CXCR7的表达水平升高可能对胃癌的发生发展具有促进作用[14]。

CXCR7与肿瘤微环境有关。恶性肿瘤的迅速生长需要一定的宿主微环境作诱导，肿瘤细胞的增殖需要产生和分泌细胞因子，从而刺激血管和间质增生[15]。CXCR7属于G蛋白偶联受体超家族，由362个氨基酸排列而成，胃癌组织中CXCR7的表达水平较高，极大地促进了肿瘤微环境中间质纤维母细胞和血管内皮细胞的生成，营造了肿瘤生长和转移的微环境[16]。本研究发现，肿瘤直径≥5 cm、TNM分期为Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴结转移、低分化、侵及浆膜的胃癌患者胃癌组织中CXCR7的阳性表达率均高于肿瘤直径＜5 cm、TNM分期为Ⅰ～Ⅱ期、无淋巴结转移、中高分化、未侵及浆膜的胃癌患者（P＜0.05），表明肿瘤直径、TNM分期、淋巴结转移情况、分化程度和浸润深度可能与CXCR7的表达有关。关于这一结论的相关机制虽仍有待进一步探索，但CXCR7在胃癌发生、发展中的潜在作用已得到广泛认可，CXCR7表达情况的检测有助于对胃癌患者的病情与预后进行判断[17-18]。基于此，有研究认为通过阻断CXCL12/CXCR7信号通路，或对一些与肿瘤发生、发展密切相关的靶基因或因子[如基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）、钙粘蛋白、纤维连接蛋白等]的表达及信号转导通路进行调控，从而抑制肿瘤细胞生长的治疗方法值得探究[4]。

综上所述，CXCR7在胃癌组织中的表达水平较高，且其表达水平与胃癌患者的肿瘤直径、TNM分期、淋巴结转移情况、分化程度和浸润深度有关。CXCR7在胃癌组织中表达的具体机制仍有待进一步探索。CXCR7有望成为胃癌早期诊断和病情评估的指标之一，且有可能为胃癌的治疗提供新的策略。